Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*50

 Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*50操(cao)作方(fang)法（以(yi)下(xia)操(cao)作均(jun)按無菌條件的標(biao)準進(jin)行(xing)）
1 取感(gan)受(shou)態(tai)細胞置於(yu)冰浴(yu)中(zhong)，如(ru)需(xu)分裝(zhuang)可將(jiang)剛(gang)融(rong)化細胞懸(xuan)液分(fen)裝(zhuang)到無菌預冷(leng)的離心(xin)管中(zhong)，置(zhi)於(yu)冰浴中(zhong)。
●  壹(yi)次轉(zhuan)化感(gan)受(shou)態(tai)細胞的建議(yi)用量(liang)為(wei)50-100 μl，可以(yi)根據(ju)實際情(qing)況分裝(zhuang)使(shi)用。應(ying)註意(yi)所用DNA 體(ti)積(ji)不要超過(guo)感(gan)受(shou)態(tai)細胞懸(xuan)液體(ti)積(ji)的十分(fen)之壹。
以(yi)下(xia)實驗(yan)以(yi)100 μl感(gan)受(shou)態(tai)細胞為例。
 Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*502 向(xiang)感(gan)受(shou)態(tai)細胞懸(xuan)液中(zhong)加(jia)入目的DNA（100 μl 的感(gan)受(shou)態(tai)細胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhi)粒DNA 所(suo)飽和(he)），輕輕旋轉離(li)心(xin)管以(yi)混勻(yun)內(nei)容物(wu)，在(zai)冰(bing)浴(yu)中(zhong)靜置30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將(jiang)離(li)心(xin)管置(zhi)於42℃水(shui)浴中(zhong)放(fang)置(zhi)60-90 秒(miao)，然後(hou)快速將(jiang)管轉(zhuan)移到冰浴(yu)中(zhong)，使(shi)細胞冷(leng)卻(que)2-3 分(fen)鐘(zhong)，該過(guo)程不要搖動離心(xin)管。
4 向(xiang)每(mei)個(ge)離(li)心(xin)管中(zhong)加(jia)入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養基(ji)（不含抗(kang)生素(su)）， 混勻(yun)後(hou)置於(yu)37℃搖(yao)床振(zhen)蕩(dang)培養1 小時（160-220 轉/分鐘(zhong)），目(mu)的是使(shi)質(zhi)粒上(shang)相關(guan)的抗(kang)性(xing)標(biao)記基(ji)因表達，使(shi)菌體(ti)復(fu)蘇。
 Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*505 將(jiang)離(li)心(xin)管內(nei)容物(wu)混勻(yun)，吸(xi)取100 μl 已轉化的感(gan)受(shou)態(tai)細胞加到含相應(ying)抗(kang)生素(su)的SOB 或LB 固體(ti)瓊(qiong)脂培(pei)養基(ji)上，用無菌的彎(wan)頭玻(bo)棒輕(qing)輕的將(jiang)細胞均勻(yun)塗開(kai)。將(jiang)平板置於室(shi)溫(wen)直(zhi)至(zhi)液體(ti)被吸收，倒置(zhi)平板，37℃培養12-16 小時。
●  塗布(bu)用量(liang)可根據(ju)具(ju)體(ti)實驗(yan)來調(tiao)整(zheng)。如(ru)轉化的DNA 總量(liang)較(jiao)多(duo)，可取更少量(liang)轉(zhuan)化產(chan)物(wu)塗(tu)布(bu)平板；反之，如(ru)轉化的DNA 總量(liang)較(jiao)少(shao)，可取200-300 μl 轉化產(chan)物(wu)塗(tu)布(bu)平板。如果預計(ji)的克隆較少(shao)，可通過(guo)離(li)心(xin)（4,000 rpm, 2分鐘(zhong)）後(hou)吸除(chu)部(bu)分(fen)培養(yang)液，懸(xuan)浮菌體(ti)後(hou)將(jiang)其(qi)塗(tu)布(bu)於壹(yi)個平板中(zhong)。（塗(tu)布(bu)剩(sheng)余(yu)的菌液可置於(yu)4℃保(bao)存，如果(guo)次日(ri)的轉化菌(jun)落數(shu)過(guo)少(shao)可以(yi)將(jiang)剩(sheng)下(xia)的菌液再塗(tu)布(bu)新的培養板）
 註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1. 感(gan)受(shou)態(tai)細胞應(ying)保存在 -70℃，不可多次凍融(rong)和放(fang)置(zhi)時間過(guo)長(chang)，以(yi)避免(mian)降低(di)感(gan)受(shou)態(tai)細胞的轉化效率。
2. 進(jin)行(xing)轉(zhuan)化操(cao)作時，應(ying)根據(ju)相應(ying)溫(wen)度(du)及無菌條件的要求進(jin)行(xing)。
3 為(wei)防(fang)止轉(zhuan)化實驗(yan)不成功(gong)，可以(yi)保(bao)留部(bu)分(fen)連接反應(ying)液，以(yi)重(zhong)新轉化，將(jiang)損(sun)失(shi)降(jiang)到低。
以(yi)下(xia)是的相關產(chan)品(pin)：

