更新時間:2025-11-29
TG1 電感(gan)受態細(xi)胞(bao)50ul*20菌(jun)株壹(yi)種(zhong)常用(yong)於質(zhi)粒(li)克隆的(de)菌(jun)株。其φ80lacZΔM15基因的(de)產(chan)物可與pUC載體(ti)編(bian)碼(ma)的(de)b-半(ban)乳糖(tang)苷(gan)酶氨(an)基端(duan)實現(xian)a互(hu)補,可(ke)用(yong)於藍白(bai)斑(ban)篩選(xuan)。recA1和(he)endA1 的(de)突(tu)變(bian)有利於(yu)克隆DNA 的(de)穩定(ding)和(he)高純(chun)度質(zhi)粒(li)DNA的(de)提(ti)取。
TG1 電感(gan)受態細(xi)胞(bao)50ul*20操作(zuo)方法(以下(xia)操(cao)作(zuo)均(jun)按無菌(jun)條件(jian)的(de)標(biao)準進行(xing))
1 取感(gan)受態細(xi)胞(bao)置於冰(bing)浴(yu)中,如需(xu)分(fen)裝可(ke)將(jiang)剛(gang)融(rong)化細胞懸(xuan)液分(fen)裝到(dao)無菌(jun)預冷(leng)的(de)離(li)心(xin)管中,置於(yu)冰(bing)浴(yu)中。
TG1 電感(gan)受態細(xi)胞(bao)50ul*20● 壹次(ci)轉化感(gan)受態細(xi)胞(bao)的(de)建(jian)議用(yong)量為50-100 μl,可(ke)以根(gen)據(ju)實際情況(kuang)分(fen)裝使用(yong)。應註(zhu)意所用(yong)DNA 體(ti)積不(bu)要(yao)超(chao)過感(gan)受態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液體(ti)積的(de)十(shi)分(fen)之(zhi)壹(yi)。
以下(xia)實(shi)驗(yan)以100 μl感(gan)受態細(xi)胞(bao)為例。
2 向感(gan)受態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液中加(jia)入目(mu)的(de)DNA(100 μl 的(de)感(gan)受態細(xi)胞(bao)能夠被1 ng 超(chao)螺旋質粒(li)DNA 所(suo)飽和),輕(qing)輕(qing)旋(xuan)轉離心(xin)管以混(hun)勻(yun)內(nei)容物,在(zai)冰(bing)浴(yu)中靜置30 分(fen)鐘。
3 將(jiang)離(li)心(xin)管置(zhi)於(yu)42℃水浴中放置(zhi)60-90 秒,然後(hou)快速(su)將(jiang)管轉移到(dao)冰(bing)浴(yu)中,使細胞(bao)冷卻(que)2-3 分(fen)鐘,該(gai)過程(cheng)不(bu)要(yao)搖(yao)動(dong)離心(xin)管。
4 向(xiang)每(mei)個(ge)離(li)心(xin)管中加(jia)入900 μl 無(wu)菌(jun)的(de)SOC 或(huo)LB 培(pei)養基(不(bu)含(han)抗(kang)生素), 混(hun)勻(yun)後(hou)置於37℃搖(yao)床(chuang)振蕩培(pei)養1 小時(160-220 轉/分(fen)鐘),目(mu)的(de)是(shi)使質粒(li)上(shang)相關(guan)的(de)抗(kang)性標(biao)記(ji)基因表達,使菌(jun)體(ti)復(fu)蘇(su)。
TG1 電感(gan)受態細(xi)胞(bao)50ul*205 將(jiang)離(li)心(xin)管內(nei)容物混勻(yun),吸(xi)取100 μl 已(yi)轉化的(de)感(gan)受態細(xi)胞(bao)加(jia)到(dao)含(han)相應(ying)抗(kang)生素的(de)SOB 或(huo)LB 固(gu)體(ti)瓊(qiong)脂培(pei)養基上(shang),用(yong)無菌(jun)的(de)彎頭(tou)玻(bo)棒輕(qing)輕(qing)的(de)將(jiang)細(xi)胞(bao)均(jun)勻(yun)塗(tu)開。將(jiang)平(ping)板置於室溫直(zhi)至(zhi)液體(ti)被吸收(shou),倒(dao)置平(ping)板,37℃培(pei)養12-16 小時。
● 塗布(bu)用(yong)量可(ke)根(gen)據具(ju)體(ti)實(shi)驗(yan)來調整(zheng)。如轉化的(de)DNA 總(zong)量較多(duo),可取更少量轉化產(chan)物塗布平(ping)板;反之,如(ru)轉化的(de)DNA 總(zong)量較少,可取(qu)200-300 μl 轉化產(chan)物塗布平(ping)板。如果預計的(de)克隆較少,可通(tong)過離(li)心(xin)(4,000 rpm, 2分(fen)鐘)後(hou)吸除部(bu)分(fen)培(pei)養液,懸(xuan)浮菌(jun)體(ti)後(hou)將(jiang)其塗布於壹(yi)個(ge)平(ping)板中。(塗布(bu)剩余(yu)的(de)菌(jun)液可置(zhi)於4℃保(bao)存,如果次(ci)日(ri)的(de)轉化菌(jun)落數(shu)過少可以將(jiang)剩(sheng)下(xia)的(de)菌(jun)液再塗布新的(de)培(pei)養板)
