Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*10

Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*10 操(cao)作(zuo)方(fang)法(fa)（以下操(cao)作(zuo)均(jun)按(an)無(wu)菌(jun)條(tiao)件的(de)標準(zhun)進(jin)行(xing)）
1 取感(gan)受(shou)態(tai)細胞置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中，如需(xu)分裝可將(jiang)剛(gang)融化細胞懸(xuan)液(ye)分裝到無(wu)菌(jun)預冷的(de)離心管(guan)中(zhong)，置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中。
●  壹次轉(zhuan)化感(gan)受(shou)態(tai)細胞的(de)建(jian)議(yi)用(yong)量為(wei)50-100 μl，可以根據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)分裝使用(yong)。應註(zhu)意(yi)所(suo)用(yong)DNA 體(ti)積不要(yao)超過(guo)感(gan)受(shou)態(tai)細胞懸(xuan)液(ye)體(ti)積的(de)十分之壹(yi)。
以下實驗(yan)以100 μl感(gan)受(shou)態(tai)細胞為(wei)例(li)。
2 向(xiang)感(gan)受(shou)態(tai)細胞懸(xuan)液(ye)中(zhong)加入目(mu)的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞能(neng)夠被1 ng 超(chao)螺旋(xuan)質(zhi)粒DNA 所(suo)飽(bao)和(he)），輕輕旋轉(zhuan)離心管(guan)以混勻(yun)內(nei)容物，在(zai)冰(bing)浴(yu)中靜置(zhi)30 分鐘。
Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*103 將(jiang)離心管(guan)置(zhi)於(yu)42℃水浴(yu)中放置(zhi)60-90 秒(miao)，然(ran)後(hou)快速(su)將(jiang)管(guan)轉(zhuan)移(yi)到(dao)冰(bing)浴(yu)中，使細胞冷(leng)卻(que)2-3 分鐘，該過程(cheng)不(bu)要(yao)搖動離心管(guan)。
4 向(xiang)每個離心管(guan)中(zhong)加入900 μl 無(wu)菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培(pei)養(yang)基(ji)（不含抗(kang)生(sheng)素(su)）， 混勻(yun)後(hou)置於(yu)37℃搖床(chuang)振(zhen)蕩培養1 小時(shi)（160-220 轉(zhuan)/分鐘），目(mu)的(de)是(shi)使質(zhi)粒上相(xiang)關(guan)的(de)抗性(xing)標(biao)記基(ji)因(yin)表達(da)，使(shi)菌(jun)體(ti)復蘇。
5 將離心管(guan)內(nei)容物混勻(yun)，吸(xi)取100 μl 已轉(zhuan)化的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞加到含(han)相(xiang)應抗生(sheng)素(su)的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體(ti)瓊(qiong)脂培養(yang)基(ji)上，用(yong)無(wu)菌(jun)的(de)彎(wan)頭玻(bo)棒輕輕的(de)將細胞均(jun)勻(yun)塗(tu)開(kai)。將(jiang)平板置(zhi)於(yu)室溫直至(zhi)液(ye)體(ti)被(bei)吸(xi)收，倒(dao)置(zhi)平板，37℃培(pei)養12-16 小(xiao)時(shi)。
●  塗(tu)布(bu)用(yong)量可根(gen)據(ju)具(ju)體(ti)實驗(yan)來(lai)調整。如轉(zhuan)化的(de)DNA 總量較(jiao)多，可取更(geng)少(shao)量轉(zhuan)化產物塗布(bu)平板；反(fan)之，如轉(zhuan)化的(de)DNA 總量較(jiao)少(shao)，可取200-300 μl 轉(zhuan)化產物塗布(bu)平板。如果(guo)預計的(de)克(ke)隆較(jiao)少(shao)，可通過(guo)離心（4,000 rpm, 2分鐘）後(hou)吸(xi)除(chu)部分培養(yang)液(ye)，懸(xuan)浮(fu)菌(jun)體(ti)後(hou)將其塗布(bu)於(yu)壹個平板中(zhong)。（塗布(bu)剩(sheng)余(yu)的(de)菌(jun)液(ye)可置(zhi)於(yu)4℃保存(cun)，如果(guo)次日(ri)的(de)轉(zhuan)化菌(jun)落(luo)數過少(shao)可以將剩(sheng)下(xia)的(de)菌(jun)液(ye)再塗布(bu)新的(de)培養(yang)板(ban)）
 註(zhu)意(yi)事(shi)項
Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*101. 感(gan)受(shou)態(tai)細胞應保存(cun)在(zai) -70℃，不可多(duo)次凍融和(he)放置(zhi)時(shi)間過長(chang)，以避免(mian)降低(di)感(gan)受(shou)態(tai)細胞的(de)轉(zhuan)化效率。
2. 進行(xing)轉(zhuan)化操(cao)作(zuo)時(shi)，應根據(ju)相(xiang)應溫度及(ji)無(wu)菌(jun)條(tiao)件的(de)要求(qiu)進(jin)行(xing)。
3 為(wei)防止轉(zhuan)化實驗(yan)不(bu)成(cheng)功(gong)，可以保留(liu)部(bu)分連接(jie)反應液(ye)，以重(zhong)新(xin)轉(zhuan)化，將損(sun)失(shi)降到(dao)低(di)。
以下是(shi)的(de)相(xiang)關(guan)產品：

