A2780人(ren)卵巢(chao)癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例進行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進行長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用程序(xu)

降溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

壹、商品(pin)介(jie)紹：

二(er)、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解凍，加4 mL培養(yang)基混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含適量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過夜（或將細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不含鈣、鎂離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例分到新的含8 mL培養(yang)基的新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時，可進行細胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量加入(ru)無血清細胞(bao)凍存(cun)液，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管位置以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

BEL-7405(人(ren)肝癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)真(zhen)皮(pi)成(cheng)纖(xian)維母(mu)細胞(bao)-新生(sheng)HDF-n 大鼠(shu)腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因(yin)子(zi)γ(TNF-γ)ELISA試劑(ji)盒 human IgM (免(mian)疫(yi)親(qin)和(he)化(hua))人(ren)IgM 1mg

LRP： 肺耐(nai)藥(yao)相關(guan)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) CL-0049CA46(人(ren)Butts淋(lin)巴瘤(liu)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

FGFBP3 Protein Human 重(zhong)組人(ren) FGFBP3 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽(qian)) 大鼠(shu)腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因(yin)子(zi)β(TNF-β)ELISA試劑(ji)盒 Rabbit Anti-HRP 兔(tu)抗(kang)HRP 0.2ml

LRCH3： 富(fu)含亮酸重(zhong)復家(jia)庭(ting)蛋(dan)白3抗(kang)體(ti) VRK1 Others Human 人(ren) VRK1 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照)

大鼠(shu)肝星形(xing)細胞(bao)培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因(yin)子(zi)β(TNFβ)ELISA試劑(ji)盒 human IgG (親(qin)和(he)化(hua)) 人(ren)IgG 10mg

CT26.WT(小(xiao)鼠(shu)結腸癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0198RM-1(小(xiao)鼠(shu)前列腺癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)APP基因(yin)轉染CHO細胞(bao)株;7WD10 人(ren)可溶(rong)性蛋(dan)白185(sp185/HER-2)ELISA 試劑(ji)盒 ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3) 腺(xian)苷(gan)受(shou)體(ti)A3抗(kang)原 0.5mg

HDAC1： 組蛋(dan)白去乙(yi)酰化(hua)酶(mei)1抗(kang)體(ti) EB病毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋(lin)巴細胞(bao)(彜(yi)族(zu));KM934

PC-3M-2B4(人(ren)前列腺癌(ai)低轉移(yi)細胞(bao)株) 5×106cells/瓶×2 人(ren)可溶(rong)性白細胞(bao)抗(kang)原G(sHLA-G)ELISA試劑盒 Integrin alpha V 巨(ju)噬細胞(bao)來源(yuan)的趨化(hua)因(yin)子(zi)αV多(duo)肽(tai) 0.5mg

HAUS3： HAUS3蛋(dan)白抗(kang)體(ti) GKN1 Others Human 人(ren) GKN1 / Gasokine 1 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照)

大隱靜(jing)脈平(ping)滑肌細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml) 人(ren)可溶(rong)性白細胞(bao)分(fen)化(hua)抗(kang)原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒 phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 0酸化(hua)腺(xian)苷單(dan)0酸活化(hua)蛋(dan)白激酶(mei)α1抗(kang)原 1mg

A2780人(ren)卵巢(chao)癌(ai)細胞(bao)PRSS2： 絲酸蛋(dan)白酶(mei)2抗(kang)體(ti) A375細胞(bao)，人(ren)類(lei)惡性黑色素(su)瘤(liu) 人(ren)肺腺癌(ai)細胞(bao)(胸(xiong)膜滲出液),Calu-3細胞(bao) ACHN, 人(ren)腎(shen)細胞(bao)腺(xian)癌(ai)細胞(bao)

Spike Others Human coronavirus 人(ren) spike glycoprotein (aa 1-760) 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照) 大鼠(shu)角化(hua)細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)(KGF)ELISA試劑(ji)盒 Col II  大鼠(shu)Ⅱ型(xing)膠原 96T

PSMD10： 蛋(dan)白酶(mei)調(tiao)解因子(zi)10抗(kang)體(ti) CL-0363Hs68(人(ren)男(nan)性正常細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

Caco-2人(ren)結直腸腺癌(ai)細胞(bao) Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS 大鼠(shu)角化(hua)細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)(KGF)ELISA試劑(ji)盒 ARA(Human anti-gastric parietal cell antibody)  人(ren)抗(kang)網(wang)硬(ying)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) HA Others Influenza B 乙(yi)型(xing)流感 (B/Florida/4/2006) 血(xue)凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對照)

人(ren)惡性多(duo)發(fa)性畸(ji)胎瘤(liu)細胞(bao);ERA-2 大鼠(shu)角化(hua)細胞(bao)內分(fen)泌(mi)因子(zi)(KAF)/雙調(tiao)蛋(dan)白(AR)ELISA試劑(ji)盒 CH  (Mouse cholest) 小(xiao)鼠(shu)膽ELISA試(shi)劑(ji)盒 96T

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培養(yang)液是否有(you)漏液、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我們聯系。

2. 仔細閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清比例、所需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確(que)保細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件壹致，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹致而(er)導致細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈(lie)碰亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶壁將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件的培養(yang)基用於(yu)細胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照片(pian)，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我司(si)技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由於(yu)運輸(shu)的原因，個別(bie)敏(min)感細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情(qing)況，請及(ji)時和(he)我們聯系，告知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們的技術人(ren)員(yuan)跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用的培養(yang)基 (灌(guan)液培養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用來培養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用按照說(shuo)明書細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。