R5421 感受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10​

R5421 感受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10​ 操作(zuo)方法（以下操作(zuo)均(jun)按無(wu)菌(jun)條件(jian)的(de)標(biao)準進(jin)行(xing)）
1 取感受態(tai)細(xi)胞置(zhi)於(yu)冰浴中，如(ru)需分裝(zhuang)可(ke)將(jiang)剛融(rong)化細(xi)胞懸液(ye)分裝(zhuang)到(dao)無(wu)菌(jun)預冷的(de)離(li)心管(guan)中，置(zhi)於(yu)冰浴中。
●  壹次轉化感受(shou)態(tai)細(xi)胞的(de)建議(yi)用(yong)量為50-100 μl，可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)分裝(zhuang)使(shi)用(yong)。應註(zhu)意所(suo)用(yong)DNA 體積不(bu)要超(chao)過(guo)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞懸液(ye)體積的(de)十(shi)分之壹。
以下實(shi)驗(yan)以(yi)100 μl感(gan)受態(tai)細(xi)胞為例(li)。
R5421 感(gan)受態(tai)細(xi)胞100ul*10​ 2 向感(gan)受態(tai)細(xi)胞懸液(ye)中加(jia)入目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受態(tai)細(xi)胞能夠(gou)被(bei)1 ng 超(chao)螺旋質粒(li)DNA 所(suo)飽和），輕輕旋轉離心管(guan)以(yi)混(hun)勻內容(rong)物，在冰浴中靜置(zhi)30 分鐘。
3 將(jiang)離心管(guan)置(zhi)於(yu)42℃水(shui)浴(yu)中放置(zhi)60-90 秒，然(ran)後快速將(jiang)管(guan)轉移到(dao)冰浴中，使細(xi)胞冷卻(que)2-3 分鐘，該過(guo)程(cheng)不(bu)要搖(yao)動離心管(guan)。
4 向每(mei)個離心管(guan)中加(jia)入900 μl 無(wu)菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培養基(ji)（不含(han)抗(kang)生(sheng)素）， 混(hun)勻後(hou)置(zhi)於(yu)37℃搖(yao)床(chuang)振蕩培養1 小(xiao)時(shi)（160-220 轉/分鐘），目(mu)的(de)是使質粒(li)上相關(guan)的(de)抗(kang)性(xing)標記基(ji)因表(biao)達，使菌體復(fu)蘇。
R5421 感受態(tai)細(xi)胞100ul*10​ 5 將(jiang)離心管(guan)內(nei)容(rong)物混(hun)勻，吸(xi)取100 μl 已(yi)轉化的(de)感(gan)受態(tai)細(xi)胞加(jia)到(dao)含(han)相應抗(kang)生(sheng)素的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體瓊(qiong)脂(zhi)培養基(ji)上，用(yong)無(wu)菌(jun)的(de)彎(wan)頭玻(bo)棒輕輕的(de)將(jiang)細(xi)胞均(jun)勻塗(tu)開。將(jiang)平板置(zhi)於(yu)室溫(wen)直(zhi)至(zhi)液(ye)體被(bei)吸(xi)收，倒(dao)置(zhi)平板，37℃培養12-16 小(xiao)時(shi)。
●  塗布用(yong)量可(ke)根(gen)據(ju)具體(ti)實(shi)驗(yan)來調(tiao)整(zheng)。如(ru)轉化的(de)DNA 總(zong)量較(jiao)多，可(ke)取(qu)更少量轉化產(chan)物(wu)塗(tu)布平(ping)板；反之，如(ru)轉化的(de)DNA 總(zong)量較(jiao)少，可(ke)取(qu)200-300 μl 轉化產(chan)物(wu)塗(tu)布平(ping)板。如(ru)果預(yu)計的(de)克(ke)隆較(jiao)少，可(ke)通(tong)過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分鐘）後吸除部分培養液(ye)，懸浮菌(jun)體後(hou)將(jiang)其塗(tu)布於(yu)壹個平板中。（塗布剩(sheng)余(yu)的(de)菌(jun)液(ye)可(ke)置(zhi)於(yu)4℃保(bao)存，如(ru)果次日(ri)的(de)轉化菌落數(shu)過(guo)少可(ke)以(yi)將(jiang)剩(sheng)下的(de)菌(jun)液(ye)再塗(tu)布新(xin)的(de)培養板）
 註(zhu)意事(shi)項
1. 感(gan)受態(tai)細(xi)胞應保(bao)存在 -70℃，不可(ke)多次凍(dong)融(rong)和放(fang)置(zhi)時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)，以避免降低感(gan)受態(tai)細(xi)胞的(de)轉化效(xiao)率。
2. 進(jin)行(xing)轉化操作(zuo)時(shi)，應根(gen)據(ju)相應溫(wen)度(du)及(ji)無(wu)菌(jun)條件(jian)的(de)要求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為防止(zhi)轉化實(shi)驗(yan)不(bu)成功，可(ke)以(yi)保(bao)留部分連接(jie)反應液(ye)，以重(zhong)新(xin)轉化，將(jiang)損失(shi)降到(dao)低。
以(yi)下是的(de)相關(guan)產(chan)品(pin)：

