豬可溶(rong)性細胞(bao)間粘附(fu)分子試劑盒(he)樣(yang)本方法(fa)
秋(qiu)天總是在(zai)不(bu)知不(bu)覺中(zhong)來臨(lin),它(ta)不(bu)像春(chun)天那(na)樣(yang),讓(rang)我(wo)們為路(lu)旁(pang)和(he)壹(yi)朵野花而感(gan)到(dao)驚喜(xi),也不(bu)像冬(dong)天(tian)那(na)樣(yang),讓(rang)我(wo)們在(zai)雪(xue)堆(dui)裏玩耍。度(du)過炎(yan)熱的夏天,我們(men)該(gai)享受(shou)著(zhe)絲(si)絲(si)涼(liang)意的秋天(tian)。接下(xia)來介紹 豬可溶(rong)性細胞(bao)間粘附(fu)分子試劑盒(he)樣(yang)本方法(fa)
樣(yang)本處(chu)理及(ji)要求:
1. 血清(qing):室溫(wen)血液自然凝固10-20分鐘,離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存(cun)過程(cheng)中如出現沈(chen)澱,應(ying)再次(ci)離(li)心。
2. 血漿:應(ying)根據(ju)標(biao)本的要求(qiu)選擇(ze)EDTA或檸(ning)檬酸鈉(na)作(zuo)為(wei)抗凝劑,混(hun)合(he)10-20分鐘後(hou),離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存(cun)過程(cheng)中如有(you)沈(chen)澱形成,應(ying)該(gai)再(zai)次離(li)心。
3. 尿液:用無菌管收(shou)集(ji),離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存(cun)過程(cheng)中如有(you)沈(chen)澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心。胸腹(fu)水(shui)、腦(nao)脊(ji)液(ye)參照實行(xing)。
4. 細胞(bao)培養上(shang)清(qing):檢測分泌(mi)性的成份(fen)時,用無菌管收(shou)集(ji)。離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。檢測細胞(bao)內的成份(fen)時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shi)細胞(bao)懸液,細胞(bao)濃度達到(dao)100萬/ml左右。通過反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong),以使(shi)細胞(bao)破壞並(bing)放出細胞(bao)內成份(fen)。離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。保存(cun)過程(cheng)中如有(you)沈(chen)澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心。
5. 組織(zhi)標(biao)本:切割(ge)標(biao)本後(hou),稱取(qu)重量(liang)。加(jia)入(ru)壹(yi)定量(liang)的PBS,PH7.4。用液氮(dan)迅(xun)速冷(leng)凍(dong)保(bao)存(cun)備(bei)用。標(biao)本融化(hua)後(hou)仍然保(bao)持(chi)2-8℃的溫度(du)。加入(ru)壹(yi)定量(liang)的PBS(PH7.4),用手(shou)工(gong)或勻漿器(qi)將標(biao)本勻漿充(chong)分。離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。分裝後(hou)壹(yi)份(fen)待(dai)檢測,其余冷(leng)凍(dong)備(bei)用。
6. 標(biao)本采集(ji)後(hou)盡早(zao)進行(xing)提取(qu),提取(qu)按(an)相(xiang)關(guan)文獻進行(xing),提取(qu)後(hou)應(ying)盡快(kuai)進行(xing)實驗。若(ruo)不(bu)能(neng)馬(ma)上(shang)進行(xing)試(shi)驗(yan),可將標(biao)本放於-20℃保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong).
7. 不(bu)能(neng)檢(jian)測含NaN3的樣(yang)品(pin),因(yin)NaN3抑(yi)制辣根過氧(yang)化(hua)物酶(mei)的(HRP)活性。