更新(xin)時(shi)間:2025-11-29
MSU440 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*100菌(jun)株(zhu)壹(yi)種(zhong)常用於(yu)質(zhi)粒克隆(long)的(de)菌株(zhu)。其φ80lacZΔM15基因(yin)的(de)產物可與pUC載體(ti)編碼的(de)b-半乳糖(tang)苷(gan)酶(mei)氨(an)基(ji)端實現(xian)a互(hu)補,可用於(yu)藍(lan)白(bai)斑篩選。recA1和endA1 的(de)突變(bian)有利於(yu)克隆(long)DNA 的(de)穩(wen)定和高(gao)純(chun)度質(zhi)粒DNA的(de)提取(qu)。
MSU440 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*100以下(xia)是(shi)的(de)訂購(gou)信息(xi)儲(chu)存條(tiao)件(jian):-70℃凍(dong)存
操(cao)作方(fang)法(fa):
1. 取(qu)-80℃保(bao)存的(de)農桿菌(jun)感受(shou)態(tai)於(yu)室(shi)溫或(huo)手(shou)心(xin)片刻(ke)待(dai)其部分融(rong)化(hua),處(chu)於(yu)冰(bing)水(shui)混合狀(zhuang)態(tai)時(shi)插入(ru)冰(bing)中。
2.每(mei)100 μl感受(shou)態(tai)加(jia)入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒DNA(轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率較高(gao),*次使(shi)用前做預實驗(yan)確定所加(jia)質(zhi)粒的(de)量),用手(shou)管(guan)底混(hun)勻,依次於(yu)冰(bing)上(shang)靜置(zhi)5分鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分鐘(zhong)、37℃水(shui)浴(yu)5分鐘(zhong)、冰(bing)浴(yu)5分鐘(zhong)。
MSU440 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*1003. 加(jia)入(ru)700 μl無抗生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB液(ye)體培(pei)養基(ji),於(yu)28℃振(zhen)蕩(dang)培(pei)養2~3小(xiao)時。
4. 6000 rpm離心(xin)壹(yi)分鐘(zhong)收(shou)菌,留(liu)取100 μl左右(you)上(shang)清(qing)輕(qing)輕(qing)吹打(da)重懸菌塊(kuai)塗(tu)布於(yu)含相(xiang)應(ying)抗生(sheng)素(su)的(de)LB或YEB平(ping)板(ban)上(shang),倒(dao)置放(fang)於(yu)28℃培(pei)養箱培(pei)養2-3天(tian)
註(zhu)意(yi)事項
1. 加(jia)入(ru)質(zhi)粒時(shi)體積(ji)不應(ying)大於(yu)感受(shou)態(tai)體(ti)積(ji)的(de)1/10;質(zhi)粒不純(chun)或存在(zai)乙醇(chun)等有機物汙染,轉化(hua)效(xiao)率急劇下(xia)降(jiang);質(zhi)粒增(zeng)大壹(yi)倍(bei),轉化(hua)效(xiao)率下(xia)降(jiang)壹(yi)個(ge)數量級(ji)。
MSU440 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*1002. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒時(shi)應(ying)輕(qing)柔操(cao)作。轉(zhuan)化(hua)高(gao)濃(nong)度的(de)質(zhi)粒可相應(ying)減(jian)少(shao)終用於(yu)塗(tu)板(ban)的(de)菌量(liang)。
3. 平板(ban)上(shang)陽性克隆(long)密(mi)度過(guo)大時,由於(yu)營(ying)養不足,陽(yang)性克隆(long)生長變慢(man),菌落(luo)變小(xiao),為(wei)了(le)獲得(de)大的(de)菌落(luo),應(ying)減(jian)少(shao)質(zhi)粒用量。
4. 濃(nong)度不應(ying)高(gao)於(yu)25 μg/ml,過(guo)高(gao)的(de)濃(nong)度不利於(yu)農桿菌(jun)生長,會降(jiang)低其生長(chang)速(su)度和轉化(hua)效(xiao)率。本(ben)公司感受(shou)態(tai)計算轉化(hua)效(xiao)率時(shi)所用平板(ban)只(zhi)含有(you)50 μg/ml kan,若所用平板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則(ze)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率降(jiang)低到1/2。
