制(zhi)川(chuan)烏(wu)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)*

儲(chu)存條件(jian)：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集、處(chu)理及(ji)保(bao)存方法
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不含熱原和內(nei)毒素(su)的試(shi)管，操(cao)作過(guo)程(cheng)中避免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液後，3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小(xiao)心地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉離(li)心(xin)30 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒和聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存：如果樣(yang)本(ben)收(shou)集後不及(ji)時(shi)檢測，請按壹次用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避免(mian)反(fan)復凍融，在(zai)室溫下解凍並(bing)確保(bao)樣品(pin)均勻地充(chong)分(fen)解凍。

特點(dian)：
1. 即開即用，用戶只(zhi)需(xu)要提供(gong)病(bing)毒樣(yang)品。
2. 根據(ju)地黃保(bao)守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的專壹性(xing)引(yin)物(wu)，與(yu)相關(guan)病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可(ke)以達到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹管(guan)式熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測，避免(mian)後續(xu)汙(wu)染。
5. 本(ben)試(shi)劑盒足夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只適用於(yu)科(ke)研(yan)，不能(neng)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方法：
壹、樣(yang)品采(cai)集：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品的采(cai)集與(yu)預(yu)培養(yang)按照(zhao)樣品的采(cai)集與(yu)預(yu)培養(yang)按照(zhao)《食品衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿菌(jun)檢驗(yan)要求進(jin)行。
2、血(xue)液樣(yang)品：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器(qi)抽(chou)取(qu)受(shou)檢者靜脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗(kang)凝管，立即混勻。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：取糞便置(zhi)於滅菌(jun)的收(shou)集管(guan)中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈部位(wei)樣品(pin)：取發病(bing)部位(wei)新鮮滲(shen)出物(wu)、粘液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度(du)為例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品濃度(du)非常高，因此下列(lie)稀(xi)釋(shi)操(cao)作壹定(ding)要在獨(du)立的區(qu)域進(jin)行，千萬(wan)不能(neng)汙(wu)染樣(yang)品或本(ben)試(shi)劑盒的其(qi)他成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加(jia)產(chan)品(pin)穩定性(xing)和避免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不提供(gong)活(huo)體樣(yang)品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只提供(gong)可(ke)以直接使(shi)用的 DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離(li)心(xin)管(guan)，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋(shi)液（用(yong)帶芯(xin)槍頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋(shi)所得)，充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)到 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復上面(mian)的操(cao)作直到得(de)到 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度(du)的陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述樣(yang)品(pin)建議(yi)經過增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集培(pei)養(yang)物(wu)用(yong)於檢(jian)測。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采(cai)用PCR試(shi)劑(ji)盒配(pei)備的DNA抽(chou)提液，按以下說明(ming)進(jin)行DNA核酸的粗(cu)提。也可(ke)采(cai)購上海(hai)澤葉(ye)生(sheng)物(wu)科(ke)技有限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產(chan)的DNA提取試(shi)劑(ji)盒(過(guo)柱(zhu)法-熒(ying)光配(pei)套)或其(qi)他合(he)適(shi)的商(shang)業(ye)化產(chan)品(pin)，並按照(zhao)相應試劑(ji)盒說明(ming)進(jin)行操(cao)作。
1、液體培(pei)養(yang)物(wu)：取(qu)液體培(pei)養(yang)物(wu)100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物(wu)：挑取單克隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：挑取米(mi)粒大小糞便於(yu)滅菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，加入0.5mL生(sheng)理(li)鹽水(shui)，振蕩混勻，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘，棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其(qi)他液體標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照(zhao)和陰性(xing)對照(zhao)為已(yi)經(jing)抽(chou)提好的核酸(無(wu)需(xu)提取)，直接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到反(fan)應體系(xi)中(zhong)即可(ke)。由(you)於陽(yang)性(xing)對照(zhao)濃度(du)較高，建議在樣品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域(yu)加入陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
小(xiao)鼠(shu)結締組(zu)織L細(xi)胞(bao)株929克隆(long);L-929 [L929]歐前(qian)胡(hu)素(su)（標(biao)準(zhun)品）Imperatorin質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品

ULBP1 Others Human 人(ren) ULBP1 / N2DL1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) α-蒎(pai)1α-pinene質量(liang)規(gui)格：GC≥97%，標(biao)準(zhun)品

人(ren)支(zhi)氣(qi)管上皮細(xi)胞(bao)裂(lie)解物(wu)HBEpiCLβ-蒎(pai)1（標(biao)準(zhun)品）β-pinene質量(liang)規(gui)格：HPLC≥99%，標(biao)準(zhun)品

IL23R Others Cymolgus 食(shi)蟹(xie)猴 IL23R / IL23 Receptor 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 七(qi)葉膽(dan)苷XVII(標(biao)準(zhun)品)Gypeside XVII質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品

人(ren)神(shen)經星(xing)形膠(jiao)質細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL（標(biao)準(zhun)品） Aescinate質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品
人(ren)胚肺(fei)成纖維(wei)細(xi)胞(bao);WI-38 [WI38]9-溴(xiu)蒽(>99.0%(GC)(HPLC))9-Bromoanthracene質量(liang)規(gui)格：>99.0%(GC)(HPLC)

