Ar 1193 電感受態細胞50ul*50

Ar 1193 電(dian)感受態細胞50ul*50 操作(zuo)方(fang)法(fa)（以(yi)下操作(zuo)均按(an)無菌條(tiao)件(jian)的標準進行）
1 取感受態細胞置於冰浴中(zhong)，如(ru)需(xu)分裝(zhuang)可(ke)將(jiang)剛融化細胞懸(xuan)液(ye)分裝(zhuang)到(dao)無菌預(yu)冷(leng)的(de)離心(xin)管中(zhong)，置於冰浴中(zhong)。
●  壹次(ci)轉化感受態細胞的建(jian)議(yi)用(yong)量(liang)為(wei)50-100 μl，可(ke)以(yi)根據實際(ji)情況(kuang)分(fen)裝(zhuang)使(shi)用(yong)。應(ying)註(zhu)意所用(yong)DNA 體(ti)積(ji)不(bu)要超過感受態細胞懸(xuan)液(ye)體積(ji)的(de)十分之壹。
以(yi)下實驗(yan)以(yi)100 μl感受態細胞為例(li)。
Ar 1193 電(dian)感受態細胞50ul*502 向感受態細胞懸(xuan)液(ye)中加(jia)入(ru)目的(de)DNA（100 μl 的感受態細胞能(neng)夠被(bei)1 ng 超(chao)螺旋(xuan)質(zhi)粒(li)DNA 所飽和(he)），輕輕旋轉離(li)心(xin)管以(yi)混勻(yun)內容物(wu)，在冰浴中(zhong)靜(jing)置(zhi)30 分鐘。
3 將離(li)心(xin)管置(zhi)於42℃水(shui)浴中(zhong)放(fang)置(zhi)60-90 秒，然後(hou)快(kuai)速(su)將管轉移(yi)到(dao)冰浴中(zhong)，使(shi)細胞冷(leng)卻(que)2-3 分鐘，該過程(cheng)不要搖動(dong)離心(xin)管。
4 向(xiang)每(mei)個離(li)心(xin)管中(zhong)加入(ru)900 μl 無菌的(de)SOC 或(huo)LB 培(pei)養基(ji)（不(bu)含抗生(sheng)素）， 混勻(yun)後(hou)置(zhi)於37℃搖床振蕩(dang)培(pei)養1 小(xiao)時（160-220 轉/分(fen)鐘），目的(de)是使(shi)質(zhi)粒(li)上相關(guan)的抗性標記基(ji)因(yin)表達(da)，使(shi)菌體復蘇(su)。
Ar 1193 電(dian)感受態細胞50ul*505 將離(li)心(xin)管內容物(wu)混(hun)勻(yun)，吸取100 μl 已(yi)轉化的感受態細胞加到(dao)含相應(ying)抗生(sheng)素的SOB 或(huo)LB 固體瓊脂(zhi)培(pei)養基(ji)上(shang)，用(yong)無菌的(de)彎(wan)頭玻(bo)棒(bang)輕輕的將(jiang)細胞均勻塗開(kai)。將平(ping)板置(zhi)於室溫直至液(ye)體被(bei)吸收(shou)，倒(dao)置(zhi)平(ping)板，37℃培(pei)養12-16 小(xiao)時。
●  塗(tu)布(bu)用(yong)量(liang)可(ke)根據具(ju)體實驗(yan)來調整(zheng)。如(ru)轉化的DNA 總(zong)量較多，可(ke)取更(geng)少(shao)量轉化產物(wu)塗(tu)布(bu)平(ping)板；反(fan)之(zhi)，如轉化的DNA 總(zong)量較少(shao)，可(ke)取200-300 μl 轉化產物(wu)塗(tu)布(bu)平(ping)板。如(ru)果(guo)預(yu)計(ji)的(de)克(ke)隆(long)較(jiao)少(shao)，可(ke)通過離(li)心(xin)（4,000 rpm, 2分鐘）後(hou)吸除(chu)部(bu)分培(pei)養液(ye)，懸(xuan)浮(fu)菌(jun)體後(hou)將(jiang)其塗(tu)布(bu)於壹個(ge)平(ping)板中(zhong)。（塗(tu)布(bu)剩余(yu)的菌(jun)液(ye)可(ke)置(zhi)於4℃保存(cun)，如(ru)果次(ci)日(ri)的轉化菌落數(shu)過少(shao)可(ke)以(yi)將剩(sheng)下的菌(jun)液(ye)再(zai)塗布(bu)新的培(pei)養板(ban)）
 註(zhu)意(yi)事項
1. 感受態細胞應保存(cun)在 -70℃，不可(ke)多次凍融和放置(zhi)時間(jian)過長(chang)，以(yi)避免降(jiang)低感受態細胞的轉化效率。
2. 進行轉化操作(zuo)時，應(ying)根據相應(ying)溫度及(ji)無菌條(tiao)件(jian)的要求(qiu)進(jin)行。
3 為防止(zhi)轉化實驗(yan)不成(cheng)功，可(ke)以(yi)保留部(bu)分連接反(fan)應(ying)液(ye)，以(yi)重(zhong)新轉化，將損(sun)失(shi)降到低。
以(yi)下是的(de)相(xiang)關(guan)產品：

