ATCC15834 感受態(tai)細(xi)胞100ul*100

ATCC15834 感受態(tai)細(xi)胞100ul*100以下是(shi)的(de)訂購信(xin)息(xi)儲(chu)存(cun)條件：-70℃凍存(cun)
操作方(fang)法:
1. 取(qu)-80℃保(bao)存(cun)的(de)農(nong)桿(gan)菌感受態(tai)於(yu)室溫(wen)或手(shou)心(xin)片刻待(dai)其(qi)部分融(rong)化，處(chu)於(yu)冰(bing)水混(hun)合(he)狀態(tai)時(shi)插入冰(bing)中。
2.每100 μl感受態(tai)加入0.01-1 μg質(zhi)粒DNA（轉化效(xiao)率(lv)較高，*次(ci)使用(yong)前(qian)做(zuo)預實驗(yan)確(que)定(ding)所加(jia)質粒的(de)量(liang)），用手(shou)管底(di)混勻，依次(ci)於(yu)冰(bing)上靜(jing)置5分鐘(zhong)、液氮(dan)5分鐘(zhong)、37℃水浴(yu)5分鐘(zhong)、冰浴(yu)5分鐘(zhong)。
ATCC15834 感受態(tai)細(xi)胞100ul*1003. 加入700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，於(yu)28℃振(zhen)蕩培(pei)養(yang)2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離(li)心(xin)壹分鐘(zhong)收菌(jun)，留(liu)取(qu)100 μl左右上(shang)清(qing)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打重懸菌(jun)塊塗布於(yu)含(han)相(xiang)應抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平(ping)板(ban)上，倒(dao)置(zhi)放於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)2-3天
註(zhu)意(yi)事項(xiang)
1. 加入質(zhi)粒時(shi)體積不應大於(yu)感受態(tai)體積(ji)的(de)1/10；質(zhi)粒不純或存(cun)在(zai)乙(yi)醇(chun)等有機(ji)物(wu)汙染(ran)，轉化效(xiao)率(lv)急劇下降(jiang)；質(zhi)粒增大壹(yi)倍(bei)，轉化效(xiao)率(lv)下降(jiang)壹(yi)個數量(liang)級。
ATCC15834 感受態(tai)細(xi)胞100ul*1002. 混入質(zhi)粒時(shi)應輕(qing)柔操作。轉化高濃(nong)度(du)的(de)質(zhi)粒可相(xiang)應減少(shao)終用於(yu)塗板的(de)菌(jun)量(liang)。
3. 平(ping)板(ban)上陽(yang)性克隆密度(du)過(guo)大時(shi)，由於(yu)營(ying)養不(bu)足，陽(yang)性克隆生(sheng)長變(bian)慢，菌落(luo)變(bian)小，為(wei)了(le)獲得(de)大的(de)菌(jun)落(luo)，應減少(shao)質粒用量(liang)。
4. *濃(nong)度(du)不應高於(yu)25 μg/ml，過(guo)高的(de)*濃(nong)度(du)不利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)生(sheng)長，會(hui)降低其(qi)生(sheng)長速度(du)和轉化效(xiao)率(lv)。本公(gong)司感受態(tai)計算轉化效(xiao)率(lv)時(shi)所用平(ping)板(ban)只含有50 μg/ml kan，若所(suo)用(yong)平(ping)板(ban)含有20 μg/ml rif則(ze)轉化效(xiao)率(lv)降(jiang)低(di)到(dao)1/2。
5. 培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加(jia)入*的(de)目(mu)的(de)是(shi)防止(zhi)雜(za)菌生(sheng)長、篩(shai)選(xuan)農桿(gan)菌(jun)；根據所用菌(jun)株抗(kang)性加入Ti質(zhi)粒篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)可(ke)防止(zhi)Ti質(zhi)粒丟(diu)失(shi)，但(dan)Ti質(zhi)粒篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿菌(jun)的(de)轉基(ji)因(yin)操作，所(suo)以壹般培(pei)養(yang)農桿(gan)菌(jun)時(shi)不考慮這些(xie)抗(kang)生(sheng)素(su)，Ti質(zhi)粒丟(diu)失(shi)的(de)概(gai)率(lv)極低(可(ke)以忽略)。

1

 MCP-4/CCL13 人(ren)單(dan)核(he)細(xi)胞趨化蛋白(bai)4 規格： 48T/96T

 MCP-3/CCL7 人(ren)單(dan)核細(xi)胞趨化蛋白(bai)3 規格： 48T/96T

 MCP-2/CCL8 人(ren)單(dan)核細(xi)胞趨化蛋白(bai)2 規格： 48T/96T

 HSV-Ag2 人(ren)單(dan)純皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒抗(kang)原2 規格： 48T/96T

 HSV-Ag1 人(ren)單(dan)純皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒抗(kang)原-1 規格： 48T/96T

 HSV-Ag1 人(ren)單(dan)純皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒抗(kang)原-1 規格： 48T/96T

 HSVⅡ-Ab 人(ren)單(dan)純皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒Ⅱ型(xing)抗(kang)體 規(gui)格： 48T/96T

