MSU440 電感受(shou)態(tai)細胞50ul*50

MSU440 電感(gan)受態(tai)細胞50ul*50 操(cao)作方(fang)法（以下(xia)操(cao)作均按(an)無菌條件(jian)的(de)標(biao)準(zhun)進行）
1 取(qu)感受(shou)態細胞置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中(zhong)，如(ru)需分(fen)裝(zhuang)可(ke)將(jiang)剛(gang)融(rong)化細胞懸液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao)無菌預冷(leng)的(de)離(li)心(xin)管中(zhong)，置(zhi)於(yu)冰(bing)浴(yu)中(zhong)。
●  壹(yi)次(ci)轉化感受(shou)態細胞的(de)建(jian)議(yi)用量(liang)為50-100 μl，可(ke)以根(gen)據實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)分(fen)裝(zhuang)使(shi)用(yong)。應(ying)註意(yi)所(suo)用DNA 體積不要超(chao)過(guo)感(gan)受態(tai)細胞懸液(ye)體積的(de)十分(fen)之壹(yi)。
以下(xia)實(shi)驗(yan)以100 μl感受態細胞為例。
MSU440 電(dian)感(gan)受(shou)態細胞50ul*502 向(xiang)感受(shou)態細胞懸液(ye)中加入(ru)目的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞能夠被(bei)1 ng 超(chao)螺(luo)旋質粒DNA 所(suo)飽和），輕(qing)輕(qing)旋轉離(li)心(xin)管以混(hun)勻內容物(wu)，在(zai)冰浴(yu)中(zhong)靜置(zhi)30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將離(li)心(xin)管置(zhi)於(yu)42℃水浴(yu)中(zhong)放置(zhi)60-90 秒(miao)，然後(hou)快速將管轉移(yi)到(dao)冰(bing)浴(yu)中(zhong)，使(shi)細胞冷(leng)卻2-3 分(fen)鐘(zhong)，該(gai)過(guo)程不要搖動(dong)離(li)心(xin)管。
4 向(xiang)每個(ge)離心(xin)管中(zhong)加入(ru)900 μl 無菌的(de)SOC 或(huo)LB 培養基（不含抗生(sheng)素(su)）， 混(hun)勻後置(zhi)於(yu)37℃搖(yao)床振蕩培養1 小(xiao)時（160-220 轉/分(fen)鐘(zhong)），目的(de)是(shi)使(shi)質(zhi)粒上(shang)相關(guan)的(de)抗性(xing)標記基因表(biao)達(da)，使菌體復(fu)蘇。
MSU440 電感(gan)受態(tai)細胞50ul*505 將離心(xin)管內容物(wu)混(hun)勻，吸取100 μl 已轉化的(de)感(gan)受(shou)態(tai)細胞加到(dao)含(han)相應(ying)抗生(sheng)素(su)的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體瓊(qiong)脂培養基上(shang)，用無菌的(de)彎(wan)頭(tou)玻(bo)棒輕(qing)輕(qing)的(de)將(jiang)細胞均勻塗開(kai)。將(jiang)平板置(zhi)於(yu)室(shi)溫(wen)直(zhi)至液(ye)體被(bei)吸收，倒置(zhi)平板，37℃培養12-16 小(xiao)時。
●  塗布(bu)用(yong)量(liang)可(ke)根(gen)據具(ju)體實(shi)驗來調整。如(ru)轉化的(de)DNA 總量(liang)較多(duo)，可(ke)取(qu)更少量(liang)轉化產物(wu)塗布(bu)平板；反(fan)之，如(ru)轉化的(de)DNA 總量(liang)較少，可(ke)取(qu)200-300 μl 轉化產物(wu)塗布(bu)平板。如(ru)果預計(ji)的(de)克(ke)隆較(jiao)少，可(ke)通過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘(zhong)）後吸除部(bu)分(fen)培養液(ye)，懸浮菌體後(hou)將其(qi)塗布(bu)於(yu)壹(yi)個平板中。（塗布(bu)剩余(yu)的(de)菌液(ye)可(ke)置(zhi)於(yu)4℃保(bao)存(cun)，如(ru)果次日的(de)轉化菌落數(shu)過(guo)少可(ke)以將剩下(xia)的(de)菌液(ye)再塗布(bu)新的(de)培養板(ban)）
 註意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 感受(shou)態細胞應(ying)保(bao)存(cun)在(zai) -70℃，不可(ke)多(duo)次凍(dong)融(rong)和放置(zhi)時間(jian)過(guo)長(chang)，以避(bi)免(mian)降(jiang)低感(gan)受(shou)態(tai)細胞的(de)轉化效率(lv)。
2. 進行轉化操(cao)作時，應(ying)根(gen)據相(xiang)應(ying)溫度及無菌條件(jian)的(de)要(yao)求(qiu)進行。
3 為(wei)防止(zhi)轉化實驗(yan)不成(cheng)功(gong)，可(ke)以保(bao)留部(bu)分(fen)連(lian)接(jie)反(fan)應(ying)液(ye)，以重(zhong)新轉化，將損(sun)失降到(dao)低。
以下(xia)是(shi)的(de)相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin)：

