ArcticExpress（DE3）感受(shou)態細(xi)胞100ul*50

ArcticExpress(DE3)感受(shou)態細(xi)胞100ul*50以(yi)下(xia)是(shi)的(de)訂(ding)購信息儲存(cun)條(tiao)件：-70℃凍存(cun)
操作(zuo)方(fang)法(fa):
1. 取-80℃保(bao)存(cun)的(de)農桿菌(jun)感受(shou)態於(yu)室溫(wen)或(huo)手心片刻(ke)待其部(bu)分(fen)融(rong)化(hua)，處於(yu)冰水(shui)混(hun)合狀(zhuang)態時(shi)插(cha)入冰中(zhong)。
2.每100 μl感受(shou)態加入0.01-1 μg質(zhi)粒(li)DNA（轉(zhuan)化效(xiao)率較(jiao)高，*次使用(yong)前做(zuo)預(yu)實(shi)驗確定所(suo)加質(zhi)粒的(de)量），用(yong)手管底混勻(yun)，依(yi)次於(yu)冰上靜(jing)置(zhi)5分(fen)鐘、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴5分(fen)鐘、冰浴5分(fen)鐘。
ArcticExpress(DE3)感受(shou)態細(xi)胞100ul*503. 加(jia)入700 μl無(wu)抗生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，於(yu)28℃振蕩(dang)培(pei)養(yang)2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離(li)心(xin)壹(yi)分(fen)鐘收(shou)菌(jun)，留取100 μl左右上清(qing)輕(qing)輕吹打重懸菌(jun)塊塗布於(yu)含相應(ying)抗生(sheng)素的(de)LB或(huo)YEB平(ping)板(ban)上，倒(dao)置(zhi)放(fang)於(yu)28℃培(pei)養(yang)箱培(pei)養(yang)2-3天
註(zhu)意(yi)事(shi)項
1. 加入質(zhi)粒(li)時(shi)體(ti)積(ji)不(bu)應(ying)大(da)於(yu)感受(shou)態體積(ji)的(de)1/10；質(zhi)粒(li)不(bu)純或存在乙(yi)醇等(deng)有(you)機物汙染(ran)，轉(zhuan)化效(xiao)率急(ji)劇下降(jiang)；質粒增大(da)壹(yi)倍(bei)，轉(zhuan)化效(xiao)率下降壹(yi)個(ge)數量級(ji)。
ArcticExpress(DE3)感受(shou)態細(xi)胞100ul*502. 混(hun)入質(zhi)粒(li)時(shi)應(ying)輕(qing)柔操作(zuo)。轉(zhuan)化高濃(nong)度(du)的(de)質(zhi)粒(li)可(ke)相應減少(shao)終用(yong)於(yu)塗板(ban)的(de)菌(jun)量。
3. 平(ping)板(ban)上陽性(xing)克隆(long)密度過(guo)大(da)時(shi)，由(you)於(yu)營(ying)養(yang)不(bu)足(zu)，陽性克隆(long)生(sheng)長變(bian)慢，菌(jun)落變(bian)小，為(wei)了獲得大(da)的(de)菌(jun)落，應(ying)減少(shao)質粒(li)用(yong)量。
4. 濃(nong)度(du)不(bu)應(ying)高於(yu)25 μg/ml，過(guo)高的(de)濃(nong)度(du)不(bu)利(li)於(yu)農桿菌(jun)生長，會降(jiang)低(di)其生(sheng)長速(su)度(du)和轉(zhuan)化效(xiao)率。本公司感受(shou)態計算轉(zhuan)化效(xiao)率時(shi)所(suo)用(yong)平(ping)板(ban)只含有(you)50 μg/ml kan，若(ruo)所用(yong)平(ping)板(ban)含有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化效(xiao)率降低到1/2。
5. 培(pei)養(yang)基(ji)中加入的(de)目(mu)的(de)是(shi)防(fang)止雜(za)菌(jun)生長、篩(shai)選農桿菌(jun)；根據(ju)所用菌(jun)株抗(kang)性加(jia)入Ti質(zhi)粒(li)篩(shai)選抗(kang)生素可防(fang)止Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失，但Ti質(zhi)粒(li)篩(shai)選抗(kang)生素不利(li)於(yu)農桿菌(jun)的(de)轉(zhuan)基(ji)因操作(zuo)，所以(yi)壹(yi)般培(pei)養(yang)農桿菌(jun)時(shi)不(bu)考(kao)慮這些抗(kang)生素，Ti質粒(li)丟(diu)失的(de)概(gai)率極低(可以(yi)忽略(lve))。

保(bao)證質(zhi)量，靈(ling)敏性高、特(te)異性(xing)強(qiang)、重復(fu)性好(hao)等(deng)優點已經得到廣(guang)大(da)客(ke)戶(hu)的(de)認(ren)可(ke)，您(nin)可放心(xin)，且(qie)我司有(you)專門的(de)售(shou)後(hou)部門對您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟蹤(zong)。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠脫(tuo)氫表雄酮(tong)(DHEA)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家 大(da)鼠脫(tuo)氫表雄酮(tong)(DHEA)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價 

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