 8-OHdG 人8羥基脫(tuo)氧鳥(niao)苷(gan) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 6-keto-PGF1a 人6酮(tong)前(qian)列腺(xian)素F1a 規格(ge)： 48T/96T

 6-K-PG 人6酮(tong)前(qian)列腺(xian)素 規格(ge)： 48T/96T

 6-OHDA 人6-羥多巴(ba)胺 規格(ge)： 48T/96T

 5-LO/LOX 人5脂(zhi)加(jia)氧酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 5-HT 人5羥色胺 規格(ge)： 48T/96T

 5-HIAA 人5羥基吲哚(duo)乙(yi)酸 規格： 48T/96T

 5-NT 人5核(he)苷(gan)酸酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 Col Ⅳ 人Ⅳ型(xing)膠(jiao)原 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 PⅢNP 人Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原肽 規(gui)格： 48T/96T

 PⅢNT 人Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原氨基(ji)端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 Col Ⅲ 人Ⅲ型(xing)膠(jiao)原 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HELIX-Ⅱ 人Ⅱ型(xing)膠(jiao)原螺旋(xuan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 Col Ⅱ 人Ⅱ型(xing)膠(jiao)原 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 28S rRNP 人28S抗核(he)糖(tang)體抗體 規(gui)格： 48T/96T

 26S PSM 人26S蛋白酶體(ti) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

  OH 人25羥基3 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 2,3-DPG 人2,3-二(er)磷酸甘油酸 規格： 48T/96T

 2,3-dinor-TXB2 人2,3Dinor血栓烷(wan)B2 規格(ge)： 48T/96T

 PⅠNP 人Ⅰ型(xing)原膠(jiao)原N端(duan)前肽 規(gui)格： 48T/96T

 PⅠCP 人Ⅰ型(xing)前(qian)膠(jiao)原羧(suo)基端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 CⅠCP 人Ⅰ型(xing)前(qian)膠(jiao)原C末端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 ⅠCTP 人Ⅰ型(xing)膠(jiao)原交(jiao)聯(lian)羧(suo)基末端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 NTX 人Ⅰ型(xing)膠(jiao)原N末端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 CTX-Ⅰ 人Ⅰ型(xing)膠(jiao)原C端(duan)肽 規(gui)格： 48T/96T

 Col Ⅰ 人Ⅰ型(xing)膠(jiao)原 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 17-KS 人17-酮(tong)類固醇(chun) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 17-OHP 人17羥孕酮 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 17-OHCS 人17羥皮(pi)質(zhi)類固醇(chun) 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 16-α OHE-1 人16α羥基雌(ci)酮(tong)1 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 15-LO/LOX 人15脂(zhi)加(jia)氧酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 12-HETE 人12羥二(er)十烷四烯酸 規格： 48T/96T

 11-DH-TXB2 人11去(qu)氫血栓烷(wan)B2 規格(ge)： 48T/96T

 1,3-βD glucosidase 人1,3-βD葡葡糖(tang)苷(gan)酶 規(gui)格(ge)： 48T/96T

  OH 人1,25二(er)羥基3 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HIS 犬組(zu)胺 規格(ge)： 48T/96T

 TGF-β1 犬轉移(yi)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)β1 規格： 48T/96T

 MHC/DLA 犬(quan)主(zhu)要組(zu)織(zhi)相(xiang)容性復合(he)體 規(gui)格： 48T/96T

 PROG 犬孕激素/孕酮 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 HBsAg 犬(quan)乙(yi)型(xing)肝炎表(biao)面(mian)抗原 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 AChRab 犬乙(yi)酰受體(ti)抗體 規(gui)格： 48T/96T

 ISR-β 犬(quan)胰(yi)島(dao)素受體(ti)β 規格(ge)： 48T/96T

 INS 犬胰島(dao)素 規格(ge)： 48T/96T

Ar 1193 電感受態細胞50ul*50 FA 犬 規(gui)格(ge)： 48T/96T

 TXB2 犬血栓素B2 規格(ge)： 48T/96T

 TpP 犬血栓前(qian)體蛋白 規格(ge)： 48T/96T

 TM 犬(quan)血栓調(tiao)節蛋白 規格(ge)： 48T/96T