ATCC15834 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50

ATCC15834 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50 操(cao)作(zuo)方法（以下操作(zuo)均按(an)無菌(jun)條件的標準進行(xing)）
1 取感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)置(zhi)於冰浴(yu)中，如需(xu)分(fen)裝(zhuang)可將剛(gang)融化細胞懸(xuan)液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao)無菌(jun)預冷(leng)的離心管(guan)中，置(zhi)於冰浴(yu)中。
●  壹(yi)次轉化(hua)感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)的建(jian)議(yi)用(yong)量(liang)為50-100 μl，可以根(gen)據實(shi)際(ji)情(qing)況分(fen)裝(zhuang)使(shi)用。應註意所(suo)用(yong)DNA 體(ti)積(ji)不要超(chao)過感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)體(ti)積(ji)的十(shi)分(fen)之(zhi)壹(yi)。
以下(xia)實(shi)驗以100 μl感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)為(wei)例。
ATCC15834 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*502 向(xiang)感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)中加(jia)入(ru)目的DNA（100 μl 的感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)能(neng)夠被(bei)1 ng 超螺(luo)旋質(zhi)粒DNA 所飽(bao)和），輕(qing)輕(qing)旋轉離心管(guan)以(yi)混勻內(nei)容(rong)物，在(zai)冰(bing)浴(yu)中靜(jing)置(zhi)30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將離心管(guan)置(zhi)於42℃水浴(yu)中放(fang)置(zhi)60-90 秒，然後(hou)快(kuai)速將管轉移到(dao)冰浴(yu)中，使(shi)細胞(bao)冷(leng)卻(que)2-3 分(fen)鐘(zhong)，該(gai)過程不要搖(yao)動(dong)離心管(guan)。
4 向(xiang)每(mei)個(ge)離心管(guan)中加(jia)入(ru)900 μl 無菌(jun)的SOC 或LB 培(pei)養(yang)基（不含抗(kang)生素(su)）， 混(hun)勻後(hou)置(zhi)於37℃搖床(chuang)振蕩(dang)培(pei)養(yang)1 小時（160-220 轉/分(fen)鐘(zhong)），目的是(shi)使(shi)質(zhi)粒上(shang)相關(guan)的抗(kang)性(xing)標記(ji)基因(yin)表(biao)達(da)，使(shi)菌體(ti)復蘇。
ATCC15834 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*505 將離心管(guan)內(nei)容(rong)物混(hun)勻，吸(xi)取100 μl 已(yi)轉(zhuan)化(hua)的感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)加(jia)到(dao)含相(xiang)應抗(kang)生素(su)的SOB 或LB 固(gu)體(ti)瓊脂(zhi)培養基上(shang)，用無菌(jun)的彎(wan)頭(tou)玻棒輕輕的將細胞均勻塗開。將平(ping)板(ban)置(zhi)於室溫直(zhi)至液(ye)體(ti)被(bei)吸收(shou)，倒置(zhi)平(ping)板(ban)，37℃培(pei)養(yang)12-16 小時。
●  塗布用(yong)量(liang)可根據(ju)具體(ti)實(shi)驗來(lai)調(tiao)整(zheng)。如轉(zhuan)化的DNA 總(zong)量(liang)較多(duo)，可取更少(shao)量(liang)轉化產(chan)物塗布平(ping)板(ban)；反(fan)之(zhi)，如轉(zhuan)化的DNA 總(zong)量(liang)較少(shao)，可取200-300 μl 轉化(hua)產(chan)物塗布平(ping)板(ban)。如果預(yu)計(ji)的克(ke)隆(long)較少(shao)，可通(tong)過離心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘(zhong)）後吸(xi)除(chu)部(bu)分(fen)培(pei)養液(ye)，懸(xuan)浮(fu)菌體(ti)後將其(qi)塗布於壹(yi)個(ge)平(ping)板(ban)中。（塗布剩(sheng)余(yu)的菌(jun)液(ye)可置(zhi)於4℃保(bao)存(cun)，如果次日的轉(zhuan)化(hua)菌落(luo)數過少可以將剩(sheng)下的菌(jun)液(ye)再塗布新的培(pei)養(yang)板(ban)）
 註意事項
1. 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)應保(bao)存(cun)在 -70℃，不可多次凍融和放(fang)置(zhi)時間(jian)過長(chang)，以(yi)避免降低感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)的轉(zhuan)化(hua)效率(lv)。
2. 進行(xing)轉化操作(zuo)時，應根據相(xiang)應溫度及(ji)無菌(jun)條件的要求(qiu)進行(xing)。
3 為防(fang)止轉(zhuan)化(hua)實(shi)驗不成功(gong)，可以保(bao)留(liu)部分(fen)連接反(fan)應液，以重(zhong)新轉(zhuan)化，將損失降到(dao)低。
以(yi)下(xia)是(shi)的相(xiang)關(guan)產品：

