DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*20

 DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*20操(cao)作方法(fa)（以下操(cao)作均(jun)按(an)無菌(jun)條(tiao)件(jian)的標(biao)準(zhun)進行(xing)）
1 取(qu)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)置於(yu)冰(bing)浴中(zhong)，如(ru)需分(fen)裝可(ke)將剛(gang)融化(hua)細胞(bao)懸(xuan)液分(fen)裝到(dao)無菌(jun)預(yu)冷的離(li)心管(guan)中(zhong)，置於(yu)冰(bing)浴中(zhong)。
●  壹(yi)次(ci)轉化(hua)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)的(de)建議(yi)用量為(wei)50-100 μl，可(ke)以根據實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)分(fen)裝使(shi)用。應註意(yi)所用DNA 體積不要超(chao)過(guo)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液體積的十分(fen)之(zhi)壹。
以下實(shi)驗(yan)以100 μl感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)為(wei)例(li)。
2 向感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)懸(xuan)液中加(jia)入(ru)目的(de)DNA（100 μl 的(de)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)能(neng)夠被(bei)1 ng 超(chao)螺旋質粒(li)DNA 所飽(bao)和），輕輕旋轉離(li)心管(guan)以混(hun)勻(yun)內容物，在冰(bing)浴中(zhong)靜置30 分(fen)鐘。
3 將離(li)心管(guan)置於(yu)42℃水浴中(zhong)放置60-90 秒(miao)，然(ran)後(hou)快速(su)將管轉移到(dao)冰(bing)浴中(zhong)，使(shi)細(xi)胞(bao)冷卻(que)2-3 分(fen)鐘，該(gai)過(guo)程不要搖(yao)動離(li)心管(guan)。
4 向每(mei)個離(li)心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)900 μl 無菌(jun)的(de)SOC 或LB 培(pei)養(yang)基(ji)（不含抗(kang)生(sheng)素(su)）， 混(hun)勻(yun)後(hou)置於(yu)37℃搖床(chuang)振蕩培(pei)養(yang)1 小(xiao)時（160-220 轉/分(fen)鐘），目(mu)的是(shi)使質粒上相(xiang)關(guan)的(de)抗(kang)性(xing)標(biao)記基(ji)因(yin)表達(da)，使(shi)菌(jun)體復蘇。
5 將離(li)心管(guan)內容物混(hun)勻(yun)，吸(xi)取(qu)100 μl 已(yi)轉(zhuan)化(hua)的感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)加(jia)到(dao)含相(xiang)應抗(kang)生(sheng)素(su)的SOB 或LB 固體瓊脂(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)上，用無菌(jun)的(de)彎頭玻(bo)棒輕輕的將細胞(bao)均(jun)勻(yun)塗開(kai)。將平板置於(yu)室(shi)溫(wen)直(zhi)至液(ye)體被(bei)吸(xi)收(shou)，倒(dao)置平板，37℃培(pei)養(yang)12-16 小(xiao)時。
●  塗布(bu)用量可(ke)根據具(ju)體實驗(yan)來(lai)調(tiao)整(zheng)。如(ru)轉化(hua)的DNA 總(zong)量較多，可(ke)取(qu)更(geng)少(shao)量(liang)轉(zhuan)化產物塗布(bu)平板；反(fan)之(zhi)，如(ru)轉化(hua)的DNA 總(zong)量較少，可(ke)取(qu)200-300 μl 轉(zhuan)化(hua)產(chan)物塗布(bu)平板。如(ru)果(guo)預計的(de)克(ke)隆(long)較少，可(ke)通(tong)過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分(fen)鐘）後(hou)吸(xi)除(chu)部分(fen)培(pei)養(yang)液(ye)，懸浮菌(jun)體後(hou)將其塗布於(yu)壹個平板中。（塗(tu)布剩余的菌(jun)液(ye)可(ke)置於(yu)4℃保存(cun)，如(ru)果(guo)次日(ri)的(de)轉化菌(jun)落(luo)數過(guo)少可(ke)以將剩下(xia)的(de)菌(jun)液(ye)再(zai)塗(tu)布新的(de)培(pei)養(yang)板）
 DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*20註意(yi)事(shi)項
1. 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)應保(bao)存(cun)在 -70℃，不可(ke)多次(ci)凍融和放置時間過(guo)長，以避免降(jiang)低(di)感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)的(de)轉化效(xiao)率(lv)。
2. 進行(xing)轉(zhuan)化(hua)操(cao)作時，應根(gen)據相(xiang)應溫(wen)度(du)及(ji)無(wu)菌(jun)條(tiao)件(jian)的要(yao)求(qiu)進行(xing)。
3 為(wei)防(fang)止轉(zhuan)化(hua)實驗(yan)不成功，可(ke)以保留部分(fen)連接反(fan)應液(ye)，以重新轉(zhuan)化，將損(sun)失(shi)降(jiang)到(dao)低(di)。
以下是(shi)  DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*20的(de)相(xiang)關(guan)產(chan)品：

