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BW25113 感受態細胞(bao)100ul*10是采(cai)用(yong)大(da)腸(chang)桿(gan)菌經特殊(shu)工(gong)藝(yi)處(chu)理得到的(de)感受態細胞(bao),可(ke)用(yong)於(yu)DNA 的(de)化(hua)學轉化(hua)。使用(yong)pUC19 質(zhi)粒(li)檢測(ce),轉化(hua)效(xiao)率(lv)可(ke)達(da)108個(ge)轉(zhuan)化子/μg質粒(li)DNA,-70℃保存3個(ge)月(yue)轉化效(xiao)率(lv)可(ke)保持(chi)在90%以上(shang)。
BW25113 感受態細胞(bao)100ul*10以(yi)下(xia)是的訂購信息儲存條件:-70℃凍(dong)存
操作方法:
1. 取(qu)-80℃保(bao)存的農桿(gan)菌感受態於室溫(wen)或(huo)手(shou)心(xin)片(pian)刻(ke)待(dai)其部(bu)分(fen)融(rong)化,處(chu)於(yu)冰水(shui)混(hun)合狀態時(shi)插(cha)入冰中(zhong)。
2.每100 μl感受態加(jia)入0.01-1 μg質粒(li)DNA(轉化(hua)效(xiao)率(lv)較(jiao)高(gao),*次(ci)使用(yong)前(qian)做(zuo)預(yu)實驗(yan)確定(ding)所(suo)加(jia)質(zhi)粒(li)的量(liang)),用(yong)手(shou)管(guan)底混(hun)勻,依(yi)次(ci)於冰上(shang)靜置(zhi)5分(fen)鐘(zhong)、液(ye)氮(dan)5分(fen)鐘(zhong)、37℃水(shui)浴5分(fen)鐘(zhong)、冰浴5分(fen)鐘(zhong)。
BW25113 感受態細胞(bao)100ul*103. 加(jia)入700 μl無抗(kang)生(sheng)素的LB或(huo)YEB液(ye)體(ti)培養基(ji),於28℃振(zhen)蕩(dang)培養2~3小(xiao)時(shi)。
4. 6000 rpm離(li)心壹分(fen)鐘(zhong)收(shou)菌,留取(qu)100 μl左(zuo)右(you)上(shang)清輕(qing)輕(qing)吹打重懸菌塊塗布(bu)於含(han)相應(ying)抗(kang)生(sheng)素的LB或(huo)YEB平(ping)板(ban)上(shang),倒置(zhi)放於28℃培養箱(xiang)培養2-3天(tian)
註(zhu)意事(shi)項
1. 加(jia)入質粒(li)時(shi)體(ti)積(ji)不應大(da)於(yu)感受態體積(ji)的1/10;質粒(li)不純或(huo)存在乙醇等有機物(wu)汙染(ran),轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)急劇(ju)下(xia)降;質(zhi)粒(li)增(zeng)大(da)壹倍,轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)下降壹個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)。
BW25113 感受態細胞(bao)100ul*102. 混(hun)入質粒(li)時(shi)應(ying)輕(qing)柔操作。轉化高濃(nong)度的質(zhi)粒(li)可(ke)相應減少終(zhong)用(yong)於(yu)塗板(ban)的菌量(liang)。
3. 平(ping)板(ban)上(shang)陽性克隆密度過大(da)時(shi),由於(yu)營養不足,陽性克隆生(sheng)長(chang)變(bian)慢(man),菌落(luo)變(bian)小(xiao),為(wei)了獲得大(da)的(de)菌落(luo),應(ying)減(jian)少(shao)質粒(li)用(yong)量(liang)。
4. 濃(nong)度不應高於25 μg/ml,過高(gao)的(de)濃(nong)度不利於農桿(gan)菌生(sheng)長(chang),會(hui)降低其生(sheng)長(chang)速(su)度和轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。本公司感受態計算(suan)轉(zhuan)化效(xiao)率(lv)時(shi)所(suo)用(yong)平(ping)板(ban)只含(han)有50 μg/ml kan,若(ruo)所(suo)用(yong)平(ping)板(ban)含(han)有20 μg/ml rif則轉化效(xiao)率(lv)降低到1/2。
5. 培養基(ji)中加(jia)入的目的(de)是防(fang)止雜(za)菌生(sheng)長(chang)、篩(shai)選(xuan)農桿(gan)菌;根據所(suo)用(yong)菌株(zhu)抗(kang)性加(jia)入Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素可(ke)防(fang)止Ti質(zhi)粒(li)丟(diu)失,但(dan)Ti質粒(li)篩選(xuan)抗(kang)生(sheng)素不利於農桿(gan)菌的轉基(ji)因操作,所(suo)以壹般(ban)培養農(nong)桿(gan)菌時(shi)不考(kao)慮(lv)這(zhe)些(xie)抗(kang)生(sheng)素,Ti質粒(li)丟(diu)失的(de)概率(lv)極(ji)低(可(ke)以忽略)。
大(da)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(TPO)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(TPO)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)甲狀(zhuang)腺過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(TPO)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)血管活性(xing)腸(chang)肽(VIP)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Vasoactive Intestinal Peptide,VIP ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)血管活性(xing)腸(chang)肽(VIP)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)血管活性(xing)腸(chang)肽(VIP)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)P物(wu)質(SP)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Substance P,SP ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)P物(wu)質(SP)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)P物(wu)質(SP)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)P物(wu)質受(shou)體(SP-R)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat substance P receptor,SP-R ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)P物(wu)質受(shou)體(SP-R)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)P物(wu)質受(shou)體(SP-R)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)5羥色(se)胺(an)(5-HT)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)5羥色(se)胺(an)(5-HT)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)5羥色(se)胺(an)(5-HT)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁酸(GABA)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁酸(GABA)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁酸(GABA)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)乙酰受體抗(kang)體(AChRab)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)乙酰受體抗(kang)體(AChRab)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)乙酰受體抗(kang)體(AChRab)ELISA試劑盒報(bao)價
大(da)鼠(shu)丙酮(tong)酸激酶M2型同工(gong)酶(mei)(M2-PK)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)丙酮(tong)酸激酶M2型同工(gong)酶(mei)(M2-PK)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)丙酮(tong)酸激酶M2型同工(gong)酶(mei)(M2-PK)ELISA試劑盒報(bao)價
BW25113 感受態細胞(bao)100ul*10大(da)鼠(shu)半(ban)蛋白酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑/胱(guang)抑(yi)素C(Cys-C)ELISA試劑盒 :英(ying)文名稱(cheng); Rat Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 購買我(wo)公司ELISA試劑盒保證(zheng)質量(liang),靈敏(min)性(xing)高、特(te)異(yi)性(xing)強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian)已(yi)經(jing)得(de)到廣大(da)客(ke)戶(hu)的認(ren)可(ke),您可(ke)放心,且我(wo)司有專門(men)的(de)售(shou)後部(bu)門對(dui)您進行全(quan)線跟(gen)蹤。
異(yi)性強、重復性(xing)好(hao)等優(you)點(dian) :英(ying)文名稱(cheng);