更新時間(jian):2025-11-29
K599 電感受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50是采(cai)用(yong)大腸桿(gan)菌經特(te)殊工藝處(chu)理(li)得(de)到的感受(shou)態細(xi)胞(bao),可用(yong)於DNA 的化(hua)學(xue)轉化(hua)。使(shi)用(yong)pUC19 質粒(li)檢(jian)測(ce),轉化(hua)效(xiao)率(lv)可達108個(ge)轉化(hua)子/μg質粒(li)DNA,-70℃保存3個(ge)月轉化(hua)效(xiao)率(lv)可保持(chi)在90%以上。
K599 電感受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50以下是的訂(ding)購信(xin)息儲(chu)存(cun)條件:-70℃凍(dong)存(cun)
操作方(fang)法(fa):
1. 取(qu)-80℃保存的農(nong)桿(gan)菌感受(shou)態於室溫或(huo)手(shou)心片刻(ke)待其(qi)部(bu)分融(rong)化(hua),處(chu)於冰(bing)水混(hun)合(he)狀(zhuang)態時插(cha)入冰中(zhong)。
2.每100 μl感受(shou)態加入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒(li)DNA(轉化(hua)效(xiao)率(lv)較(jiao)高,*次使(shi)用(yong)前做(zuo)預實驗確定(ding)所(suo)加(jia)質粒(li)的量),用(yong)手(shou)管(guan)底混(hun)勻(yun),依次於(yu)冰上(shang)靜(jing)置5分鐘(zhong)、液(ye)氮5分鐘(zhong)、37℃水浴(yu)5分鐘(zhong)、冰浴(yu)5分鐘(zhong)。
3. 加入(ru)700 μl無抗生素的LB或(huo)YEB液(ye)體(ti)培養基,於(yu)28℃振蕩(dang)培養2~3小時。
K599 電感受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*504. 6000 rpm離心壹分鐘(zhong)收菌,留取(qu)100 μl左右上清(qing)輕輕吹(chui)打(da)重懸菌塊塗布於含相(xiang)應(ying)抗(kang)生(sheng)素的LB或(huo)YEB平(ping)板(ban)上(shang),倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培養箱(xiang)培養2-3天
註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1. 加入(ru)質粒(li)時(shi)體(ti)積(ji)不(bu)應(ying)大於感受(shou)態體積(ji)的1/10;質粒(li)不(bu)純(chun)或(huo)存(cun)在乙醇等(deng)有(you)機物(wu)汙染(ran),轉化(hua)效(xiao)率(lv)急(ji)劇(ju)下降(jiang);質(zhi)粒(li)增(zeng)大壹倍,轉化(hua)效(xiao)率(lv)下降(jiang)壹(yi)個數(shu)量級。
2. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒(li)時(shi)應(ying)輕柔操作。轉化(hua)高(gao)濃(nong)度的質粒(li)可相(xiang)應(ying)減少(shao)終用(yong)於塗板(ban)的菌量。
K599 電感受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*503. 平板(ban)上(shang)陽(yang)性(xing)克隆密度過(guo)大時,由(you)於(yu)營養不足(zu),陽(yang)性(xing)克隆生長變(bian)慢(man),菌落變(bian)小,為(wei)了(le)獲得(de)大的菌落,應(ying)減少(shao)質(zhi)粒(li)用(yong)量。
4. 濃度不(bu)應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml,過(guo)高的濃度不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌生長,會(hui)降(jiang)低(di)其(qi)生(sheng)長速度和轉化(hua)效(xiao)率(lv)。本(ben)公司感受(shou)態計算(suan)轉化(hua)效(xiao)率(lv)時(shi)所(suo)用(yong)平板(ban)只(zhi)含有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用(yong)平板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則(ze)轉化(hua)效(xiao)率(lv)降(jiang)低(di)到(dao)1/2。
