ARPE-19人(ren)視網膜色素上(shang)皮細胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再輕輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然後按 1:2 比例進(jin)行分瓶傳(chuan)代，最後放入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然後將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置於凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存管放置於-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮中進(jin)行長期(qi)保存。使用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直接放入-80℃。

壹(yi)、商品介紹(shao)：

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻(yun)。然後將所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入含適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿中(zhong)，加入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使消(xiao)化液(ye)浸潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中(zhong)或者(zhe)瓶中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進行細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞(bao)數(shu)量加入無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管位(wei)置以便下(xia)次拿取(qu)。

公司(si)正在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品：

HEL人紅白細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao) HEL human erythroleukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)酸(suan)合(he)成(cheng)酶(mei)(FAS)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IgA/AP 堿性0酸(suan)酶(mei)標(biao)記(ji)兔抗人(ren)IgA 0.1ml

L3MBTL3： L3MBTL3蛋(dan)白(bai)抗體(ti) MARCO Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) MARCO 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照(zhao))

主動脈平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml) 大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)酸(suan)合(he)成(cheng)酶(mei)(FAS)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Protein A/AP 堿性0酸(suan)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)蛋(dan)白(bai)A 0.1ml

LRRC25： 富(fu)含亮酸(suan)重(zhong)復(fu)蛋(dan)白(bai)25抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao);Fox-NY

CEM/C1(人急(ji)性(xing)淋(lin)巴細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人髓核細胞(bao)HNPC 大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)甘(gan)油(you)三酯(zhi)酯酶(mei)(ATGL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Goat Anti-human IgA/Biotin 化羊(yang)抗人(ren)IgA 0.3ml

HOXc8： HOXc8抗體(ti) PANC-1, 人(ren)胰(yi)腺(xian)癌細胞(bao)

HUVE-12/CRL2480細胞(bao)，人(ren)臍靜脈內皮(pi)細胞(bao) 長臂猿淋(lin)巴瘤,MLA-144細胞(bao) 人(ren)真皮(pi)淋(lin)巴內皮細胞(bao)總RNAHDLEC NA 人抗鹽抵抗的(de)酸(suan)性(xing)0酸(suan)酶(mei)(AP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-3(抗原(yuan)) 0.5mg

HRAS： 原癌基因H-ras抗體(ti) HA Others H5N8 甲型流(liu)感(gan) H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照(zhao))

雜(za)交(jiao)瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 人抗血(xue)小(xiao)板抗體(ti)IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-7(抗原(yuan)) 0.5mg

HSP60： 熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)-60抗體(ti) 人(ren)胚(pei)胎肺成纖維(wei)細胞(bao);WI-38

ARPE-19人視網膜色素上(shang)皮細胞(bao)CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照(zhao)) 大(da)鼠甲狀腺(xian)球蛋(dan)白(bai)(TG)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 LTC4(Mouse Leukotriene C4)  小鼠白(bai)三烯(xi)C4 96T

Phospho-PAR4 (Thr163)： 0酸(suan)化蛋(dan)白(bai)酶(mei)活(huo)化受體4抗體(ti) CL-0301M-NFS-60 (小(xiao)鼠(shu)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao)G-CSF依(yi)賴(lai)性(xing))5×106cells/瓶×2

Hce-8693人盲(mang)腸腺(xian)癌細胞(bao)(未(wei)分化) Hce-8693 human colon adenocarcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠甲狀腺(xian)過(guo)氧(yang)化物酶(mei)(TPO)ELISA試(shi)劑(ji)盒 RBC(Human anti-red cell antibody)  人抗紅(hong)細胞(bao)抗體(ti) VCAM1 Others Human 人(ren) CD106 / VCAM1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照(zhao))

人胚(pei)腎細胞(bao);293FT 大(da)鼠甲狀腺(xian)過(guo)氧(yang)化物酶(mei)(TPO)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GnRH  大(da)鼠釋放激素 96T

Phospho-PBK (Thr9)： 0酸(suan)化PDZ連接激酶(mei)/T-LAK細胞(bao)源蛋(dan)白(bai)激酶(mei)抗體(ti) 犬(quan)源細胞(bao)

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首先觀察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細胞(bao)形態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹(yi)致，若由(you)於培(pei)養(yang)條件不壹(yi)致而(er)導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細胞(bao)狀(zhuang)態，便於和我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的(de)原因，個別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情況(kuang)，請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)，告知細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我們的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直至問(wen)題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不能再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。