hospho-Ack1  磷(lin)酸化Ack1抗(kang)體
phospho-AMPK alpha-1 磷(lin)酸化腺(xian)苷單磷(lin)酸活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)α1抗(kang)體
phospho-AMPK beta 1  磷(lin)酸化腺(xian)苷單磷(lin)酸活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)β1抗(kang)體
phospho-ALK  磷(lin)酸化間(jian)變(bian)型(xing)淋巴瘤激(ji)酶(mei)抗(kang)體
phospho-ATM 磷(lin)酸化毛細血(xue)管(guan)擴張(zhang)性(xing)共濟失(shi)調(tiao)癥(zheng)突變(bian)蛋(dan)白抗(kang)體
phospho-ATP citrate lyase  磷(lin)酸化三(san)磷(lin)酸腺(xian)檸(ning)檬(meng)酸裂解(jie)酶(mei)抗(kang)體
phospho-ATR  磷(lin)酸化ATR抗(kang)體
AMN1 細胞(bao)核重定位(wei)及(ji)紡(fang)錘(chui)體檢(jian)查點(dian)蛋(dan)白AMN1抗(kang)體
ALG11 天連(lian)接糖(tang)基(ji)化(hua)11抗(kang)體
ASF1A 細胞(bao)衰(shuai)老相(xiang)關(guan)蛋(dan)白ASF1A抗(kang)體
AGPHD1 氨(an)基(ji)糖(tang)苷類磷(lin)酸結構域(yu)蛋(dan)白抗(kang)體
ASGPR1 唾(tuo)液酸糖蛋(dan)白受(shou)體1抗(kang)體
ARSF 芳香(xiang)基(ji)硫酸酯(zhi)酶F抗(kang)體
AKAP5 A激(ji)酶(mei)錨(mao)定(ding)蛋(dan)白5抗(kang)體
ATXN3L 小腦脊(ji)髓(sui)共(gong)濟失(shi)調(tiao)蛋(dan)白3抗(kang)體
ASTE1 ASTE1蛋(dan)白抗(kang)體
phospho-APG4B 磷(lin)酸化自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4B抗(kang)體
AFAP 微(wei)絲相(xiang)關(guan)蛋(dan)白1抗(kang)體
ADORA1 腺(xian)苷A1A受(shou)體抗(kang)體
ARSB 芳基(ji)硫酸酯(zhi)酶B抗(kang)體
ABAT γ氨(an)基(ji)丁(ding)酸轉氨(an)酶抗(kang)體

細胞(bao)衰(shuai)老相(xiang)關(guan)蛋(dan)白ASF1A抗(kang)體 ATF-1 ELISA Kit 轉錄因子(zi)抗(kang)體-1(ATF-1)ELISA試劑盒
氨(an)基(ji)糖(tang)苷類磷(lin)酸結構域(yu)蛋(dan)白抗(kang)體 SOX5 ELISA Kit 轉錄因子(zi)SOX-5(SOX5)ELISA試劑盒
唾(tuo)液酸糖蛋(dan)白受(shou)體1抗(kang)體 SOX4 ELISA Kit 轉錄因子(zi)SOX-4(SOX4)ELISA試劑盒
芳香(xiang)基(ji)硫酸酯(zhi)酶F抗(kang)體 AP-1 ELISA Kit 轉錄因子(zi)1(AP-1)ELISA試劑盒
A激(ji)酶(mei)錨(mao)定(ding)蛋(dan)白5抗(kang)體 TTR ELISA Kit 轉甲(jia)狀腺(xian)素蛋(dan)白(TTR)ELISA試劑盒
小腦脊(ji)髓(sui)共(gong)濟失(shi)調(tiao)蛋(dan)白3抗(kang)體 TGFBI/BIGH3 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)-β誘(you)導蛋(dan)白IG-H3(TGFBI/BIGH3)ELISA試劑盒
ASTE1蛋(dan)白抗(kang)體 TGFBR3 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β受(shou)體3(TGFBR3)ELISA試劑盒
磷(lin)酸化自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4B抗(kang)體 TGF-βR2 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β受(shou)體2(TGF-βR2)ELISA試劑盒
微(wei)絲相(xiang)關(guan)蛋(dan)白1抗(kang)體 TGFβR2 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β受(shou)體2(TGFβR2)ELISA試劑盒
腺(xian)苷A1A受(shou)體抗(kang)體 TGFBR1 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β受(shou)體1(TGFBR1)ELISA試劑盒
芳基(ji)硫酸酯(zhi)酶B抗(kang)體 TGF-β3 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β3(TGF-β3)ELISA試劑盒
γ氨(an)基(ji)丁(ding)酸轉氨(an)酶抗(kang)體 TGFβ2 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
共濟失(shi)調(tiao)蛋(dan)白2結合(he)蛋(dan)白1抗(kang)體 TGF-β1 ELISA Kit 轉化(hua)生(sheng)長因子(zi)β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
腫瘤壞死因子α轉(zhuan)換(huan)酶(mei) TGF-α ELISA Kit 轉化(hua)生長(chang)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒
 DH5α 感(gan)受(shou)態細(xi)胞(bao)100ul*20芳香(xiang)烴(ting)受(shou)體核轉錄蛋(dan)白2抗(kang)體 TGM2 ELISA Kit 轉酶(mei)2C多(duo)肽(tai)(TGM2)ELISA試劑盒
AlkB同(tong)源(yuan)蛋(dan)白8抗(kang)體 MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit 主要(yao)組(zu)織(zhi)相(xiang)容性(xing)復(fu)合(he)體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒
ABI基(ji)因(yin)家族成員3結(jie)合(he)蛋(dan)白抗(kang)體 MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit 主要(yao)組(zu)織(zhi)相(xiang)容性(xing)復(fu)合(he)體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒
Rho GTP酶激(ji)活(huo)蛋(dan)白20抗(kang)體 MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit 主要(yao)組(zu)織(zhi)相(xiang)容性(xing)復(fu)合(he)體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