K599 感(gan)受態細(xi)胞100ul*50

K599 感(gan)受態細(xi)胞100ul*50以(yi)下(xia)是(shi)的(de)訂購(gou)信(xin)息儲存條(tiao)件(jian)：-70℃凍存
操(cao)作(zuo)方(fang)法:
1. 取(qu)-80℃保存的(de)農(nong)桿(gan)菌(jun)感(gan)受態於(yu)室(shi)溫(wen)或手(shou)心(xin)片(pian)刻(ke)待(dai)其部(bu)分(fen)融化(hua)，處於(yu)冰(bing)水(shui)混(hun)合狀態時(shi)插入(ru)冰(bing)中(zhong)。
2.每(mei)100 μl感(gan)受態加(jia)入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒(li)DNA（轉(zhuan)化(hua)效率較高(gao)，*次使(shi)用(yong)前做預實(shi)驗(yan)確(que)定所(suo)加(jia)質粒(li)的(de)量），用(yong)手管(guan)底(di)混(hun)勻，依次於(yu)冰(bing)上(shang)靜置(zhi)5分(fen)鐘、液氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴(yu)5分(fen)鐘、冰(bing)浴(yu)5分(fen)鐘。
3. 加(jia)入(ru)700 μl無(wu)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，於(yu)28℃振(zhen)蕩(dang)培(pei)養(yang)2~3小時(shi)。
K599 感(gan)受態細(xi)胞100ul*504. 6000 rpm離(li)心(xin)壹(yi)分(fen)鐘收(shou)菌(jun)，留(liu)取(qu)100 μl左(zuo)右(you)上(shang)清輕輕吹(chui)打(da)重懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗(tu)布(bu)於(yu)含相(xiang)應(ying)抗(kang)生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平(ping)板(ban)上(shang)，倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)2-3天
註(zhu)意事項(xiang)
1. 加(jia)入(ru)質(zhi)粒(li)時(shi)體(ti)積(ji)不應(ying)大於(yu)感(gan)受態體(ti)積(ji)的(de)1/10；質粒(li)不純或存(cun)在(zai)乙(yi)醇(chun)等有機(ji)物汙(wu)染，轉(zhuan)化(hua)效率急(ji)劇(ju)下(xia)降(jiang)；質(zhi)粒增大壹(yi)倍(bei)，轉(zhuan)化(hua)效率下(xia)降(jiang)壹(yi)個(ge)數量(liang)級(ji)。
2. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒(li)時(shi)應(ying)輕柔操(cao)作(zuo)。轉(zhuan)化(hua)高濃(nong)度的(de)質粒(li)可相(xiang)應(ying)減(jian)少(shao)終用(yong)於(yu)塗板(ban)的(de)菌(jun)量(liang)。
K599 感(gan)受態細(xi)胞100ul*503. 平(ping)板(ban)上(shang)陽性(xing)克(ke)隆(long)密度過(guo)大時(shi)，由(you)於(yu)營養(yang)不足，陽(yang)性克隆(long)生(sheng)長(chang)變(bian)慢，菌(jun)落(luo)變(bian)小，為(wei)了(le)獲(huo)得大的(de)菌(jun)落(luo)，應(ying)減(jian)少(shao)質粒(li)用(yong)量。
4. 濃(nong)度不應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml，過(guo)高的(de)濃(nong)度不利於(yu)農(nong)桿(gan)菌(jun)生(sheng)長(chang)，會(hui)降低(di)其生(sheng)長(chang)速(su)度和轉(zhuan)化(hua)效率。本公(gong)司感(gan)受態計(ji)算(suan)轉(zhuan)化(hua)效率時(shi)所(suo)用(yong)平板只含有50 μg/ml kan，若(ruo)所(suo)用(yong)平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuan)化(hua)效率降低(di)到(dao)1/2。
5. 培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加(jia)入(ru)的(de)目的(de)是(shi)防(fang)止(zhi)雜(za)菌(jun)生(sheng)長(chang)、篩(shai)選(xuan)農(nong)桿(gan)菌(jun)；根(gen)據(ju)所(suo)用(yong)菌(jun)株(zhu)抗(kang)性(xing)加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒(li)篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)可防(fang)止(zhi)Ti質(zhi)粒(li)丟失，但(dan)Ti質(zhi)粒篩(shai)選(xuan)抗(kang)生(sheng)素(su)不利於(yu)農(nong)桿(gan)菌(jun)的(de)轉(zhuan)基(ji)因(yin)操(cao)作(zuo)，所(suo)以壹(yi)般(ban)培(pei)養(yang)農(nong)桿(gan)菌(jun)時(shi)不考(kao)慮(lv)這(zhe)些抗生(sheng)素(su)，Ti質(zhi)粒(li)丟失的(de)概(gai)率(lv)極(ji)低(di)(可以(yi)忽(hu)略)。