HYOU1 Others Human 人(ren) HYOU1 / HSP12A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 2-溴(xiu)-9,10-二(er)苯(ben)基(ji)蒽(>95.0%(GC))2-Bromo-9,10-diphenylanthracene質量(liang)規(gui)格：>95.0%(GC)

肝(gan)動脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)1-溴(xiu)-4-正(zheng)辛基(ji)苯(ben)(>99.0%(GC)(T))trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid質量(liang)規(gui)格：>99.0%(GC)(T)

GPX7 Others Human 人(ren) GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 1-溴(xiu)-4-壬(ren)基(ji)苯(ben)(>95.0%(GC))1-Bromo-4-nylbenzene質量(liang)規(gui)格：>95.0%(GC)

大鼠表(biao)皮角(jiao)化細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL1-溴(xiu)-4-戊(wu)苯(ben)(>90.0%(GC))1-Bromo-4-pentylbenzene質量(liang)規(gui)格：>90.0%(GC)
MAP2K1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 去(qu)[5-(2-二(er)甲(jia)氨基(ji))乙基(ji)]地爾硫卓(zhuo)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國進(jin)口(kou)Des[5-(2-dimethylami)ethyl] Diltiazem

腸(chang)靜脈內皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)N,N-去(qu)二(er)甲基(ji)地爾硫卓(zhuo)鹽酸鹽質量(liang)規(gui)格：美(mei)國進(jin)口(kou)N,N-Didesmethyl Diltiazem

人(ren)少(shao)突(tu)膠(jiao)質細(xi)胞(bao) 人(ren)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)，SK-MES-1細(xi)胞(bao) P3X63Ag8.653(骨(gu)髓(sui)瘤細(xi)胞(bao))O-去(qu)乙酰(xian)-N-去(qu)甲(jia)基(ji)地爾硫卓(zhuo)質量(liang)規(gui)格：美(mei)國進(jin)口(kou)O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem

人(ren)結直腸(chang)腺癌細(xi)胞(bao);Caco-2N-去(qu)甲(jia)基(ji)地爾硫卓(zhuo)鹽酸鹽質量(liang)規(gui)格：美(mei)國進(jin)口(kou)N-Desmethyl Diltiazem

SERPINA11 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) SERPINA11 / Serpina11 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 去(qu)氧(yang)紫草(cao)素(su)(標(biao)準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標(biao)準(zhun)品Deoxyshikonin
制(zhi)川(chuan)烏(wu)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)*P388D1細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠(shu)樣(yang)瘤細(xi)胞(bao) 艱難(nan)梭(suo)菌(jun)Closidium difficile 非(fei)洲綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞(bao);BS-C-1對(dui)硝(xiao)基(ji)酚，英(ying)文名或英(ying)文縮(suo)寫(xie)：4-nitpxel，級(ji)別(bie)：BS，85%，規(gui)格：5克

CXCL16 Protein Rat 重(zhong)組(zu)大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽)(R)-(+)-1,1-聯(lian)-2-酚(fen) (R)-(+)-1,1'-Bi-2-ncphthol 18231-94-7

PC-3(人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 食(shi)蟹(xie)猴 FGFR3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢測過程(cheng)應嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本(ben)說明(ming)書要求分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行操(cao)作，各區實(shi)驗(yan)服(fu)、儀器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立使用(yong)，不能(neng)混用；實(shi)驗(yan)用吸(xi)頭采(cai)用帶濾芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)應配(pei)有生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)，樣(yang)本(ben)處(chu)理在(zai)生物(wu)安(an)全櫃(gui)中(zhong)進(jin)行操(cao)作；三個(ge)區應(ying)該(gai)配(pei)有紫(zi)外線(xian)殺菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降(jiang)解，樣本(ben)處(chu)理過(guo)程(cheng)應在(zai)0-4℃條(tiao)件(jian)下操(cao)作，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後立即上機檢(jian)測；樣本(ben)處(chu)理過(guo)程(cheng)中使(shi)用(yong)的器(qi)具耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過(guo)無(wu)核酶(mei)處(chu)理。

3. 每(mei)次實(shi)驗(yan)應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性(xing)對照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒所(suo)有試劑在使(shi)用前(qian)應該(gai)在(zai)常溫下充(chong)分(fen)融(rong)化混勻，並(bing)應瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒內(nei)所配(pei)陰性(xing)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)在壹次使用(yong)前應(ying)全部轉移(yi)至標(biao)本(ben)準(zhun)備區(qu)，並(bing)單獨存放。
6. 為(wei)防止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾，應避免(mian)裸(luo)手(shou)直接接(jie)觸PCR反(fan)應(ying)管，並(bing)應避免(mian)在(zai)PCR反(fan)應(ying)管上(shang)進(jin)行任何標(biao)記。
7. 儀(yi)器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照(zhao)本(ben)說明(ming)書相關(guan)要求進(jin)行設置(zhi)；不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置(zhi)中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過程(cheng)中產(chan)品(pin)的廢(fei)棄物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行無(wu)害(hai)化處(chu)理後方可(ke)丟棄(qi)。