Y190 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50

Y190 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50以(yi)下(xia)是(shi)的(de)訂(ding)購信息(xi)儲(chu)存(cun)條件：-70℃凍(dong)存
操(cao)作方(fang)法(fa):
1. 取(qu)-80℃保(bao)存(cun)的(de)農桿菌(jun)感(gan)受(shou)態(tai)於(yu)室溫(wen)或(huo)手(shou)心(xin)片(pian)刻(ke)待(dai)其(qi)部分(fen)融(rong)化(hua)，處於(yu)冰(bing)水(shui)混(hun)合(he)狀(zhuang)態(tai)時插入冰(bing)中。
2.每(mei)100 μl感(gan)受(shou)態(tai)加入0.01-1 μg質粒(li)DNA（轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)較高(gao)，*次(ci)使用(yong)前做(zuo)預(yu)實(shi)驗(yan)確定(ding)所(suo)加(jia)質粒(li)的(de)量），用(yong)手(shou)管底混(hun)勻，依(yi)次(ci)於(yu)冰(bing)上靜(jing)置5分(fen)鐘、液(ye)氮5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴5分(fen)鐘、冰(bing)浴5分(fen)鐘。
3. 加(jia)入700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB液(ye)體培養(yang)基(ji)，於(yu)28℃振(zhen)蕩培養(yang)2~3小時。
Y190 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*504. 6000 rpm離(li)心(xin)壹(yi)分(fen)鐘收(shou)菌(jun)，留取(qu)100 μl左(zuo)右(you)上清輕(qing)輕(qing)吹打(da)重(zhong)懸菌(jun)塊(kuai)塗布於(yu)含(han)相應(ying)抗(kang)生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB平板上，倒(dao)置放於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)2-3天(tian)
註(zhu)意(yi)事(shi)項
1. 加入質粒(li)時體積不(bu)應(ying)大於(yu)感(gan)受(shou)態(tai)體積的(de)1/10；質粒(li)不(bu)純或(huo)存(cun)在(zai)乙(yi)醇(chun)等有機(ji)物(wu)汙染(ran)，轉化(hua)效(xiao)率(lv)急劇(ju)下(xia)降(jiang)；質粒(li)增(zeng)大壹倍，轉化(hua)效(xiao)率(lv)下降(jiang)壹個數(shu)量級。
2. 混(hun)入質粒(li)時應(ying)輕(qing)柔操(cao)作。轉化(hua)高濃度(du)的(de)質粒(li)可(ke)相應(ying)減少終(zhong)用(yong)於(yu)塗板的(de)菌(jun)量(liang)。
Y190 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*503. 平板上陽(yang)性克隆(long)密(mi)度(du)過(guo)大時，由於(yu)營(ying)養(yang)不足，陽(yang)性克隆(long)生(sheng)長變(bian)慢(man)，菌(jun)落(luo)變(bian)小，為了(le)獲得大的(de)菌(jun)落(luo)，應(ying)減少質粒(li)用(yong)量。
4. 濃度(du)不(bu)應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml，過(guo)高(gao)的(de)濃度(du)不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)生(sheng)長，會降(jiang)低其(qi)生(sheng)長速(su)度(du)和(he)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。本公(gong)司感受(shou)態(tai)計算(suan)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)時所(suo)用平板只含(han)有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化(hua)效(xiao)率(lv)降(jiang)低到1/2。
5. 培養(yang)基(ji)中加(jia)入的(de)目的(de)是(shi)防止(zhi)雜菌(jun)生(sheng)長、篩選(xuan)農(nong)桿菌(jun)；根據所用菌(jun)株(zhu)抗(kang)性加入Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素可(ke)防止(zhi)Ti質粒(li)丟失(shi)，但(dan)Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)的(de)轉基(ji)因(yin)操(cao)作，所以(yi)壹(yi)般(ban)培(pei)養(yang)農桿菌(jun)時不(bu)考慮(lv)這些抗(kang)生(sheng)素，Ti質粒(li)丟失(shi)的(de)概率(lv)極(ji)低(可(ke)以(yi)忽(hu)略(lve))。

