TG1 電(dian)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*5

TG1 電(dian)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*5操作(zuo)方(fang)法（以(yi)下操作(zuo)均(jun)按(an)無菌(jun)條件(jian)的標準(zhun)進行）
1 取(qu)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)置(zhi)於(yu)冰(bing)浴中，如需(xu)分(fen)裝可(ke)將剛融化(hua)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液分(fen)裝到(dao)無菌(jun)預(yu)冷(leng)的(de)離(li)心(xin)管中，置於(yu)冰(bing)浴中。
TG1 電(dian)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*5●  壹(yi)次轉化(hua)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)的(de)建(jian)議(yi)用量為(wei)50-100 μl，可(ke)以根據實際情況分(fen)裝使(shi)用。應註意所用DNA 體積不(bu)要(yao)超過(guo)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液體積的十(shi)分(fen)之(zhi)壹(yi)。
以(yi)下(xia)實(shi)驗以(yi)100 μl感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)為(wei)例(li)。
2 向感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液中加入目的DNA（100 μl 的感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)能(neng)夠(gou)被1 ng 超螺(luo)旋質粒DNA 所飽(bao)和），輕(qing)輕(qing)旋轉離(li)心(xin)管以混(hun)勻內容物(wu)，在(zai)冰(bing)浴中靜置30 分(fen)鐘(zhong)。
3 將(jiang)離(li)心(xin)管置於(yu)42℃水(shui)浴(yu)中放置60-90 秒(miao)，然(ran)後(hou)快(kuai)速(su)將管轉移(yi)到(dao)冰(bing)浴中，使細(xi)胞(bao)冷(leng)卻(que)2-3 分(fen)鐘(zhong)，該(gai)過(guo)程不(bu)要(yao)搖動離(li)心(xin)管。
4 向每(mei)個(ge)離(li)心(xin)管中加入900 μl 無菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培養(yang)基（不(bu)含抗(kang)生素）， 混(hun)勻(yun)後(hou)置(zhi)於(yu)37℃搖床振蕩(dang)培養(yang)1 小時(shi)（160-220 轉/分(fen)鐘(zhong)），目的是使(shi)質粒上(shang)相關(guan)的(de)抗(kang)性(xing)標記基(ji)因(yin)表(biao)達(da)，使菌(jun)體復蘇。
TG1 電(dian)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*55 將(jiang)離(li)心(xin)管內容物(wu)混(hun)勻，吸取100 μl 已轉化(hua)的感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)加到含相應抗生素的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體瓊脂(zhi)培養(yang)基上(shang)，用無菌(jun)的(de)彎(wan)頭(tou)玻棒(bang)輕(qing)輕(qing)的將(jiang)細(xi)胞(bao)均(jun)勻(yun)塗開(kai)。將(jiang)平(ping)板(ban)置(zhi)於(yu)室(shi)溫(wen)直(zhi)至液體被吸收(shou)，倒置(zhi)平(ping)板，37℃培養(yang)12-16 小時(shi)。
●  塗(tu)布用量可(ke)根據具(ju)體實驗來調整。如(ru)轉化(hua)的DNA 總量(liang)較多，可(ke)取更(geng)少(shao)量(liang)轉化(hua)產物(wu)塗(tu)布平板；反(fan)之(zhi)，如(ru)轉化(hua)的DNA 總量(liang)較少(shao)，可(ke)取200-300 μl 轉化(hua)產物(wu)塗(tu)布平板。如果預(yu)計的克隆(long)較少(shao)，可(ke)通過(guo)離(li)心(xin)（4,000 rpm, 2分(fen)鐘(zhong)）後(hou)吸(xi)除(chu)部(bu)分(fen)培養(yang)液，懸浮菌(jun)體後(hou)將(jiang)其(qi)塗(tu)布於(yu)壹(yi)個(ge)平板(ban)中。（塗布剩余(yu)的(de)菌(jun)液可(ke)置於(yu)4℃保(bao)存(cun)，如果次日(ri)的轉化(hua)菌(jun)落(luo)數(shu)過(guo)少(shao)可(ke)以將剩下的(de)菌(jun)液再塗(tu)布新(xin)的培養(yang)板）
註意事(shi)項
1. 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)應保存(cun)在 -70℃，不(bu)可(ke)多次凍(dong)融和(he)放(fang)置(zhi)時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)，以(yi)避免降低(di)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)的(de)轉化(hua)效率。
2. 進行轉化(hua)操作(zuo)時(shi)，應根據相應溫(wen)度(du)及無菌(jun)條件(jian)的要求進行。
3 為(wei)防止(zhi)轉化(hua)實驗不(bu)成功(gong)，可(ke)以保留(liu)部(bu)分(fen)連(lian)接反(fan)應液，以重新轉化(hua)，將損失降到低(di)。
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 大(da)鼠(shu)P53(P53)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng); Rat p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 購(gou)買我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈敏性(xing)高、特異性(xing)強、重復性(xing)好等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心(xin)，且(qie)我司有專門(men)的(de)售(shou)後(hou)部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全(quan)線(xian)跟蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)P53(P53)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)P53(P53)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價(jia) 

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 大(da)鼠(shu)CXC趨化(hua)因子(zi)配(pei)體16(CXCL16)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng); Rat CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit 購(gou)買我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈敏性(xing)高、特異性(xing)強、重復性(xing)好等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心(xin)，且(qie)我司有專門(men)的(de)售(shou)後(hou)部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全(quan)線(xian)跟蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)CXC趨化(hua)因子(zi)配(pei)體16(CXCL16)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)CXC趨化(hua)因子(zi)配(pei)體16(CXCL16)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價(jia) 

TG1 電(dian)感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao)50ul*5 大(da)鼠(shu)血小(xiao)板衍生生長因(yin)子(zi)BB(PDGF-BB)ELISA試(shi)劑(ji)盒 :英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng);   Rat platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit 購(gou)買我公司ELISA試(shi)劑(ji)盒保(bao)證(zheng)質量(liang)，靈敏性(xing)高、特異性(xing)強、重復性(xing)好等優點(dian)已經(jing)得(de)到(dao)廣(guang)大(da)客(ke)戶的(de)認(ren)可(ke)，您可(ke)放心(xin)，且(qie)我司有專門(men)的(de)售(shou)後(hou)部(bu)門(men)對(dui)您(nin)進行全(quan)線(xian)跟蹤。 :規(gui)格; 96T/48T 大(da)鼠(shu)血小(xiao)板衍生生長因(yin)子(zi)BB(PDGF-BB)ELISA試(shi)劑(ji)盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)血小(xiao)板衍生生長因(yin)子(zi)BB(PDGF-BB)ELISA試(shi)劑(ji)盒報(bao)價(jia) 

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