 RANKL 人核因子κB受體(ti)活化因子配(pei)基(ji) 規格： 48T/96T

 RNASE 人核糖核酸酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 Ag-NORs 人核仁形(xing)成區嗜(shi)銀蛋白(bai) 規格(ge)： 48T/96T

 NMP-22 人核基(ji)質(zhi)蛋白(bai)22 規格(ge)： 48T/96T

 LPO 人過(guo)氧(yang)化脂(zhi)質(zhi)/乳過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

  PPAR-γ 人過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)體(ti)增殖(zhi)因子活化受(shou)體(ti)γ 規(gui)格： 48T/96T

 PPARs 人過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)體(ti)增殖(zhi)因子活化受(shou)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T

 PPAR-α 人過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)體(ti)增殖(zhi)物(wu)激(ji)活受(shou)體(ti)α 規(gui)格： 48T/96T

 C4a 人過(guo)敏(min)毒(du)素(su)/補(bu)體(ti)片斷4 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 FDA 人果(guo)糖1,6二(er)磷(lin)酸醛(quan)縮酶 規格： 48T/96T

 P-CK 人廣(guang)譜細胞角蛋(dan)白 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Casp-9 人胱天蛋白酶9 規格(ge)： 48T/96T

 Casp-3 人胱天蛋白酶3 規格(ge)： 48T/96T

 Casp-12 人胱天蛋白酶12 規格(ge)： 48T/96T

 oligomeric 人寡(gua)聚蛋(dan)白 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 ON 人骨粘連(lian)蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BMP-6 人骨形成(cheng)蛋白(bai)6 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BMPs 人骨形成(cheng)蛋白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BSP 人骨涎蛋(dan)白 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CTX-2 人骨退化特(te)異標(biao)誌(zhi)物(wu) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 ALP-B 人骨特異性堿性磷(lin)酸酶(mei)B 規格(ge)： 48T/96T

 MPIF-1/CCL23 人骨髓(sui)抑制(zhi)因子1 規格(ge)： 48T/96T

 OPN 人骨橋(qiao)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Cr 人骨膠原(yuan)交(jiao)聯 規格(ge)： 48T/96T

 BALP 人骨堿性磷(lin)酸酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 OT/BGP 人骨鈣素(su)/骨蛋白(bai) 規格(ge)： 48T/96T

 BMPR-Ⅱ 人骨成型(xing)蛋(dan)白受體(ti)Ⅱ 規(gui)格： 48T/96T

 BMPR-1A 人骨成型(xing)蛋(dan)白受體(ti)1A 規(gui)格： 48T/96T

 BMP-7 人骨成型(xing)蛋(dan)白7 規格(ge)： 48T/96T

 BMP-4 人骨成型(xing)蛋(dan)白4 規格(ge)： 48T/96T

 BMP-2 人骨成型(xing)蛋(dan)白2 規格(ge)： 48T/96T

 OPGL 人骨保護(hu)素(su)配(pei)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T

 OPG 人骨保護(hu)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 GSTpi 人硫(liu)轉(zhuan)移酶pi基(ji)因 規格： 48T/96T

  Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*50GSH-Px 人過(guo)氧(yang)化酶(mei) 規格： 48T/96T

 GSH 人 規(gui)格： 48T/96T

 GAD-Ab 人脫(tuo)羧酶(mei)自身抗(kang)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T