MSU440 電(dian)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)50ul*10

 MSU440 電感受態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*10操作方法(fa)（以(yi)下(xia)操作均按(an)無(wu)菌條件(jian)的標(biao)準進(jin)行(xing)）
1 取(qu)感受態細(xi)胞(bao)置於(yu)冰浴中(zhong)，如(ru)需(xu)分裝可將(jiang)剛融化細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)分裝到無菌預冷(leng)的離心管(guan)中(zhong)，置於(yu)冰浴中(zhong)。
●  壹(yi)次轉化感(gan)受態細(xi)胞(bao)的建議用(yong)量(liang)為50-100 μl，可以(yi)根據(ju)實際(ji)情(qing)況(kuang)分裝使(shi)用(yong)。應註意(yi)所用DNA 體(ti)積(ji)不(bu)要超過感受(shou)態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)體(ti)積(ji)的十分(fen)之壹。
以(yi)下(xia)實驗(yan)以(yi)100 μl感受(shou)態細(xi)胞(bao)為例(li)。
2 向感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)中(zhong)加(jia)入目(mu)的DNA（100 μl 的感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)能(neng)夠(gou)被(bei)1 ng 超螺(luo)旋質(zhi)粒(li)DNA 所飽和(he)），輕輕旋(xuan)轉離心管(guan)以(yi)混勻(yun)內(nei)容物(wu)，在(zai)冰浴中(zhong)靜置30 分(fen)鐘(zhong)。
 MSU440 電感受態細(xi)胞(bao)50ul*103 將(jiang)離心管(guan)置於(yu)42℃水浴中(zhong)放(fang)置60-90 秒(miao)，然(ran)後快(kuai)速(su)將(jiang)管(guan)轉移到冰浴中(zhong)，使(shi)細(xi)胞(bao)冷(leng)卻2-3 分(fen)鐘，該過程不(bu)要搖動(dong)離心管(guan)。
4 向(xiang)每(mei)個(ge)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入900 μl 無(wu)菌的SOC 或(huo)LB 培養基(ji)（不(bu)含抗生(sheng)素）， 混勻(yun)後(hou)置於(yu)37℃搖床(chuang)振(zhen)蕩(dang)培養1 小時（160-220 轉/分鐘(zhong)），目(mu)的是(shi)使(shi)質(zhi)粒(li)上(shang)相(xiang)關的抗(kang)性(xing)標記(ji)基(ji)因(yin)表達，使菌體(ti)復蘇(su)。
 MSU440 電感受態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*105 將(jiang)離心管(guan)內(nei)容物(wu)混勻(yun)，吸取(qu)100 μl 已轉化的感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)加(jia)到含相應抗生(sheng)素的SOB 或(huo)LB 固體(ti)瓊脂培養基(ji)上(shang)，用(yong)無菌的彎(wan)頭(tou)玻棒輕輕的將(jiang)細(xi)胞(bao)均勻塗開。將(jiang)平板(ban)置於(yu)室溫直至(zhi)液(ye)體(ti)被吸收(shou)，倒置平板(ban)，37℃培養12-16 小時。
●  塗(tu)布用量(liang)可根據(ju)具體(ti)實驗(yan)來調整。如(ru)轉化的DNA 總(zong)量(liang)較多，可取(qu)更(geng)少(shao)量(liang)轉化產(chan)物(wu)塗(tu)布平板(ban)；反之，如(ru)轉化的DNA 總(zong)量(liang)較少，可取(qu)200-300 μl 轉化產(chan)物(wu)塗(tu)布平板(ban)。如(ru)果(guo)預計(ji)的克(ke)隆(long)較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）後(hou)吸除(chu)部分(fen)培養液(ye)，懸浮菌體(ti)後將(jiang)其塗布於(yu)壹個(ge)平板(ban)中(zhong)。（塗(tu)布剩余(yu)的菌液(ye)可置於(yu)4℃保(bao)存(cun)，如(ru)果(guo)次日(ri)的轉化菌落(luo)數(shu)過(guo)少(shao)可以(yi)將(jiang)剩下(xia)的菌液(ye)再(zai)塗布新的培養板(ban)）
 註意(yi)事項(xiang)
1. 感受態細(xi)胞(bao)應(ying)保(bao)存(cun)在(zai) -70℃，不(bu)可多(duo)次凍(dong)融(rong)和(he)放(fang)置時間(jian)過(guo)長(chang)，以(yi)避免(mian)降低(di)感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)的轉化效(xiao)率(lv)。
2. 進行(xing)轉化操作時，應(ying)根據(ju)相應(ying)溫度及無菌條件(jian)的要求進行(xing)。
3 為防(fang)止轉化實驗(yan)不(bu)成(cheng)功(gong)，可以(yi)保(bao)留(liu)部(bu)分(fen)連(lian)接反應液(ye)，以(yi)重新(xin)轉化，將(jiang)損失(shi)降到低(di)。
以(yi)下(xia)是(shi)的相(xiang)關產(chan)品(pin)：