 MAO 人單胺氧化酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 Big ET 人(ren)大內(nei)皮素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Big ET 人(ren)大內(nei)皮素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 colicin 人(ren)大腸(chang)菌(jun)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CCSA-4 人(ren)大腸(chang)癌(ai)專壹(yi)抗(kang)原4 規格： 48T/96T

 CCSA-3 人(ren)大腸(chang)癌(ai)專壹(yi)抗(kang)原3 規格： 48T/96T

 CCSA-2 人(ren)大腸(chang)癌(ai)專壹(yi)抗(kang)原2 規格： 48T/96T

 PRL 人(ren)催乳(ru)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 MF/MPF 人(ren)促(cu)有絲(si)分裂(lie)因(yin)子(zi) 規格(ge)： 48T/96T

 GnRH 人(ren)*釋(shi)放激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 DSIP 人(ren)促(cu)睡眠(mian)肽(tai) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 GHRH 人促生(sheng)長激素(su)釋(shi)放激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 ACTH 人(ren)促(cu)腎(shen)上(shang)腺(xian)皮質(zhi)激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 CRH 人(ren)促(cu)腎(shen)上(shang)皮質(zhi)激素(su)釋(shi)放激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 FSH 人(ren)促(cu)卵(luan)泡(pao)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 TRH 人(ren)促(cu)甲狀腺(xian)素(su)釋(shi)放激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 TSH 人(ren)促(cu)甲狀腺(xian)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 TSHR 人(ren)促(cu)甲狀腺(xian)激素(su)受體抗(kang)體 規(gui)格： 48T/96T

 LH * 規格： 48T/96T

人促分裂(lie)素(su)原活化蛋白(bai)激酶(mei)激活的(de)蛋白(bai)激酶(mei)3 人促(cu)分裂(lie)素(su)原活化蛋白(bai)激酶(mei)激活的(de)蛋白(bai)激酶(mei)3 規格(ge)： 48T/96T

 E3 人(ren)雌三(san)醇(chun) 規格： 48T/96T

 E 人(ren)雌激素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 ER 人(ren)雌二醇受體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 E2 人雌二醇 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PACAP 人垂體腺(xian)苷(gan)酸(suan)環化酶(mei)激活肽 規格(ge)： 48T/96T

 VMA 人垂(chui)草扁(bian)桃酸(suan) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PF/PFP 人穿(chuan)孔素(su)/成(cheng)孔蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 PF/PFP 人(ren)穿(chuan)孔素(su)/成(cheng)孔蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 VLA 人(ren)遲(chi)現(xian)抗(kang)原 規格： 48T/96T

ATCC15834 感受態(tai)細(xi)胞100ul*100 VLA 人遲(chi)現(xian)抗(kang)原 規格： 48T/96T

 MPF 人(ren)成(cheng)熟(shu)促進因(yin)子(zi) 規格(ge)： 48T/96T

 OGP 人(ren)成(cheng)骨(gu)生(sheng)長肽(tai) 規格： 48T/96T

 SOD 人超氧化物(wu)歧(qi)化酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 hs-CRP 人(ren)超(chao)敏C反應蛋白(bai) 規格： 48T/96T

4 向(xiang)每(mei)個離(li)心(xin)管中(zhong)加(jia)入900 μl 無(wu)菌的(de)SOC 或LB 培(pei)養(yang)基(ji)（不(bu)含(han)抗(kang)生(sheng)素(su)）， 混(hun)勻後(hou)置(zhi)於(yu)37℃搖床(chuang)振蕩培(pei)養(yang)1 小時(shi)（160-220 轉/分鐘(zhong)），目(mu)的(de)是(shi)使質(zhi)粒上相(xiang)關(guan)的(de)抗(kang)性標記(ji)基(ji)因(yin)表(biao)達，使菌(jun)體(ti)復蘇。
 C58C1 電感受態(tai)細(xi)胞50ul*105 將離(li)心(xin)管內(nei)容(rong)物(wu)混勻，吸(xi)取(qu)100 μl 已(yi)轉化的(de)感受態(tai)細(xi)胞加到(dao)含(han)相(xiang)應抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)SOB 或LB 固(gu)體(ti)瓊脂(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)，用(yong)無(wu)菌(jun)的(de)彎頭玻(bo)棒輕輕(qing)的(de)將(jiang)細(xi)胞均勻塗開。將平(ping)板(ban)置於(yu)室溫(wen)直至(zhi)液(ye)體(ti)被吸收(shou)，倒(dao)置(zhi)平(ping)板(ban)，37℃培(pei)養(yang)12-16 小時(shi)。
●  塗布用(yong)量(liang)可根(gen)據具(ju)體(ti)實(shi)驗(yan)來(lai)調(tiao)整(zheng)。如轉化的(de)DNA 總量(liang)較多，可(ke)取(qu)更(geng)少(shao)量(liang)轉化產物(wu)塗布平(ping)板(ban)；反之(zhi)，如轉化的(de)DNA 總量(liang)較少(shao)，可取(qu)200-300 μl 轉化產物(wu)塗布平(ping)板(ban)。如果預計的(de)克(ke)隆較少(shao)，可通過(guo)離(li)心(xin)（4,000 rpm, 2分鐘(zhong)）後吸(xi)除部(bu)分培(pei)養(yang)液，懸浮菌體(ti)後將其(qi)塗布於(yu)壹(yi)個平(ping)板(ban)中。（塗布剩余(yu)的(de)菌(jun)液(ye)可置於(yu)4℃保(bao)存(cun)，如果次(ci)日(ri)的(de)轉化菌落(luo)數過(guo)少(shao)可以將剩下的(de)菌(jun)液(ye)再塗布新(xin)的(de)培(pei)養(yang)板）
 註(zhu)意(yi)事項(xiang)
1. 感受態(tai)細(xi)胞應保(bao)存(cun)在(zai) -70℃，不(bu)可多次(ci)凍融(rong)和放置(zhi)時(shi)間過(guo)長，以避(bi)免(mian)降低感受態(tai)細(xi)胞的(de)轉化效(xiao)率(lv)。
2. 進行(xing)轉化操作時(shi)，應根(gen)據相(xiang)應溫(wen)度(du)及無菌條件的(de)要求進行(xing)。
3 為(wei)防止(zhi)轉化實驗(yan)不(bu)成(cheng)功(gong)，可(ke)以保(bao)留(liu)部(bu)分連接反(fan)應液(ye)，以重新轉化，將損(sun)失降(jiang)到(dao)低(di)。
以下是(shi)的(de)相(xiang)關(guan)產品：