 Amylin 大鼠胰澱(dian)素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 ICA 大鼠胰島細(xi)胞抗(kang)體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 IAA 大鼠胰島素(su)自身抗(kang)體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 PI 大鼠胰島素(su)原 規格(ge)： 48T/96T

 IGFBP-4 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)結(jie)合蛋(dan)白(bai)4 規格(ge)： 48T/96T

 IGFBP-3 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)結(jie)合蛋(dan)白(bai)3 規格(ge)： 48T/96T

 IGFBP-2 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)結(jie)合蛋(dan)白(bai)2 規格(ge)： 48T/96T

 IGFBP-1 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)結(jie)合蛋(dan)白(bai)1 規格(ge)： 48T/96T

 IGF-2 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)2 規格(ge)： 48T/96T

 IGF-1 大鼠胰島素(su)樣(yang)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)1 規格(ge)： 48T/96T

 ISR-β 大鼠胰島素(su)受體(ti)β 規格(ge)： 48T/96T

 INS 大鼠胰島素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 TAP 大鼠原激活(huo)肽(tai) 規格(ge)： 48T/96T

 trypsin 大鼠 規格(ge)： 48T/96T

 NOS 大鼠壹(yi)氧(yang)化氮(dan)合成(cheng)酶(mei) 規格(ge)： 48T/96T

 FA 大鼠 規格(ge)： 48T/96T

 OLAb 大鼠氧(yang)化低(di)密度脂蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 OxLDL 大鼠氧(yang)化低(di)密度脂蛋(dan)白(bai) 規格(ge)： 48T/96T

 NADPH 大鼠腺嘌呤(ling)二核苷酸磷(lin)酸(suan) 規格(ge)： 48T/96T

 N-AChR 大鼠煙堿型(xing)乙(yi)酰(xian)受體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 PF-4/CXCL4 大鼠血小板(ban)因(yin)子(zi)4 規格(ge)： 48T/96T

 PF-3 大鼠血小板(ban)因(yin)子(zi)3 規格(ge)： 48T/96T

 PDGFsR-α 大鼠血小板(ban)衍生(sheng)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)可溶性(xing)受體(ti)α 規格(ge)： 48T/96T

 PDGF-BB 大鼠血小板(ban)衍生(sheng)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)BB 規格(ge)： 48T/96T

 PDGF-AB 大鼠血小板(ban)衍生(sheng)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)AB 規格(ge)： 48T/96T

 PDGF 大鼠血小板(ban)衍生(sheng)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi) 規格(ge)： 48T/96T

 TPO 大鼠血小板(ban)生(sheng)成(cheng)素(su) 規格(ge)： 48T/96T

 GP-ⅡbⅢa 大鼠血小板(ban)膜糖(tang)蛋(dan)白(bai)ⅡbⅢa 規格(ge)： 48T/96T

 PAF 大鼠血小板(ban)活(huo)化(hua)因(yin)子(zi) 規格(ge)： 48T/96T

 TSP-1 大鼠血小板(ban)反(fan)應蛋(dan)白(bai)/敏(min)感(gan)蛋(dan)白(bai)1 規格(ge)： 48T/96T

 FDP 大鼠血纖蛋(dan)白(bai)原降解產(chan)物 規格(ge)： 48T/96T

 Fbg 大鼠血纖蛋(dan)白(bai)原 規格(ge)： 48T/96T

 TXB2 大鼠血栓素(su)B2 規格(ge)： 48T/96T

 TpP 大鼠血栓前體(ti)蛋白(bai) 規格(ge)： 48T/96T

 TM 大鼠血栓調(tiao)節(jie)蛋白(bai) 規格(ge)： 48T/96T

 K599 感(gan)受態細(xi)胞100ul*50CH50 大鼠血清總(zong)補體(ti) 規格(ge)： 48T/96T

 NO 大鼠血清壹(yi)氧(yang)化氮(dan) 規格(ge)： 48T/96T

48T/96T