 GAD 人脫(tuo)羧酶 規格(ge)： 48T/96T

 GDH 人脫(tuo)氫酶 規格(ge)： 48T/96T

 OFQ/N 人孤腓肽(tai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Lebtospira 人鉤(gou)端(duan)螺(luo)旋(xuan)體IgM 規格(ge)： 48T/96T

 Lebtospira 人鉤(gou)端(duan)螺(luo)旋(xuan)體IgG 規格(ge)： 48T/96T

 HGV-IgM 人庚(geng)型(xing)肝炎(yan)病毒IgM 規格(ge)： 48T/96T

 HGV-IgG 人庚(geng)型(xing)肝炎(yan)病毒IgG 規格(ge)： 48T/96T

 T 人睪(gao)酮 規格(ge)： 48T/96T

 HVA 人高(gao)香(xiang)草(cao)酸 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 MHB 人高(gao)鐵血紅(hong)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 u-T4 人高(gao)敏(min)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 HDL-C 人高(gao)密度脂蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HDL 人高(gao)密度脂蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 GP-73 人高(gao)爾(er)基(ji)蛋(dan)白(bai)73 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HGF 人肝(gan)細胞生(sheng)長因(yin)子 規格(ge)： 48T/96T

 HB-EGF 人肝(gan)素(su)結合(he)性(xing)表皮生(sheng)長(chang)因子(zi) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HCⅡ 人肝(gan)素(su)輔因子(zi)Ⅱ 規格(ge)： 48T/96T

 MR 人甘露(lu)糖(tang)受(shou)體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 MBLR 人甘露(lu)糖(tang)凝集素(su)受(shou)體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 MBP/MBL 人甘露(lu)糖(tang)結合(he)蛋(dan)白(bai)/甘露(lu)糖(tang)結合(he)凝(ning)集素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 Mannose 人甘露(lu)糖(tang) 規格(ge)： 48T/96T

 CG 人甘膽(dan)酸(suan) 規格(ge)： 48T/96T

 SCFR 人幹細胞因(yin)子受(shou)體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 SCF/MGF 人幹細胞因(yin)子/肥(fei)大細胞生(sheng)長因(yin)子 規格(ge)： 48T/96T

 IP-10/CXCL10 人幹擾(rao)素(su)誘導(dao)蛋(dan)白(bai)10 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 IRF 人幹擾(rao)素(su)調節(jie)因子 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CNR-1 人鈣(gai)粘蛋(dan)白(bai)相(xiang)關(guan)的(de)神經(jing)受(shou)體1 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CRT 人鈣(gai)網蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 calnexin 人鈣(gai)聯蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 VGCC 人鈣(gai)離子通道(dao)抗體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 CR 人鈣(gai)結合(he)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CAM 人鈣(gai)調素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 CaN 人鈣(gai)調磷酸(suan)酶 規格(ge)： 48T/96T

 CaN 人鈣(gai)調磷酸(suan)酶 規格(ge)： 48T/96T

 CALD 人鈣(gai)調結合(he)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CALD 人鈣(gai)調結合(he)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 histatin 5 人富(fu)組(zu)蛋(dan)白(bai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PNP 人副(fu)腫瘤性天(tian)皰(pao)瘡抗體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 RPA-70 人復(fu)制(zhi)蛋(dan)白(bai)A 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CPSA 人復(fu)合(he)前(qian)列腺(xian)特異(yi)性(xing)抗原(yuan) 規格(ge)： 48T/96T

 Y2HGold 感(gan)受(shou)態(tai)細胞100ul*10A 人(ren)封(feng)閉(bi)抗體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 SLPI 人分泌性(xing)白細胞蛋(dan)白(bai)酶抑制(zhi)因子(zi) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 SIgA 人分泌型(xing)免(mian)疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)A 規(gui)格(ge)： 48T/96T