 cTn-Ⅰ 大鼠心(xin)肌肌鈣蛋白Ⅰ 規(gui)格： 48T/96T

 cTn-Ⅰ 大鼠心(xin)肌肌鈣蛋白Ⅰ 規(gui)格： 48T/96T

 TAFI 大鼠纖(xian)溶(rong)抑制因子 規(gui)格： 48T/96T

 PAI-1 大鼠纖(xian)溶(rong)酶(mei)原激活(huo)物抑制因子1 規(gui)格： 48T/96T

 PAI 大鼠纖(xian)溶(rong)酶(mei)原激活(huo)物抑制因子 規(gui)格： 48T/96T

 PAP 大鼠纖(xian)溶(rong)酶(mei)抗纖(xian)溶(rong)酶(mei)復(fu)合(he)物 規(gui)格： 48T/96T

 FN 大鼠纖(xian)連(lian)蛋白 規(gui)格： 48T/96T

 Cyclin-D3 大鼠細胞周期素(su)D3 規(gui)格： 48T/96T

 Cyclin-D2 大鼠細胞周期素(su)D2 規(gui)格： 48T/96T

 Cyclin-D1 大鼠細胞周期素(su)D1 規(gui)格： 48T/96T

 CYP2E1 大鼠細胞色素(su)P4502E1 規(gui)格： 48T/96T

 CYP450 大鼠細胞色素(su)P450 規(gui)格： 48T/96T

 Cyt-C 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

 ICAM-3/CD50 大鼠細胞間粘附(fu)分(fen)子3 規(gui)格： 48T/96T

 ICAM-2/CD102 大鼠細胞間粘附(fu)分(fen)子2 規(gui)格： 48T/96T

 ICAM-1/CD54 大鼠細胞間粘附(fu)分(fen)子1 規(gui)格： 48T/96T

 Pentosidine 大鼠戊糖素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 MTL 大鼠胃動(dong)素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 Pepsin 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

大鼠胃腸(chang)癌標誌(zhi)物(wu)CA199ELISA Kit，48T/96T 大(da)鼠胃腸(chang)癌標誌(zhi)物(wu)CA199ELISA Kit，48T/96T 規(gui)格： 48T/96T

 VK1 大鼠1 規(gui)格： 48T/96T

 VE 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

 VD3 大鼠3 規(gui)格： 48T/96T

 VD2 大鼠2 規(gui)格： 48T/96T

 VD 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

 VC 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

 VB6 大鼠6 規(gui)格： 48T/96T

 VB12 大鼠12 規(gui)格： 48T/96T

 VA 大鼠 規(gui)格： 48T/96T

 omentin 大鼠網(wang)膜(mo)素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 AGEs 大鼠晚(wan)期糖基化終末產(chan)物(wu) 規格： 48T/96T

 DPD 大鼠脫氧吡啶(ding)酚(fen)/脫氧吡啶(ding)啉 規格： 48T/96T

MSU440 電感(gan)受(shou)態細胞50ul*50 DHEA-S 大鼠脫氫表(biao)雄(xiong)酮硫酸酯(zhi) 規格： 48T/96T

 HABP 大鼠透(tou)明(ming)質酸結合(he)蛋白 規(gui)格： 48T/96T

 HA 大鼠透(tou)明(ming)質酸 規格： 48T/96T