更(geng)新(xin)時(shi)間:2025-11-29
K599 感受(shou)態細胞(bao)100ul*10是采(cai)用(yong)大腸桿菌(jun)經(jing)特(te)殊(shu)工(gong)藝(yi)處理得到的感受(shou)態細胞(bao),可(ke)用(yong)於(yu)DNA 的化(hua)學轉(zhuan)化(hua)。使(shi)用(yong)pUC19 質粒(li)檢(jian)測(ce),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)可(ke)達108個(ge)轉(zhuan)化(hua)子(zi)/μg質(zhi)粒DNA,-70℃保(bao)存(cun)3個月(yue)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)可(ke)保持在90%以(yi)上(shang)。
K599 感受(shou)態細胞(bao)100ul*10以(yi)下(xia)是的訂購(gou)信(xin)息(xi)儲存(cun)條(tiao)件:-70℃凍(dong)存(cun)
操作方(fang)法:
1. 取-80℃保存(cun)的農桿菌(jun)感受(shou)態於(yu)室(shi)溫或手心(xin)片(pian)刻(ke)待(dai)其部(bu)分融(rong)化,處於(yu)冰水混合狀態時插(cha)入(ru)冰(bing)中。
2.每100 μl感受(shou)態加入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒(li)DNA(轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)較(jiao)高,*次(ci)使用(yong)前做預實(shi)驗確(que)定所加質(zhi)粒的量(liang)),用(yong)手管底混勻,依次(ci)於(yu)冰上(shang)靜置(zhi)5分(fen)鐘、液氮5分鐘、37℃水浴(yu)5分鐘、冰浴(yu)5分(fen)鐘。
K599 感受(shou)態細胞(bao)100ul*103. 加(jia)入(ru)700 μl無(wu)抗生(sheng)素的LB或(huo)YEB液體培養基,於(yu)28℃振蕩(dang)培(pei)養2~3小(xiao)時。
4. 6000 rpm離(li)心(xin)壹(yi)分鐘收菌(jun),留取100 μl左右(you)上(shang)清輕輕吹打重懸(xuan)菌(jun)塊塗布於(yu)含相(xiang)應(ying)抗生(sheng)素的LB或(huo)YEB平板上(shang),倒置(zhi)放(fang)於(yu)28℃培養箱培(pei)養2-3天
註(zhu)意(yi)事項(xiang)
1. 加入(ru)質(zhi)粒(li)時體積(ji)不(bu)應(ying)大於(yu)感受(shou)態體積(ji)的1/10;質(zhi)粒不(bu)純或存在乙醇等(deng)有(you)機(ji)物(wu)汙(wu)染(ran),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)急(ji)劇下(xia)降(jiang);質(zhi)粒增(zeng)大壹(yi)倍(bei),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)下(xia)降(jiang)壹(yi)個數(shu)量(liang)級(ji)。
K599 感受(shou)態細胞(bao)100ul*102. 混入(ru)質(zhi)粒(li)時應(ying)輕柔操作。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃度的質(zhi)粒可(ke)相(xiang)應(ying)減(jian)少(shao)終用(yong)於(yu)塗板(ban)的菌(jun)量。
3. 平板上(shang)陽性(xing)克(ke)隆密度過(guo)大時(shi),由(you)於(yu)營(ying)養不足,陽性(xing)克(ke)隆生(sheng)長(chang)變慢(man),菌(jun)落變小(xiao),為了(le)獲得大的菌(jun)落,應(ying)減(jian)少(shao)質(zhi)粒用(yong)量。
4. 濃度不(bu)應(ying)高於(yu)25 μg/ml,過高(gao)的濃度不(bu)利(li)於(yu)農桿菌(jun)生(sheng)長(chang),會(hui)降(jiang)低(di)其生(sheng)長(chang)速度和轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。本(ben)公(gong)司(si)感受(shou)態計算(suan)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)時(shi)所用(yong)平板只(zhi)含(han)有(you)50 μg/ml kan,若(ruo)所用(yong)平板含(han)有(you)20 μg/ml rif則(ze)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)降(jiang)低(di)到1/2。
5. 培(pei)養基中加入(ru)的目(mu)的是防(fang)止(zhi)雜(za)菌(jun)生(sheng)長(chang)、篩選(xuan)農桿菌(jun);根(gen)據(ju)所用(yong)菌(jun)株抗性(xing)加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒(li)篩選(xuan)抗生(sheng)素可(ke)防止(zhi)Ti質粒丟失,但Ti質(zhi)粒(li)篩(shai)選(xuan)抗生(sheng)素不利(li)於(yu)農桿菌(jun)的轉(zhuan)基(ji)因(yin)操(cao)作(zuo),所以(yi)壹般培養農桿菌(jun)時不考(kao)慮(lv)這(zhe)些抗生(sheng)素,Ti質粒(li)丟失的概(gai)率(lv)極(ji)低(di)(可(ke)以(yi)忽(hu)略)。