註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1. 感(gan)受態細(xi)胞(bao)應保存(cun)在(zai) -70℃,不(bu)可(ke)多(duo)次(ci)凍融(rong)和放置時間過長(chang),以避免(mian)降(jiang)低感(gan)受態細(xi)胞(bao)的(de)轉化效(xiao)率。
2. 進行(xing)轉化操(cao)作(zuo)時,應根(gen)據相應(ying)溫度及(ji)無菌(jun)條件(jian)的(de)要(yao)求進行(xing)。
3 為防(fang)止轉化實(shi)驗(yan)不(bu)成(cheng)功,可以保(bao)留(liu)部(bu)分(fen)連(lian)接(jie)反應液,以重(zhong)新轉化,將(jiang)損(sun)失(shi)降(jiang)到低。
以下(xia)是(shi)的(de)相關(guan)產(chan)品:
家(jia) 大(da)鼠(shu)6酮(tong)前列腺(xian)素(6-K-PG)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)腦腸肽(tai)(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)腦腸肽(tai)(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)腦腸肽(tai)(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)膽(dan)囊收縮(suo)素/腸(chang)促(cu)肽(tai)(CCK)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat Cholecystokinin,CCK ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)膽(dan)囊收縮(suo)素/腸(chang)促(cu)肽(tai)(CCK)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)膽(dan)囊收縮(suo)素/腸(chang)促(cu)肽(tai)(CCK)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)胰高(gao)血(xue)糖(tang)素樣肽(tai)1(Glp-1)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)胰高(gao)血(xue)糖(tang)素樣肽(tai)1(Glp-1)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)胰高(gao)血(xue)糖(tang)素樣肽(tai)1(Glp-1)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅱ類(lei)(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅱ類(lei)(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅱ類(lei)(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅲ類(lei)(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅲ類(lei)(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容性復(fu)合(he)體(ti)Ⅲ類(lei)(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性(xing)血小板內皮細(xi)胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子(zi)1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性(xing)血小板內皮細(xi)胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子(zi)1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒廠(chang)家(jia) 大(da)鼠(shu)可(ke)溶(rong)性(xing)血小板內皮細(xi)胞(bao)粘(zhan)附(fu)分(fen)子(zi)1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒報(bao)價(jia)
TG1 電感(gan)受態細(xi)胞(bao)50ul*20 大(da)鼠(shu)幹擾(rao)素誘(you)導蛋白(bai)10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 :英(ying)文名(ming)稱; Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒保(bao)證質量(liang),靈(ling)敏性(xing)高、特異(yi)性(xing)強、重復(fu)性好等(deng)優(you)點已(yi)經得到廣(guang)大(da)客戶(hu)的(de)認(ren)可,您(nin)可放心(xin),且(qie)我(wo)司有專門的(de)售(shou)後部門對(dui)您(nin)進行(xing)全(quan)線(xian)跟(gen)蹤(zong)。 :規格(ge); 96T/48T 大(da)鼠(shu)幹擾(rao)素誘(you)導蛋白(bai) 購(gou)買我(wo)公司ELISA試劑盒