5. 培養基中(zhong)加(jia)入(ru)的目的是防(fang)止雜菌生長、篩選農(nong)桿(gan)菌;根據(ju)所(suo)用(yong)菌株抗(kang)性(xing)加入Ti質粒(li)篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素可防(fang)止Ti質粒(li)丟(diu)失(shi),但Ti質粒(li)篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素不(bu)利(li)於(yu)農(nong)桿(gan)菌的轉基因操作,所(suo)以(yi)壹般(ban)培養農(nong)桿(gan)菌時不(bu)考慮(lv)這(zhe)些(xie)抗生素,Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失(shi)的概率(lv)極低(di)(可以忽略)。
1,3-βD glucosidase 雞(ji)1,3-βD葡葡(pu)糖苷(gan)酶(mei) 規格: 48T/96T
Aflatoxin 黃(huang) 規格: 48T/96T
SJA 槐凝(ning)集(ji)素 規格: 48T/96T
PNA 花生(sheng)凝(ning)集(ji)素 規格: 48T/96T
TRAIL-R3 猴(hou)子腫(zhong)瘤壞(huai)死(si)因子相(xiang)關雕亡誘(you)導配(pei)體3 規格: 48T/96T
AChRab 猴(hou)子乙酰(xian)受(shou)體抗(kang)體 規格: 48T/96T
PF-4/CXCL4 猴(hou)子血小板(ban)因(yin)子4 規格: 48T/96T
VEGFR-3 猴(hou)子血管(guan)內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)生長因子受(shou)體-3 規格: 48T/96T
ADM 猴(hou)子腎(shen)上(shang)腺髓質(zhi)素 規格: 48T/96T
GFAP 猴(hou)子神(shen)經膠(jiao)質(zhi)纖(xian)維酸(suan)性(xing)蛋白(bai) 規格: 48T/96T
HSP gp96 猴(hou)子熱休克(ke)蛋白(bai)糖(tang)蛋(dan)白(bai)96 規格: 48T/96T
BNP 猴(hou)子腦(nao)鈉素/腦(nao)鈉尿肽(tai) 規格: 48T/96T
ET-1 猴(hou)子內(nei)皮(pi)素1 規格: 48T/96T
ET 猴(hou)子內(nei)毒(du)素 規格: 48T/96T
MIF 猴(hou)子巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)移動(dong)抑制(zhi)因(yin)子 規格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 猴(hou)子巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)炎性(xing)蛋白(bai)1α 規格: 48T/96T
Collagenase I 猴(hou)子膠(jiao)原(yuan)酶(mei)I 規格: 48T/96T
MMP11 猴(hou)子基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)11 規格: 48T/96T
FSH 猴(hou)子促卵(luan)泡(pao)素 規格: 48T/96T
LTC4 猴(hou)子白(bai)三烯C4 規格: 48T/96T
IL-2R 猴(hou)子白(bai)介(jie)素2受(shou)體 規格: 48T/96T
IL-1 猴(hou)子白(bai)介(jie)素1 規格: 48T/96T
α1-MG 猴(hou)子α1微球(qiu)蛋(dan)白(bai) 規格: 48T/96T
TNF-α 猴(hou)腫(zhong)瘤壞(huai)死(si)因子α 規格: 48T/96T
apo-B100 猴(hou)載脂(zhi)蛋白(bai)B100 規格: 48T/96T
apo-A1 猴(hou)載脂(zhi)蛋白(bai)A1 規格: 48T/96T
INS 猴(hou)胰(yi)島(dao)素 規格: 48T/96T
sVCAM-1 猴(hou)可溶性(xing)血管(guan)細(xi)胞(bao)粘附分子1 規格: 48T/96T
sICAM-1 猴(hou)可溶性(xing)細(xi)胞(bao)間粘附分子1 規格: 48T/96T
K599 電感受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*50 LMA 猴(hou)抗肝(gan)細(xi)胞(bao)膜抗體 規格: 48T/96T
hs-CRP 猴(hou)超敏(min)C反應(ying)蛋(dan)白(bai) 規格: 48T/96T
IFN-γ 猴(hou)γ 幹擾(rao)素 規格: 48T/96T
IFN-α 猴(hou)α幹擾(rao)素 規格: 48T/96T
E-Selectin/CD62E 猴(hou)E選擇素 規格: 48T/96T