SAA 大鼠(shu)血(xue)清(qing)澱(dian)粉樣蛋(dan)白A 規格(ge): 48T/96T
GMP-140 大鼠(shu)血(xue)漿(jiang)α顆(ke)粒膜(mo)蛋(dan)白 規格(ge): 48T/96T
HO-2 大鼠(shu)血(xue)紅素氧合(he)酶2 規(gui)格(ge): 48T/96T
HO-1 大鼠(shu)血(xue)紅素氧合(he)酶1 規(gui)格(ge): 48T/96T
ADAMTS13/vWF-cp 大鼠(shu)血(xue)管性(xing)血(xue)友(you)病(bing)因子(zi)裂解蛋(dan)白酶 規(gui)格(ge): 48T/96T
VWF 大鼠(shu)血(xue)管性(xing)血(xue)友(you)病(bing)因子(zi)/瑞(rui)斯(si)托(tuo)黴素輔(fu)因(yin)子(zi) 規(gui)格: 48T/96T
BK 大鼠(shu)血(xue)管舒緩(huan)激肽 規(gui)格(ge): 48T/96T
ANG-R-Tie2 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素受體Tie2 規格(ge): 48T/96T
ANG-R-Tie1 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素受體Tie1 規格(ge): 48T/96T
ANG-4 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素4 規格(ge): 48T/96T
ANG-2 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素2 規格(ge): 48T/96T
ANG-1 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)成素1 規格(ge): 48T/96T
ANG 大鼠(shu)血(xue)管生(sheng)長(chang)素 規格(ge): 48T/96T
VCAM-1/CD106 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子(zi)1 規(gui)格: 48T/96T
VEGFR-2 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)受(shou)體2 規格(ge): 48T/96T
VEGFR-1 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)受(shou)體1 規格(ge): 48T/96T
VEGF-D 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)D 規(gui)格: 48T/96T
VEGF-C 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)C 規(gui)格: 48T/96T
VEGF-B 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)B 規(gui)格: 48T/96T
VEGF 大鼠(shu)血(xue)管內(nei)皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi) 規(gui)格: 48T/96T
ACE 大鼠(shu)血(xue)管緊張素轉(zhuan)化(hua)酶(mei) 規(gui)格(ge): 48T/96T
aGT 大鼠(shu)血(xue)管緊張素原 規(gui)格: 48T/96T
ANG-Ⅱ 大鼠(shu)血(xue)管緊張素Ⅱ 規格(ge): 48T/96T
Ang-Ⅰ 大鼠(shu)血(xue)管緊張素Ⅰ 規格(ge): 48T/96T
VIP 大鼠(shu)血(xue)管活性(xing)腸肽 規(gui)格(ge): 48T/96T
BrdU 大鼠(shu)溴脫氧(yang)核(he)苷(gan) 規格(ge): 48T/96T
ASD 大鼠(shu)雄烯(xi)二酮(tong) 規(gui)格: 48T/96T
Smad7 大鼠(shu)信(xin)號轉(zhuan)導分子(zi)7 規(gui)格: 48T/96T
Smad1 大鼠(shu)信(xin)號轉(zhuan)導分子(zi) 規(gui)格: 48T/96T
NN-T4 大鼠(shu)新(xin)生(sheng)甲(jia)狀腺素 規格(ge): 48T/96T
K599 感受(shou)態細胞(bao)100ul*10大鼠(shu)心(xin)肌轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)GATA4 ELISA Kit,48T/96T 大鼠(shu)心(xin)肌轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)GATA4 ELISA Kit,48T/96T 規(gui)格: 48T/96T
CT-1 大鼠(shu)心(xin)肌營(ying)養素1 規格(ge): 48T/96T
cTnT 大鼠(shu)心(xin)肌特(te)異性(xing)肌鈣(gai)蛋(dan)白T 規格(ge):