豬(zhu)病毒(du)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒樣(yang)本(ben)處(chu)理方(fang)法
秋,不是常(chang)說(shuo)是金色(se)的(de)嗎(ma)?的確(que),她給(gei)大(da)自然帶來了豐碩的果實(shi),給(gei)包(bao)括(kuo)人在(zai)內(nei)的眾多生(sheng)物賞(shang)賜了無數(shu)得(de)以延(yan)續生(sheng)命的(de)食糧(liang)。接下(xia)來介紹 豬(zhu)病(bing)毒檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒樣(yang)本(ben)處(chu)理方(fang)法
樣(yang)本(ben)處(chu)理及(ji)要(yao)求:
1. 血清(qing):室(shi)溫血液自然凝(ning)固(gu)10-20分鐘(zhong),離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。
仔(zai)細收集上(shang)清(qing),保(bao)存過(guo)程(cheng)中(zhong)如出現(xian)沈澱(dian),應(ying)再(zai)次(ci)離心。
2. 血漿:應根(gen)據標(biao)本(ben)的要(yao)求選(xuan)擇EDTA或(huo)檸檬酸(suan)鈉作(zuo)為(wei)抗凝劑,混合10-20分鐘(zhong)後(hou),離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收集上(shang)清(qing),保(bao)存過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成(cheng),應該(gai)再(zai)次(ci)離心。
3. 尿液(ye):用(yong)無菌(jun)管收集,離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收集上(shang)清(qing),保(bao)存過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成(cheng),應再(zai)次(ci)離心。胸(xiong)腹水、腦脊(ji)液(ye)參(can)照實(shi)行。
4. 細胞(bao)培(pei)養上(shang)清(qing):檢(jian)測(ce)分泌(mi)性的(de)成(cheng)份(fen)時,用(yong)無菌(jun)管收集。離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收集上(shang)清(qing)。檢(jian)測(ce)細胞(bao)內(nei)的成(cheng)份(fen)時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋(shi)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,細胞(bao)濃度(du)達到100萬(wan)/ml左右(you)。通過(guo)反(fan)復(fu)凍融,以使細(xi)胞(bao)破(po)壞(huai)並(bing)放(fang)出細(xi)胞(bao)內(nei)成(cheng)份(fen)。離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收集上(shang)清(qing)。保(bao)存過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成(cheng),應再(zai)次(ci)離心。
5. 組織(zhi)標(biao)本(ben):切(qie)割(ge)標(biao)本(ben)後,稱(cheng)取(qu)重量(liang)。加(jia)入(ru)壹(yi)定量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮迅速冷(leng)凍保(bao)存備用。標(biao)本(ben)融化(hua)後(hou)仍(reng)然保(bao)持2-8℃的(de)溫度(du)。加入(ru)壹定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手工或(huo)勻(yun)漿器(qi)將標(biao)本(ben)勻漿(jiang)充分。離心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收集上(shang)清(qing)。分裝(zhuang)後(hou)壹份(fen)待(dai)檢(jian)測(ce),其(qi)余(yu)冷(leng)凍備用。
6. 標(biao)本(ben)采(cai)集後盡(jin)早進行提(ti)取,提(ti)取按相(xiang)關文(wen)獻進行,提(ti)取後(hou)應盡快進(jin)行實(shi)驗。若不能馬上(shang)進行試(shi)驗,可將標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保(bao)存,但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融.
7. 不能檢(jian)測(ce)含(han)NaN3的樣(yang)品,因(yin)NaN3抑制辣(la)根(gen)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(HRP)活(huo)性。