ELISA Kit，48T/96T 規格(ge)： 48T/96T

 β-Lg 人(ren)β乳(ru)球蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 β-OHB 人(ren)β羥(qiang)丁酸(suan) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 βGD 人β葡(pu)萄(tao)糖(tang)醛酸(suan)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 β-glucosidase 人(ren)β葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 β-naphthol 人(ren)β萘(nai)酚 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BLI 人(ren)β內酰(xian)胺酶(mei)抑制(zhi)劑 規格(ge)： 48T/96T

 β-lactamase 人β內(nei)酰(xian)胺酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 β-EPR 人(ren)β內(nei)啡(fei)肽(tai)受體 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 β-EP 人β內啡(fei)肽(tai) 規格： 48T/96T

 β-Cat 人(ren)β連環蛋白(bai)/聯蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 β Manase 人(ren)β甘露(lu)糖(tang)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 IFN-β/IFNB 人(ren)β幹(gan)擾(rao)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Aβ1-42 人(ren)β澱粉(fen)樣(yang)蛋白(bai)1-42 規格： 48T/96T

 Aβ1-40 人(ren)β澱粉(fen)樣(yang)蛋白(bai)1-40 規格： 48T/96T

 β-LPH 人(ren)β-促(cu)脂(zhi)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 βGAL 人(ren)β半(ban)乳(ru)糖(tang)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 β-hexosaminidase A 人(ren)β氨(an)基(ji)己(ji)糖(tang)苷(gan)酶(mei)A 規格(ge)： 48T/96T

 integrin β2/CD11+CD18 人(ren)β2整(zheng)合(he)素(su) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 BMG/β2-MG 人(ren)β2微(wei)球蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 β2-GP1 Ab IgM 人(ren)β2糖(tang)蛋白(bai)1抗(kang)體IgM 規(gui)格： 48T/96T

 β2-GP1 Ab IgG 人β2糖(tang)蛋白(bai)1抗(kang)體IgG 規(gui)格： 48T/96T

 β2-GP1 IgA/G/M 人β2糖(tang)蛋白(bai)1抗(kang)體IgA/G/M 規(gui)格： 48T/96T

 β2-GP1 Ab IgA 人β2糖(tang)蛋白(bai)1抗(kang)體IgA 規(gui)格： 48T/96T

 β2-GP 人β2糖(tang)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 α-enolase 人(ren)α烯醇化酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 α-SYN 人(ren)α突觸核(he)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 α-La 人(ren)α乳(ru)清(qing)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 αHBDH 人(ren)α羥(qiang)基(ji)丁酸(suan)脫氫(qing)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 α-glucosidase 人(ren)α葡(pu)萄(tao)糖(tang)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 α-SMA 人(ren)α平(ping)滑肌肌(ji)動(dong)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 α-EP 人(ren)α-內(nei)*肽 規(gui)格： 48T/96T

 α Actin 人α肌動蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 α-SCA 人(ren)α橫(heng)紋(wen)肌肌(ji)動蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 α-GST 人(ren)α*S轉移酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 α Manase 人(ren)α甘露(lu)糖(tang)苷(gan)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 C58C1 電(dian)感受態(tai)細(xi)胞50ul*10

 ACTN-3 人α-輔(fu)肌(ji)動蛋白(bai)3 規格： 48T/96T

 Gal 人(ren)α半(ban)乳(ru)糖(tang)基(ji)抗(kang)體 規(gui)格： 48T/96T