5. 培(pei)養基(ji)中加(jia)入(ru)的(de)目的(de)是(shi)防(fang)止雜菌生(sheng)長、篩(shai)選(xuan)農桿菌(jun);根據(ju)所用菌株(zhu)抗性加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒篩(shai)選抗生(sheng)素(su)可防(fang)止Ti質(zhi)粒丟(diu)失,但(dan)Ti質(zhi)粒篩(shai)選抗生(sheng)素(su)不利於(yu)農桿菌(jun)的(de)轉基(ji)因操(cao)作,所以壹(yi)般培(pei)養農桿菌(jun)時不考慮(lv)這些(xie)抗生(sheng)素(su),Ti質(zhi)粒丟(diu)失的(de)概率(lv)極低(可以忽略)。
Kim-1 大(da)鼠腎(shen)損傷(shang)分子1 規格: 48T/96T
Renin 大鼠腎(shen)素 規格: 48T/96T
ADM 大鼠腎(shen)上(shang)腺髓質(zhi)素(su) 規格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎(shen)上(shang)腺素(su)能(neng)a1A受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎(shen)上(shang)腺素(su)能(neng)a1A受(shou)體(ti) 規格: 48T/96T
EPI 大鼠腎(shen)上(shang)腺素(su) 規格: 48T/96T
NT-4 大鼠神經營養因(yin)子4 規格: 48T/96T
NT-3 大鼠神經營養因(yin)子3 規格: 48T/96T
NSE 大鼠神經特異性烯醇(chun)化(hua)酶(mei) 規格: 48T/96T
NP-Y 大鼠神經肽Y 規格: 48T/96T
NGF 大鼠神經生長因子 規格: 48T/96T
GFAP 大鼠神經膠質(zhi)纖(xian)維(wei)酸性蛋白(bai) 規格: 48T/96T
ENA-78/CXCL5 大鼠上(shang)皮中性粒細(xi)胞(bao)活(huo)化(hua)肽78 規格: 48T/96T
PEDF 大鼠色素(su)上(shang)皮衍(yan)生因子 規格: 48T/96T
T3 大鼠*狀(zhuang)腺原(yuan)氨(an)酸(suan) 規格: 48T/96T
大鼠乳腺癌(ai)標(biao)誌物-CA153ELISA Kit,48T/96T 大鼠乳腺癌(ai)標(biao)誌物-CA153ELISA Kit,48T/96T 規格: 48T/96T
LF/LTF 大鼠乳鐵(tie)傳(chuan)遞(di)蛋白(bai)/乳鐵(tie)蛋白(bai) 規格: 48T/96T
LDH 大鼠乳酸(suan)脫氫酶(mei) 規格: 48T/96T
CACT 大鼠肉(rou)毒(du)堿脂酰(xian)轉移(yi)酶(mei) 規格: 48T/96T
β-CG 大鼠絨(rong)毛膜(mo)β 規格: 48T/96T
CG 大鼠絨(rong)毛膜(mo) 規格: 48T/96T
PAPP-A 大鼠相(xiang)關(guan)血(xue)漿(jiang)蛋白(bai)A 規格: 48T/96T
HSF1 大鼠熱(re)休(xiu)克因子1 規格: 48T/96T
HSP gp96 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)糖蛋白(bai)96 規格: 48T/96T
HSP-90 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)90 規格: 48T/96T
HSP-70 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)70 規格: 48T/96T
Hsp-60 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)60 規格: 48T/96T
HSP47 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)47 規格: 48T/96T
HSP-40 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)40 規格: 48T/96T
HSP-27 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)27 規格: 48T/96T
HSP-20 大鼠熱(re)休(xiu)克蛋白(bai)20 規格: 48T/96T
ALD 大鼠醛(quan)固(gu)酮 規格: 48T/96T
i-PTH 大鼠全(quan)段甲狀(zhuang)旁腺素(su) 規格: 48T/96T
NA 大鼠 規格: 48T/96T
FK 大鼠趨化(hua)因(yin)子 規格: 48T/96T
Hyp 大鼠羥(qiang) 規格: 48T/96T
Pro-ANP 大鼠前(qian)心(xin)鈉肽 規格: 48T/96T
Pro-ANP 大鼠前(qian)心(xin)鈉肽 規格: 48T/96T
MSU440 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)100ul*100 PSA 大(da)鼠前(qian)列(lie)腺特(te)異性抗原(yuan) 規格: 48T/96T
PAP 大鼠前(qian)列(lie)腺酸(suan)性磷酸酶(mei) 規格: 48T/96T
PGF 大鼠前(qian)列(lie)腺素(su)F 規格: 48T/96T