是(shi)將微(wei)生(sheng)物(wu)吸(xi)附在(zai)適當的(de)載體(ti),如土(tu)壤(rang)、沙子(zi)、矽膠、濾(lv)紙(zhi)上(shang),而(er)後(hou)進(jin)行(xing)幹(gan)燥(zao)的(de)保藏(zang)法(fa),例如沙土(tu)保藏(zang)法(fa)和濾紙(zhi)保(bao)藏(zang)法(fa)應(ying)用相當廣(guang)泛。
2.傳代(dai)培養法(fa)
又有斜(xie)面(mian)培養、穿刺培養、皰(pao)肉(rou)培養基(ji)培養等(deng)(後(hou)者作保藏(zang)厭氧細菌用),培養後(hou)於4—6℃冰箱內(nei)保存(cun)。
3.寄(ji)主(zhu)法(fa)
用於目前尚(shang)不(bu)能在(zai)人工培養基(ji)上(shang)生(sheng)長(chang)的(de)微生(sheng)物(wu),如病(bing)毒、立(li)克(ke)次氏體(ti)、螺(luo)旋(xuan)體(ti)等,它(ta)們必須(xu)在(zai)生(sheng)活(huo)的(de)動物、昆(kun)蟲、雞胚(pei)內(nei)感染(ran)並(bing)傳(chuan)代,此(ci)法(fa)相當於壹般(ban)微生(sheng)物(wu)的(de)傳代培養保(bao)藏(zang)法(fa)。病(bing)毒等(deng)微(wei)生(sheng)物(wu)亦(yi)可(ke)用其(qi)他(ta)方法(fa)如液氮(dan)保藏(zang)法(fa)與(yu)冷(leng)凍(dong)幹燥(zao)保(bao)藏(zang)法(fa)進(jin)行(xing)保(bao)藏(zang)。
4.液體(ti)石蠟(la)覆蓋(gai)法(fa)
是(shi)傳代(dai)培養的(de)變相方法(fa),能(neng)夠適當延長保藏(zang)時間(jian),它是(shi)在(zai)斜(xie)面(mian)培養物(wu)和穿刺培養物(wu)上(shang)面覆蓋(gai)滅(mie)菌的(de)液體(ti)石蠟(la),
壹方面(mian)可防(fang)止因培養基(ji)水(shui)分蒸(zheng)發而(er)引起(qi)菌(jun)種(zhong)死亡(wang),另壹方面(mian)可阻止氧氣進(jin)入(ru),以(yi)減(jian)弱(ruo)代謝(xie)作(zuo)用。
5.冷(leng)凍(dong)法(fa)
可分(fen)低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、幹冰酒精(jing)快速(su)凍(dong)結(約-70℃)和液氮(dan)(-196℃)等保(bao)藏(zang)法(fa)。
6.冷(leng)凍(dong)幹燥(zao)法(fa)
先使(shi)微生(sheng)物(wu)在(zai)極低溫度(du)(-70℃左右)下快速冷(leng)凍(dong),然後(hou)在(zai)減(jian)壓(ya)下利用升華(hua)現象(xiang)除去水(shui)分(fen)(真(zhen)空幹燥(zao))。
有些方法(fa)如濾(lv)紙(zhi)保(bao)藏(zang)法(fa)、液氮(dan)保藏(zang)法(fa)和冷(leng)凍(dong)幹燥(zao)保(bao)藏(zang)法(fa)等(deng)均需使(shi)用保護(hu)劑來制(zhi)備(bei)細胞(bao)懸液,以(yi)防(fang)止因冷(leng)凍(dong)或水分不斷(duan)升(sheng)華(hua)對細胞(bao)的(de)損害(hai)。保護(hu)性溶質(zhi)可通過(guo)氫和離(li)子鍵(jian)對(dui)水(shui)和細胞(bao)所(suo)產生(sheng)的(de)親(qin)和力(li)來穩(wen)定細胞(bao)成分的(de)構(gou)型(xing)。
保護(hu)劑有牛乳(ru)、血清(qing)、糖(tang)類、甘(gan)油、二(er)甲(jia)亞碸等。