更新時(shi)間:2025-11-29
BW25113 感受態(tai)細胞(bao)100ul*50菌株(zhu)壹(yi)種常(chang)用(yong)於(yu)質粒(li)克(ke)隆的菌株(zhu)。其(qi)φ80lacZΔM15基(ji)因的產物可與pUC載體(ti)編碼(ma)的b-半(ban)乳(ru)糖(tang)苷(gan)酶氨(an)基端(duan)實現(xian)a互補,可用(yong)於藍白(bai)斑(ban)篩選。recA1和endA1 的突變(bian)有(you)利於(yu)克(ke)隆DNA 的穩(wen)定和高(gao)純(chun)度(du)質粒(li)DNA的提(ti)取(qu)。
BW25113 感受態(tai)細胞(bao)100ul*50以下(xia)是(shi)的訂(ding)購信(xin)息儲存條件:-70℃凍存
操作(zuo)方(fang)法:
1. 取(qu)-80℃保(bao)存(cun)的農桿菌感受態(tai)於室溫(wen)或手心(xin)片刻待(dai)其(qi)部(bu)分融(rong)化,處於(yu)冰水(shui)混(hun)合(he)狀(zhuang)態(tai)時(shi)插入冰(bing)中。
2.每100 μl感受態(tai)加(jia)入0.01-1 μg質粒(li)DNA(轉(zhuan)化效率(lv)較(jiao)高(gao),*次(ci)使(shi)用前(qian)做預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定所加(jia)質粒(li)的量(liang)),用(yong)手(shou)管(guan)底混(hun)勻(yun),依(yi)次於冰上(shang)靜(jing)置5分鐘、液氮5分(fen)鐘、37℃水(shui)浴(yu)5分鐘、冰浴(yu)5分鐘。
BW25113 感受態(tai)細胞(bao)100ul*503. 加(jia)入700 μl無(wu)抗生素的LB或YEB液體(ti)培(pei)養基(ji),於(yu)28℃振(zhen)蕩(dang)培(pei)養2~3小時(shi)。
4. 6000 rpm離心(xin)壹(yi)分鐘收菌,留取(qu)100 μl左(zuo)右(you)上(shang)清(qing)輕輕(qing)吹(chui)打(da)重懸菌塊塗布(bu)於含(han)相(xiang)應抗生素的LB或YEB平板(ban)上(shang),倒置放於(yu)28℃培(pei)養箱(xiang)培(pei)養2-3天(tian)
註(zhu)意(yi)事(shi)項
1. 加(jia)入質粒(li)時(shi)體(ti)積不應大(da)於感受態(tai)體(ti)積的1/10;質粒(li)不純或存在乙(yi)醇(chun)等有(you)機物汙染,轉(zhuan)化效率(lv)急(ji)劇下(xia)降;質粒(li)增(zeng)大(da)壹(yi)倍(bei),轉(zhuan)化效率(lv)下(xia)降壹(yi)個(ge)數量級(ji)。
BW25113 感受態(tai)細胞(bao)100ul*502. 混入質粒(li)時(shi)應輕柔操作(zuo)。轉(zhuan)化高(gao)濃(nong)度(du)的質粒(li)可(ke)相(xiang)應減(jian)少(shao)終用(yong)於(yu)塗(tu)板的菌量。
3. 平板(ban)上(shang)陽性克(ke)隆密度(du)過(guo)大(da)時(shi),由(you)於(yu)營(ying)養不足,陽(yang)性克(ke)隆生長(chang)變(bian)慢,菌落(luo)變(bian)小,為(wei)了(le)獲得大(da)的菌落(luo),應減(jian)少(shao)質粒(li)用(yong)量。
4. 濃(nong)度(du)不應高(gao)於(yu)25 μg/ml,過高(gao)的濃(nong)度(du)不利於(yu)農桿菌生長(chang),會降低其(qi)生長(chang)速度(du)和(he)轉(zhuan)化效率(lv)。本(ben)公司(si)感受態(tai)計(ji)算轉(zhuan)化效率(lv)時(shi)所用(yong)平(ping)板(ban)只含(han)有(you)50 μg/ml kan,若所(suo)用(yong)平(ping)板含有(you)20 μg/ml rif則轉(zhuan)化效率(lv)降低到1/2。
5. 培(pei)養基(ji)中(zhong)加(jia)入的目的是(shi)防止雜菌生長(chang)、篩選農桿菌;根據所(suo)用(yong)菌株(zhu)抗性加(jia)入Ti質粒(li)篩選抗生素可防止Ti質粒(li)丟(diu)失(shi),但(dan)Ti質粒(li)篩選抗生素不利於(yu)農桿菌的轉(zhuan)基(ji)因操作(zuo),所(suo)以壹(yi)般(ban)培(pei)養農桿菌時(shi)不考(kao)慮(lv)這些(xie)抗生素,Ti質粒(li)丟(diu)失(shi)的概(gai)率(lv)極(ji)低(可以(yi)忽略)。
復性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠脂蛋(dan)白磷(lin)脂(zhi)酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠脂蛋(dan)白磷(lin)脂(zhi)酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠內皮(pi)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(eNOS)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠內皮(pi)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(eNOS)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠內皮(pi)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(eNOS)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠誘(you)導(dao)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(iNOS)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA KIT 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠誘(you)導(dao)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(iNOS)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠誘(you)導(dao)型壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(iNOS)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(NOS)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(NOS)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠壹(yi)氧化氮合(he)成(cheng)酶(NOS)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠抗IVIgG抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat anti-IVIgG antibody ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠抗IVIgG抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠抗IVIgG抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠抗IgE受體(ti)抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat anti-IgE receptor antibody ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠抗IgE受體(ti)抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠抗IgE受體(ti)抗體(ti)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠胰島素原(yuan)(PI)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Proinsulin,PI ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠胰島素原(yuan)(PI)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠胰島素原(yuan)(PI)ELISA試劑(ji)盒報(bao)價(jia)
BW25113 感受態(tai)細胞(bao)100ul*50 大(da)鼠αL巖藻(zao)糖(tang)苷(gan)酶(AFU)ELISA試劑(ji)盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit 購(gou)買(mai)我公司(si)ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證質量(liang),靈敏(min)性高(gao)、特異性強(qiang)、重(zhong)復(fu)性好(hao)等優(you)點已(yi)經(jing)得到廣大(da)客戶的認(ren)可(ke),您(nin)可(ke)放(fang)心(xin),且我司有(you)專(zhuan)門(men)的售後部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進(jin)行(xing)全線(xian)跟(gen)蹤。 :規(gui)格(ge); 96T/48T 大(da)鼠αL巖藻(zao)糖(tang)苷(gan)酶(AFU)ELISA試劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠αL巖藻(zao)糖(tang)苷(gan)酶(AFU)EL