Ana-1小(xiao)鼠巨噬(shi)細胞

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科研研究使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床診斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止(zhi)消化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進行分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液終

止(zhi)消化，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並(bing)放置於(yu)凍存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行長期保(bao)存(cun)。使用(yong)程序

降(jiang)溫盒(he)可直接(jie)放入(ru)-80℃。

壹、商品介紹：

二(er)、細胞培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下細胞培(pei)養凍存處理(li)僅供(gong)參考(kao)，具體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖晃解凍，加4 mL培(pei)養基(ji)混合均勻。在1000 rpm條件(jian)下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶中(zhong)培(pei)養過夜（或將細胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培(pei)養過夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液並檢查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳代培養。

a、棄去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中(zhong)，使消化液浸潤所有(you)細胞，將培(pei)養瓶置於(yu)37℃培養箱中(zhong)消化1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞消化情況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲幾(ji)下培養瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞懸(xuan)液按1:2比例分到新(xin)的含8 mL培(pei)養基(ji)的新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存：待細胞生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行細胞凍存。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細胞及細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根據細胞數量(liang)加入(ru)無血清(qing)細胞凍存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意凍存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍存管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位置以(yi)便下次拿取。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售(shou)的產(chan)品：

人腦(nao)微(wei)血(xue)管(guan)內(nei)皮(pi)細胞HBMEC 大(da)鼠脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(FABP4)ELISA試劑(ji)盒(he) BSA/HRP 辣(la)根過氧(yang)化物酶標(biao)記(ji)血清(qing)白蛋白 0.1ml

LC3A/B： 自(zi)噬(shi)微(wei)管(guan)相(xiang)關(guan)蛋白輕鏈(lian)3A/3B抗體 小(xiao)鼠小(xiao)膠質細胞;BV2

Calu-6(人肺(fei)退(tui)行性癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人前(qian)列(lie)腺(xian)微(wei)血(xue)管(guan)內(nei)皮(pi)細胞HPrMEC 大(da)鼠脂肪酸轉運蛋白5(FATP5)ELISA試劑(ji)盒(he) Insulin/HRP 辣(la)根過氧(yang)化物酶標(biao)記(ji)人胰島(dao)素(su)蛋白 500ug

Gonadoliberin-1： 黃體(ti)激(ji)素釋(shi)放激(ji)素/釋(shi)放激(ji)素抗體 CL-0001293(人(ren)胚腎細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

FGF1 Protein Mouse 重組(zu)小(xiao)鼠(shu) / 大(da)鼠(shu) aFGF / FGF1 蛋白 大鼠(shu)脂肪酸去(qu)飽和(he)酶2(FADS2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Biotin/AP 堿(jian)性0酸(suan)酶標(biao)記(ji) 0.1ml

HLA-DR： HLA-DR抗體 HA Others H12N5 甲型流感(gan) H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照)

小鼠(shu)誘導(dao)性(xing)多(duo)潛(qian)能幹細胞;PUMC-mips-B2 人(ren)抗乙(yi)型肝炎病毒表面(mian)抗體(HBsAb)ELISA 試(shi)劑盒(he) AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基(ji)酰基(ji)消旋(xuan)酶抗原(yuan) 0.5mg

HLA G： 人類白細胞抗原(yuan)G抗體 人(ren)胚肺(fei)成(cheng)纖維細胞;MRC-5

Eca-109(人食(shi)管(guan)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0246YAC-1(小鼠(shu)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2 中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠肺(fei)細胞;V79 人(ren)抗乙(yi)型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA 試(shi)劑盒(he) GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質纖維酸性(xing)蛋白(抗原(yuan)) 0.5mg

HMGA2： 高遷(qian)移(yi)率族蛋白A2抗體 人(ren)臍靜脈內(nei)皮(pi)細胞;HUV-EC-C

Ana-1小鼠(shu)巨噬(shi)細胞PLCG 1： 0酯酶Cγ1抗體 SHG44細胞，膠質瘤(liu)細胞 人(ren)SV-40轉化肺(fei)成(cheng)纖維細胞,WI-38AV13細胞 膀(pang)胱成(cheng)纖維細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

CD302 Others Mouse 小鼠(shu) CD302 / CLEC13A 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)甲狀腺(xian)素受(shou)體α(THRα)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) ATGA/TGAB  大(da)鼠抗甲狀腺(xian)球(qiu)蛋白抗體 CL-0309TG-905(人(ren)腦(nao)膠質母細胞瘤(liu)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

HCT-8 [HRT-18]人回(hui)盲(mang)腸(chang)癌細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠甲狀腺(xian)素抗體(TAb)ELISA試(shi)劑盒(he) Amylin(Mouse Amylin)  小(xiao)鼠胰澱素 96T

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)： 0酸化血小(xiao)板源(yuan)性(xing)生長(chang)因(yin)子受(shou)體-B抗體 FLT4 Others Human 人(ren) VEGFR3 / FLT4 人細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照)

SV40T轉化的人胚(pei)腎細胞;293T 大(da)鼠甲狀腺(xian)素抗體(TAb)ELISA 試(shi)劑盒(he) Human anti-macrophage antibody  人(ren)抗巨噬(shi)細胞抗體 猞(she)猁(li)皮膚(fu)成(cheng)纖維樣細胞;ELS1

三、培(pei)養註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液是否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解細胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如(ru)細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等，確保(bao)細胞培(pei)養條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於培養條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細胞瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞狀態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒瓶壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的培養瓶或培養皿中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)進行培養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件(jian)的培養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照片，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定(ding)的情況(kuang)，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術人員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養細胞，請換(huan)用按(an)照說明(ming)書細胞培(pei) 養條件(jian)新配制(zhi)的培養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到細胞後(hou)第壹次傳代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。