 SDH 人(ren)脫氫(qing)酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CT 人(ren)沙(sha)眼(yan)衣(yi)原(yuan)體抗(kang)體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CT 人(ren)沙(sha)眼(yan)衣(yi)原(yuan)體抗(kang)體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 KLR 人(ren)殺傷細(xi)胞凝集(ji)素(su)樣受體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 KIR 人(ren)殺傷細(xi)胞免疫球蛋白(bai)樣受體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BPI 人(ren)殺菌性(xing)/通透(tou)性(xing)增(zeng)加(jia)蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 cecropin 人(ren)殺菌肽(tai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PEDF 人(ren)色(se)素上皮(pi)衍生(sheng)因子 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 T3 人(ren)*狀腺原(yuan)氨(an)酸 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HC gp-39 人(ren)軟(ruan)骨糖蛋白(bai)39 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 COMP 人(ren)軟(ruan)骨寡(gua)聚基(ji)質蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BRCA-2 人(ren)乳腺(xian)癌易(yi)感蛋白(bai)2 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BRCA-1 人(ren)乳腺(xian)癌易(yi)感蛋白(bai)1 規(gui)格(ge)： 48T/96T

人(ren)乳腺(xian)癌標(biao)誌(zhi)物-CA153ELISA Kit，48T/96T 人(ren)乳腺(xian)癌標(biao)誌(zhi)物-CA153ELISA Kit，48T/96T 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HPV-IgM 人(ren)狀瘤(liu)病毒抗(kang)體(ti)IgM 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HPV-IgG 人(ren)狀瘤(liu)病毒抗(kang)體(ti)IgG 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HPV 人(ren)狀瘤(liu)病毒抗(kang)體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 LF/LTF Ab-Ig 人(ren)乳鐵(tie)傳(chuan)遞(di)蛋白(bai)/乳鐵(tie)蛋白(bai)抗(kang)體(ti)IgG 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 LF/LTF 人(ren)乳鐵(tie)傳(chuan)遞(di)蛋白(bai)/乳鐵(tie)蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 LDH 人(ren)乳酸脫(tuo)氫(qing)酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Hc 人(ren)溶(rong)血(xue)補(bu)體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HLAMP-2 人(ren)溶(rong)酶體相關(guan)膜蛋白(bai)2 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 LZM 人(ren) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 β-HCG β 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HCG 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PAPP-A 人(ren)相關(guan)血(xue)漿蛋白(bai)A 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 SP1/PSβ1-G 人(ren)特異性(xing)β1糖蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HG 人(ren)皰(pao)疹(zhen)抗(kang)體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSF-1 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)因(yin)子1 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSP gp96 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)糖蛋白(bai)96 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSP-90 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)90 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSP-70 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)70 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Hsp-60 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)60 規(gui)格(ge)： 48T/96T

R5421 感受(shou)態(tai)細(xi)胞100ul*10​  HSP-40 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)40 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSP-27 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)27 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HSP-20 人(ren)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)20 規(gui)格(ge)： 48T/96T