酶ELISA試劑(ji)盒，即酶聯免疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(yan)試(shi)劑(ji)盒，是酶免(mian)疫(yi)測定技(ji)術(shu)中(zhong)應用廣(guang)的(de)技(ji)術(shu)。其(qi)基本原(yuan)理(li)是酶分(fen)子與(yu)抗(kang)體(ti)或(huo)抗抗體分(fen)子共(gong)價(jia)結合，這(zhe)種(zhong)結合既(ji)不會改變(bian)抗(kang)體的(de)免疫(yi)學(xue)特(te)性(xing)，也不影響(xiang)酶(mei)的(de)生物(wu)學(xue)活(huo)性(xing)。酶標記抗(kang)體(ti)可以與(yu)吸(xi)附在(zai)固(gu)相(xiang)載體上(shang)的(de)抗原(yuan)或(huo)抗體發生(sheng)特(te)異(yi)性(xing)結合(he)。在(zai)加(jia)入(ru)底(di)物溶液後(hou)，底(di)物在(zai)酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)下會使其(qi)所(suo)含(han)的(de)供氫(qing)體由無(wu)色的(de)還原(yuan)型(xing)變(bian)成(cheng)有色的(de)氧(yang)化型，從(cong)而出現(xian)顏(yan)色反應。因此，可(ke)以(yi)通過(guo)底(di)物的(de)顏(yan)色反應來判(pan)定(ding)有無(wu)相(xiang)應的(de)免疫(yi)反應，顏(yan)色反應的(de)深淺(qian)與(yu)標本中相(xiang)應抗體(ti)或(huo)抗原(yuan)的(de)量(liang)呈(cheng)正比(bi)。

　　為(wei)了確(que)保酶ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)高效使用(yong)和(he)精(jing)確測(ce)量(liang)，以(yi)下(xia)是壹些(xie)關(guan)鍵(jian)的(de)註意(yi)事項：

　　1、試(shi)劑(ji)準(zhun)備與保存

　　仔細(xi)檢查(zha)試(shi)劑(ji)盒：在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)，務(wu)必(bi)仔細(xi)檢查(zha)試(shi)劑(ji)盒的(de)生產日期(qi)、批號、有效期(qi)等(deng)關(guan)鍵(jian)信(xin)息，確保試劑(ji)盒在(zai)有效期(qi)內且未過(guo)期(qi)。

　　平衡(heng)試(shi)劑(ji)溫(wen)度(du)：從冷(leng)藏環境(jing)中(zhong)取出的(de)試劑(ji)盒應在(zai)室(shi)溫(wen)平衡15-30分(fen)鐘後(hou)方可使用，以避(bi)免(mian)因溫度(du)差(cha)異(yi)影響(xiang)檢測(ce)結(jie)果。

　　正確配(pei)制(zhi)試劑(ji)：嚴(yan)格按照試劑(ji)盒說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)，包(bao)括(kuo)抗(kang)體(ti)、酶(mei)標抗體(ti)、底(di)物等(deng)，避(bi)免(mian)出現(xian)濃度(du)誤差(cha)或(huo)汙染(ran)。

　　註(zhu)意試(shi)劑(ji)保存：配(pei)制(zhi)好的(de)試劑(ji)應存放於(yu)4℃冰箱(xiang)中，並盡(jin)快使用(yong)，避(bi)免(mian)反復(fu)凍融，以(yi)防止(zhi)試(shi)劑(ji)變(bian)質或(huo)失效。

　　2、樣本處理(li)與保存

　　正(zheng)確(que)采集樣本：根據實(shi)驗(yan)要(yao)求正確(que)采(cai)集樣本，如血清(qing)、血漿、尿液等(deng)，並註(zhu)意(yi)避(bi)免(mian)溶(rong)血、細(xi)菌汙(wu)染(ran)等(deng)。

　　及(ji)時(shi)處理(li)樣本：樣本采集後(hou)應盡(jin)早進行(xing)提取和(he)處理(li)，避(bi)免(mian)長時間放置(zhi)導致(zhi)樣本變(bian)質或(huo)降(jiang)解。

　　合理(li)保存樣本：如需保存樣本，應根據(ju)樣本類型(xing)選擇(ze)合適(shi)的(de)保存條(tiao)件(jian)，如(ru)短期(qi)保存可(ke)置(zhi)於(yu)2-8℃，長期(qi)保存則(ze)需(xu)凍存於(yu)-20℃或(huo)-80℃，並避(bi)免(mian)反復(fu)凍融。

　　3、實(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)

　　規(gui)範加(jia)樣：使用(yong)加(jia)樣器(qi)準(zhun)確加(jia)樣，避(bi)免(mian)產生(sheng)氣(qi)泡或(huo)濺(jian)出，同(tong)時註意(yi)控(kong)制(zhi)加(jia)樣時間，確(que)保所(suo)有樣本在(zai)壹(yi)致(zhi)的(de)溫度(du)下反應。

　　充分(fen)洗滌(di)：洗滌(di)過(guo)程(cheng)要(yao)徹(che)d，以(yi)去除未結合(he)的(de)物質，減少背景(jing)幹(gan)擾(rao)。同時(shi)要註(zhu)意(yi)洗滌(di)次數(shu)和(he)洗滌(di)液的(de)選擇(ze)，避(bi)免(mian)過(guo)度(du)洗滌(di)導致(zhi)抗原(yuan)抗(kang)體(ti)復合物脫(tuo)離(li)。

　　嚴(yan)格控(kong)制(zhi)溫育時(shi)間和(he)溫度(du)：溫育(yu)過(guo)程(cheng)是ELISA實(shi)驗(yan)的(de)關(guan)鍵(jian)步(bu)驟(zhou)之(zhi)壹，必(bi)須嚴(yan)格控(kong)制(zhi)溫育時(shi)間和(he)溫度(du)，以確(que)保抗原(yuan)抗(kang)體(ti)反應充分(fen)進(jin)行。

　　註意(yi)顯(xian)色反應：顯(xian)色時(shi)間和(he)程(cheng)度(du)對實(shi)驗(yan)結(jie)果有重(zhong)要影響(xiang)，應根據(ju)說明(ming)書(shu)提供的(de)時間範圍(wei)進(jin)行(xing)觀(guan)察和(he)判(pan)斷(duan)。

　　4、質量(liang)控(kong)制(zhi)與數據(ju)分析(xi)

　　做標準(zhun)曲(qu)線和(he)復孔(kong)：每(mei)次測(ce)定(ding)時(shi)都(dou)應制(zhi)作(zuo)標準(zhun)曲(qu)線，並盡(jin)量(liang)做復(fu)孔(kong)，以確(que)保實(shi)驗(yan)結(jie)果的(de)準(zhun)確性(xing)和(he)可靠(kao)性(xing)。

　　重(zhong)復驗(yan)證(zheng)實(shi)驗(yan)結(jie)果：對於(yu)異(yi)常(chang)結(jie)果應進行(xing)分(fen)析和(he)評估，排(pai)除幹(gan)擾因素(su)和(he)誤差(cha)影響(xiang)，必(bi)要時進行(xing)重(zhong)復驗(yan)證(zheng)。

　　結合(he)臨床數據進行(xing)解釋：對於(yu)定(ding)量(liang)檢測(ce)結(jie)果應結合(he)臨床數據進行(xing)解釋和(he)分析(xi)，避(bi)免(mian)單(dan)純依賴ELISA實(shi)驗(yan)結(jie)果進行診(zhen)斷(duan)和(he)治療(liao)。