 FE 大鼠(shu)鐵蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 GP-MM 大鼠(shu)糖(tang)原磷(lin)酸(suan)化酶(mei)同工(gong)酶(mei)MM 規(gui)格： 48T/96T

 GP-II 大鼠(shu)糖(tang)原磷(lin)酸(suan)化酶(mei)同工(gong)酶(mei)II 規(gui)格： 48T/96T

 GP-BB 大鼠(shu)糖(tang)原磷(lin)酸(suan)化酶(mei)同工(gong)酶(mei)BB 規(gui)格： 48T/96T

 GSK 大鼠(shu)糖(tang)原合成(cheng)酶(mei)激(ji)酶(mei) 規(gui)格： 48T/96T

 CDT 大鼠(shu)糖(tang)缺(que)失(shi)性(xing)轉鐵蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 GR 大鼠(shu)糖(tang)皮(pi)質(zhi)類固醇(chun)受(shou)體(ti) 規格： 48T/96T

 GHbA1c 大鼠(shu)糖(tang)化血(xue)紅蛋(dan)白A1c 規(gui)格： 48T/96T

 gp130 大鼠(shu)糖(tang)蛋(dan)白130 規(gui)格： 48T/96T

 CA-2 大鼠(shu)碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)2 規(gui)格： 48T/96T

 CA 大鼠(shu)碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei) 規(gui)格： 48T/96T

 PLGF 大鼠(shu)胎盤(pan)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 TREM-1 大鼠(shu)髓(sui)系(xi)細(xi)胞(bao)觸(chu)發(fa)受體(ti)-1 規格： 48T/96T

 MBP 大鼠(shu)髓(sui)磷(lin)脂堿(jian)性蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

大鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)特(te)異(yi)性(xing)抗中(zhong)性(xing)粒(li)細(xi)胞(bao)胞(bao)質(zhi)抗體(ti)IgG 大鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)特(te)異(yi)性(xing)抗中(zhong)性(xing)粒(li)細(xi)胞(bao)胞(bao)質(zhi)抗體(ti)IgG 規格： 48T/96T

 MPO 大鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化物(wu)酶(mei) 規(gui)格： 48T/96T

 aFGF-1 大鼠(shu)酸(suan)性(xing)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)1 規格： 48T/96T

 AQP-5 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白5 規(gui)格： 48T/96T

 AQP-4 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白4 規(gui)格： 48T/96T

 AQP-3 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白3 規(gui)格： 48T/96T

 AQP-2 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白2 規(gui)格： 48T/96T

 AQP-1 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白1 規(gui)格： 48T/96T

 AQP-0 大鼠(shu)水通道蛋(dan)白0 規(gui)格： 48T/96T

 DHT 大鼠(shu)雙(shuang)氫(qing)睪酮(tong) 規格： 48T/96T

 ECP 大鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)性(xing)粒(li)細(xi)胞(bao)陽(yang)離子(zi)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 ECF 大鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒(li)細(xi)胞(bao)趨(qu)化因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 CCL11 大鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒(li)細(xi)胞(bao)趨(qu)化蛋(dan)白Eotaxin 1 規(gui)格： 48T/96T

 RBP-4 大鼠(shu)結合蛋(dan)白4 規(gui)格： 48T/96T

 RBP 大鼠(shu)結合蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 MSU440 電感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*10 GH 大(da)鼠(shu)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi) 規格： 48T/96T

 SS 大鼠(shu) 規(gui)格： 48T/96T

 GHRP-Ghrelin 大鼠(shu)生(sheng)長(chang)激素釋放(fang)肽ghrelin 規(gui)格： 48T/96T

 GHRP 大鼠(shu)生(sheng)長(chang)激素釋放(fang)多肽(tai) 規(gui)格： 48T/96T