 Sag 人超(chao)抗(kang)原(yuan) 規格： 48T/96T

 iFABP 人腸(chang)脂(zhi)肪酸結合(he)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 Enterovirus 人腸(chang)病毒(du) 規格： 48T/96T

 LATS 人甲(jia)狀腺(xian)刺(ci)激素(su) 規格： 48T/96T

 OPAs 人不透(tou)光相關蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 LTB 人不耐熱腸(chang)毒(du)素(su)B亞(ya)單(dan)位(wei) 規格： 48T/96T

 LTB 人不耐熱腸(chang)毒(du)素(su)B亞(ya)單(dan)位(wei) 規格： 48T/96T

 ADMA 人不對(dui)稱(cheng)二甲(jia)基 規格： 48T/96T

 ADMA 人不對(dui)稱(cheng)二甲(jia)基 規格： 48T/96T

 CFH 人補體(ti)因(yin)子(zi)H 規格： 48T/96T

 C5b 人補體(ti)片(pian)斷5b 規格： 48T/96T

 C5b 人補體(ti)片(pian)斷5b 規格： 48T/96T

 C5a 人補體(ti)片(pian)斷5a 規格： 48T/96T

 C4b 人補體(ti)片(pian)斷4b 規格： 48T/96T

 C4b 人補體(ti)片(pian)斷4b 規格： 48T/96T

 C3b 人補體(ti)片(pian)斷3b 規格： 48T/96T

 C3b 人補體(ti)片(pian)斷3b 規格： 48T/96T

 C3a 人補體(ti)片(pian)斷3a 規格： 48T/96T

 C3bR 人補體(ti)片(pian)段(duan)3b受體(ti) 規格： 48T/96T

 CCP 人補體(ti)調節(jie)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 C4 人補體(ti)蛋白(bai)4 規格： 48T/96T

 C3 人補體(ti)蛋白(bai)3 規格： 48T/96T

 C7 人補體(ti)7 規格： 48T/96T

 C3SP 人補體(ti)3裂解(jie)產物 規格： 48T/96T

 C1INH 人補體(ti)1抑制物抗(kang)體(ti) 規格： 48T/96T

 VN/CD51+CD61 人玻(bo)連蛋白(bai)/體(ti)外(wai)粘(zhan)連蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 VIM 人波(bo)形(xing)蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 HCV-IgM 人丙(bing)型肝(gan)炎IgM 規格： 48T/96T

 HCV-IgG 人丙(bing)型肝(gan)炎IgG 規格： 48T/96T

 M2-PK 人丙(bing)酮酸激酶(mei)M2型(xing)同(tong)工(gong)酶(mei) 規格： 48T/96T

 PK 人丙(bing)酮酸激酶(mei) 規格： 48T/96T

 MDA 人丙(bing)二醛(quan) 規格： 48T/96T

 ALT/GPT 人轉(zhuan)氨(an)酶(mei)/谷(gu)丙(bing)轉氨(an)酶(mei) 規格： 48T/96T

 CAPF 人表(biao)皮細(xi)胞(bao)活化(hua)肽(tai)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 EGF 人表(biao)皮生長(chang)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

ATCC15834 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*50 EK 人表(biao)皮角蛋白(bai) 規格： 48T/96T

 mIgM 人表(biao)面膜(mo)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)M 規格： 48T/96T

 mIgD 人表(biao)面膜(mo)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)D 規格： 48T/96T

 mIgA 人表(biao)面膜(mo)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)A 規格： 48T/96T

 SP-D 人表(biao)面活性(xing)蛋白(bai)D 規格： 48T/96T

 SP-A 人表(biao)面活性(xing)蛋白(bai)A 規格： 48T/96T