抗(kang)體(ti)elisa檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)主要用(yong)於(yu)體(ti)外(wai)定性(xing)檢(jian)測(ce)人(ren)血(xue)清(qing)或(huo)血(xue)漿中(zhong)的抗(kang)人(ren)類戊(wu)型(xing)肝(gan)炎(yan)(HEV)病毒(du)IgM抗(kang)體(ti)。是(shi)ELISA的基(ji)礎(chu)是抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)的固相(xiang)化及抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)的酶(mei)標(biao)記。結(jie)合(he)在(zai)固相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)面的抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)仍(reng)保持(chi)其(qi)免(mian)疫學活(huo)性(xing),酶(mei)標(biao)記的抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)既(ji)保留(liu)其(qi)免(mian)疫學活(huo)性(xing),又(you)保留(liu)酶(mei)的活(huo)性(xing)。
采(cai)用(yong)的全是(shi)進(jin)口原(yuan)材(cai)料研,發(fa)靈敏(min)性(xing)高(gao),高(gao)效性(xing),*抗(kang)體(ti),吸(xi)附(fu)均勻、吸附(fu)性(xing)好,回(hui)收利用(yong)率高(gao)、可(ke)靠性(xing)強,無(wu)效包(bao)退包(bao)換,公司提(ti)供(gong)免(mian)費(fei)代(dai)測(ce)服(fu)務,各種種屬(shu)elisa試劑(ji)盒(he)產品齊全,質量可(ke)靠(kao)。用於(yu)測定血(xue)清(qing),血(xue)漿及(ji)相(xiang)關(guan)液(ye)體(ti)等樣(yang)本(ben)。例如(ru)適(shi)合(he)檢(jian)測(ce)包(bao)括血(xue)清(qing)、血(xue)漿、尿(niao)液、胸(xiong)腹(fu)水(shui)、灌(guan)洗(xi)液(ye)、腦(nao)脊液、細(xi)胞(bao)培養上清(qing)、組(zu)織(zhi)勻漿等標(biao)本(ben)。
1、包(bao)被抗(kang)體(ti):
將包(bao)被抗(kang)體(ti)用(yong)碳(tan)酸鹽緩沖(chong)液(或(huo)其(qi)他指(zhi)定緩(huan)沖(chong)液)稀(xi)釋至適(shi)當濃(nong)度(du)。
將稀釋後的抗(kang)體(ti)加入微孔(kong)板(ban)中(zhong),每(mei)孔(kong)加入適(shi)量體(ti)積(ji)。
在(zai)室溫下孵育(yu)壹(yi)段(duan)時(shi)間(jian)(通(tong)常(chang)為1-2小時(shi)),使抗(kang)體(ti)與微孔(kong)板(ban)結(jie)合(he)。
2、洗(xi)滌(di):
用(yong)洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液(通(tong)常(chang)為PBS-Tween)洗(xi)滌(di)微孔(kong)板(ban),去(qu)除(chu)未結(jie)合(he)的抗(kang)體(ti)。
重(zhong)復(fu)洗(xi)滌(di)幾次(ci),確(que)保洗(xi)滌(di)幹(gan)凈(jing)。
3、加樣(yang):
將待測樣(yang)本(ben)和(he)標(biao)準品(如(ru)有(you))分(fen)別加入微孔(kong)板(ban)中(zhong),每(mei)孔(kong)加入適(shi)量體(ti)積(ji)。
設(she)置(zhi)空(kong)白對(dui)照(zhao)和(he)陰性(xing)對(dui)照(zhao),以排(pai)除(chu)非(fei)特異(yi)性(xing)幹(gan)擾(rao)。
4、孵(fu)育(yu):
在(zai)室溫下孵育(yu)壹(yi)段(duan)時(shi)間(jian)(通(tong)常(chang)為1-2小時(shi)),使樣(yang)本(ben)中(zhong)的抗(kang)體(ti)與包(bao)被抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)。
5、加酶(mei)標(biao)二抗(kang):
將酶(mei)標(biao)二抗(kang)用稀釋液稀(xi)釋至適(shi)當濃(nong)度(du)。
將稀釋後的酶(mei)標(biao)二抗(kang)加入微孔(kong)板(ban)中(zhong),每(mei)孔(kong)加入適(shi)量體(ti)積(ji)。
在(zai)室溫下孵育(yu)壹(yi)段(duan)時(shi)間(jian)(通(tong)常(chang)為30分(fen)鐘至(zhi)1小時(shi)),使酶(mei)標(biao)二抗(kang)與樣(yang)本(ben)中(zhong)的抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)。
6、再次洗(xi)滌(di):
用(yong)洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液再次洗(xi)滌(di)微孔(kong)板(ban),去(qu)除(chu)未結(jie)合(he)的酶(mei)標(biao)二抗(kang)。
重復(fu)洗(xi)滌(di)幾次(ci),確(que)保洗(xi)滌(di)幹(gan)凈(jing)。
7、加底(di)物(wu):
將底物(wu)溶(rong)液加入微孔(kong)板(ban)中(zhong),每(mei)孔(kong)加入適(shi)量體(ti)積(ji)。
在(zai)室溫下避(bi)光孵育(yu)壹(yi)段時(shi)間(jian)(通(tong)常(chang)為15-30分(fen)鐘),使酶(mei)催化底物(wu)產(chan)生顏色反(fan)應。
8、終(zhong)止(zhi)反(fan)應:
加入終(zhong)止液(通常(chang)為硫酸)終(zhong)止(zhi)反(fan)應。
輕輕搖(yao)動微孔(kong)板(ban),使反(fan)應充(chong)分(fen)終止(zhi)。
9、讀數(shu):
使用酶(mei)標(biao)儀在(zai)指(zhi)定波長(chang)下讀取(qu)各孔(kong)的吸(xi)光度(du)值(zhi)。
根據標(biao)準曲(qu)線(xian)計(ji)算(suan)待測樣(yang)本(ben)中(zhong)抗(kang)體(ti)的濃(nong)度(du)或(huo)滴(di)度(du)。