A3人(ren)T淋巴細胞白血(xue)病(bing)細胞

公(gong)司產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細胞使之脫(tuo)落，然後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細胞凍存：

1）細胞生長至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru)培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞使之脫(tuo)落，然後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放(fang)置於(yu)凍存管中(zhong)；

4）先將細胞凍存管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進行長期保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商(shang)品(pin)介紹：

二(er)、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍存處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含有1 mL細胞懸液(ye)的凍存管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養(yang)基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻。然後(hou)將所(suo)有細胞懸液(ye)加入(ru)含適量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過夜（或(huo)將細胞懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞密度。

2) 細胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使消化液(ye)浸潤所(suo)有細胞，將培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若細胞大部分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新的含8 mL培養(yang)基的新皿中或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行細胞凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞數量加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍存液(ye)，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管凍存1mL細胞懸液(ye)，註意(yi)凍存管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲存。記錄(lu)凍存管位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售的產(chan)品(pin)：

BHK-21 [C-13]倉鼠(shu)腎成(cheng)纖維(wei)細胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yang)基10%FBS 大鼠(shu)中(zhong)性(xing)鞘(qiao)0脂酶(NSMASE)ELISA試(shi)劑盒(he) Mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記小(xiao)鼠(shu)IgG(細胞流(liu)式(shi)同型(xing)對(dui)照(zhao)) 0.1ml

LHX2： 調(tiao)控(kong)胚(pei)胎幹細胞分化蛋白Lhx2抗(kang)體 IL11RA Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL11RA / IL11Rα 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)表皮(pi)角質細胞-新生HEK-n 大鼠(shu)中(zhong)性(xing)粒細胞趨(qu)化因(yin)子(zi)1(CINC-1)ELISA試(shi)劑盒(he) IgA whole serum 兔抗(kang)小(xiao)鼠(shu)IgA抗(kang)血(xue)清(qing) 1ml

LRRC2： LRRC2蛋白抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細胞;φ2

BNL 1ME A.7R.1(小(xiao)鼠(shu)肝上皮(pi)細胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)腸(chang)微血(xue)管內皮(pi)細胞HIMEC 大鼠(shu)中(zhong)性(xing)粒細胞趨(qu)化因(yin)子(zi)(CINC)ELISA試(shi)劑盒(he) Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記小(xiao)鼠(shu)IgG(細胞流(liu)式(shi)同型(xing)對(dui)照(zhao)) 0.1ml

HASMC細胞，人(ren)大動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細胞 小(xiao)鼠(shu)自發(fa)高(gao)癌細胞,TA2細胞 人(ren)虹膜(mo)色素上(shang)皮(pi)細胞cDNAHIPEpiC cDNA 人(ren)可溶(rong)性(xing)Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試(shi)劑盒(he) Cytochrome C (抗(kang)原) 0.5mg

HDAC6： 組蛋白去(qu)乙(yi)酰化酶6抗(kang)體 HA Others H13N8 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血(xue)凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

大鼠(shu)氣(qi)管上(shang)皮(pi)細胞;RTE 人(ren)可溶(rong)性(xing)CD163分子(zi)(sCD163) ELISA試(shi)劑盒(he) ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 能(neng)受體(ti)β3 0.5mg

phospho-HDAC6 (Ser22)： 0酸化組(zu)蛋白去(qu)乙(yi)酰化酶6抗(kang)體 人(ren)胚胎，皮(pi)膚(fu)，肌肉;M-20

DH82(犬巨(ju)噬(shi)細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人(ren)神經(jing)母細胞瘤(liu)細胞)5×106cells/瓶×2 中國(guo)倉鼠(shu)卵巢細胞;CTLA4 Ig-24 人(ren)顆(ke)粒(li)溶(rong)素(granulysin)ELISA 試(shi)劑盒(he) Cytomegalovirus (CMV)PP65 細胞巨化病(bing)毒(du)(多肽) 0.5mg

A3人(ren)T淋巴細胞白血(xue)病(bing)細胞GBC-SD 人(ren)膽囊(nang)癌細胞 大鼠(shu)膠(jiao)原酶I(Collagenase I)ELISA試(shi)劑盒(he) MCV(Human anti-myelin antibody IgA)  人(ren)抗(kang)突變型(xing)瓜(gua)酸波形(xing)蛋白抗(kang)體 K562細胞，慢性(xing)髓(sui)原白(bai)血(xue)病(bing) 人(ren)胚肺二(er)倍(bei)體(ti)細胞,HLF-02細胞 lovo, 人(ren)結(jie)腸(chang)癌細胞

NA Others H5N1 甲型(xing)流(liu)感(gan) H5N1 (A/Hubei/2011) 神經酶 (Neuraminidase / NA) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)膠(jiao)原酶I(Collagenase I)ELISA 試(shi)劑盒(he) AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA)  人(ren)抗(kang)髓(sui)0脂抗(kang)體 CL-0346HBE(人(ren)支(zhi)氣(qi)管上(shang)皮(pi)樣(yang)細胞)5×106cells/瓶×2

RKO人(ren)結(jie)腸(chang)腺癌(ai)細胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS 大鼠(shu)膠(jiao)原交聯(PYD)ELISA試(shi)劑盒(he) P I CP  大鼠(shu)Ⅰ型(xing)前(qian)膠(jiao)原羧(suo)基端肽 96T

PCDHB14： 原鈣(gai)粘(zhan)附(fu)蛋白β14抗(kang)體 HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血(xue)凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化的人(ren)B淋巴細胞;KMY0926 大鼠(shu)膠(jiao)原C末(mo)端肽(CTX)ELISA試(shi)劑盒(he) CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin) 小(xiao)鼠(shu)絨(rong)毛(mao)膜 96T

三、培養(yang)註意(yi)事項 

1. 收(shou)到細胞後(hou)首先觀察(cha)細胞瓶是否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說(shuo)明書，了解(jie)細胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞因子(zi)等，確(que)保細胞培養(yang)條件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培養(yang)條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由(you) 客(ke)戶自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀態(tai)。因(yin)運輸問(wen)題，部分細胞由於(yu)溫度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片(pian)，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化，懸浮細胞直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培養(yang)基重(zhong)懸 細胞，並(bing)接(jie)種到新的培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培養(yang)基用(yong)於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細胞照片(pian)，記錄(lu)細胞狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司技術部溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原因(yin)，個別(bie)敏(min)感(gan)細胞會出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告知(zhi)細胞 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技術人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解(jie)決。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細胞，請換用(yong)按(an)照說(shuo)明書細胞培 養(yang)條件(jian)新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞。     收(shou)到細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。