 IMA 人缺(que)血(xue)修飾(shi)白(bai)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 ALD 人醛(quan)縮酶 規格： 48T/96T

 ALD 人醛(quan)固(gu)酮(tong) 規格： 48T/96T

 i-PTH 人全(quan)段(duan)甲狀(zhuang)旁(pang)腺素(su) 規格： 48T/96T

 ASGPR 人去唾(tuo)液酸糖(tang)蛋(dan)白(bai)受(shou)體 規格： 48T/96T

 NA 人 規格： 48T/96T

 FK 人趨化(hua)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 SRB/CD36 人清道夫受(shou)體B 規格： 48T/96T

 SM 人鞘磷(lin)脂(zhi) 規格： 48T/96T

 Dsg-1 人橋(qiao)粒(li)芯(xin)糖蛋(dan)白(bai)-1 規格： 48T/96T

 Hyl 人羥(qiang)賴氨(an)酸 規格： 48T/96T

 OH-PYD 人羥(qiang)基(ji)膠(jiao)原(yuan)吡啶交(jiao)聯 規格： 48T/96T

 HRGP 人羥(qiang)糖(tang)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 Hyp 人羥(qiang) 規格： 48T/96T

 Dyn 人強(qiang)啡肽(tai) 規格： 48T/96T

 LMP-1 人潛(qian)伏膜蛋(dan)白(bai)1 規格： 48T/96T

 Pro-ANP 人前(qian)心(xin)鈉(na)肽(tai) 規格： 48T/96T

 Pro-ANP 人前(qian)心(xin)鈉(na)肽(tai) 規格： 48T/96T

 PSA 人前(qian)列(lie)腺特異性抗(kang)原(yuan) 規格： 48T/96T

 PAP 人前(qian)列(lie)腺酸性磷酸酶(mei) 規格： 48T/96T

 PGF 人前(qian)列(lie)腺素(su)F 規格： 48T/96T

 PGE2 人前(qian)列(lie)腺素(su)E2 規格： 48T/96T

 PGE1 人前(qian)列(lie)腺素(su)E1 規格： 48T/96T

 PTGDS 人前(qian)列(lie)腺素(su)D合(he)成酶 規格： 48T/96T

 PGDS 人前(qian)列(lie)腺素(su)D合(he)成酶 規格： 48T/96T

 PGI 人前(qian)列(lie)環素(su) 規格： 48T/96T

 PCP 人前(qian)膠(jiao)原C端肽(tai)酶 規格： 48T/96T

 PA 人前(qian)白(bai)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 CALLA 人普(pu)通(tong)急性淋(lin)巴細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病抗(kang)原(yuan) 規格： 48T/96T

 GLUT3 人葡萄糖轉(zhuan)運蛋(dan)白(bai)3 規格： 48T/96T

 GLUT1 人葡萄糖轉(zhuan)運蛋(dan)白(bai)1 規格： 48T/96T

 GIP 人葡萄糖依(yi)賴性胰(yi)島素(su)釋放多肽(tai) 規格： 48T/96T

 GOD 人葡萄糖氧化(hua)酶 規格： 48T/96T

 GKRP 人葡萄糖激酶調節(jie)蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 GCK 人葡萄糖激酶 規格： 48T/96T

Y190 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50 GPI 人葡萄糖6磷(lin)酸異(yi)構(gou)酶 規格： 48T/96T

 SPA 人葡萄球菌(jun)蛋(dan)白(bai)A 規格： 48T/96T

 Tetanus Ab 人破(po)傷(shang)風抗(kang)體 規格： 48T/96T

 ODF 人破(po)骨細(xi)胞(bao)分(fen)化(hua)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 Prednisolone 人龍 規格： 48T/96T

 SMM 人平滑(hua)肌肌球蛋(dan)白(bai) 規格： 48T/96T

 Syk 人脾(pi)臟(zang)激酶 規格： 48T/96T