ATDC5小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎瘤(liu)細胞

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並(bing)放置於凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使用程序(xu)

降溫(wen)盒(he)可直接(jie)放入(ru)-80℃。

壹、商品介(jie)紹(shao)：

二、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下細胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處理僅供(gong)參(can)考，具體操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡下觀察細胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速(su)拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶(ping)中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可進行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便下次拿取。

公司正在(zai)出(chu)售的(de)產品：

NCSTN Others Mouse 小鼠(shu) Nicasin / NCSTN 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)脂(zhi)多糖(tang)結合(he)蛋(dan)白(bai)(LBP)ELISA 試劑盒 Rb Anti-FITC/FITC 熒(ying)光(guang)素標記兔(tu)抗(kang)FITC 0.3ml

Lactic acid bacterial protein surface： 乳酸菌(jun)菌(jun)體表面(mian)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 大(da)鼠(shu)雪(xue)旺(wang)細胞;RSC96

R 1610倉鼠(shu)肺細胞 R 1610 hamster lung cells DMEM+10%FBS 大(da)鼠(shu)脂(zhi)多糖(tang)/內(nei)毒素(LPS)ELISA試劑盒 Streptavidin/RBITC 紅色(se)熒(ying)光(guang)素羅(luo)丹明(ming)標記鏈黴親和素(su) 0.3ml

Layilin： 透明(ming)質酸受體抗(kang)體 PCSK9 Others Mouse 小鼠(shu) PCSK9 / NARC1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

直結腸(chang)平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml) 大(da)鼠(shu)脂(zhi)多糖(tang)(LPS)ELISA試(shi)劑盒 Rabbit IgG/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標記兔(tu)IgG(細胞流(liu)式(shi)同(tong)型對(dui)照) 0.3ml

HSP90 beta： 熱休(xiu)克(ke)蛋(dan)白(bai)90β/HSP90 β 抗(kang)體 犬腎細(xi)胞;MDCK(NBL-2) 腎上(shang)腺皮質細胞，Y1細(xi)胞 RCFBF細(xi)胞，兔(tu)角膜前基質層成纖(xian)維(wei)細胞

GP1BB Others Rat 大(da)鼠(shu) GP1BB / CD42c 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 人(ren)抗(kang)心(xin)0脂(zhi)抗(kang)體IgG(ACA-IgG)ELISA 試劑盒 GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄(tao)糖(tang)轉運蛋(dan)白(bai)2(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HCMV UL23： 人(ren)巨(ju)細(xi)胞病(bing)毒UL23抗(kang)體 AGS人(ren)胃(wei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞

ECV-304細胞，人(ren)臍(qi)靜脈(mai)內(nei)皮細胞 銅(tong)綠假(jia)單胞桿(gan)菌(jun)(綠膿(nong)桿(gan)菌(jun)) 人(ren)真(zhen)皮成纖維(wei)細胞-總(zong)RNAHDF-a NA 人(ren)抗(kang)心(xin)0脂(zhi)抗(kang)體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒 ANP(atrial natriuretic peptide) 心(xin)肽(心(xin)素(su))抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HECA： HECA蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 HA Others H5N8 甲型流(liu)感(gan) H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

ATDC5小鼠(shu)胚(pei)胎瘤(liu)細胞POU6F2： 轉錄因子(zi)RPF1抗(kang)體 U937細胞，組織細胞淋巴瘤(liu) 人(ren)肺巨細胞癌(ai)(PG)的(de)低轉移亞系,PG-LH7細胞 腸(chang)動脈(mai)內(nei)皮細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

ADAM9 Others Mouse 小鼠(shu) ADAM9 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)甲(jia)狀旁(pang)腺激(ji)素(su)(PTH)ELISA試劑盒 LIFR  大(da)鼠(shu)白(bai)血病(bing)抑(yi)制因子(zi)受體 96T

PHAP1： 蛋(dan)酸酶2A抑(yi)制劑1抗(kang)體 CL-0292MKN45(人(ren)胃(wei)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

2V6.11人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培(pei)養(yang)基(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)甲(jia)狀旁(pang)腺激(ji)素(su)(PTH) ELISA 試劑盒 FT4(Mouse Free Thyroxine)  小鼠(shu)遊(you)離(li)甲狀腺(xian)素 96T

Pinin： 橋(qiao)粒(li)相關(guan)蛋(dan)白(bai)DRS抗(kang)體 VCAM1 Others Human 人(ren) CD106 / VCAM1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀察細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀細(xi)胞說(shuo)明(ming)書，了解細胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條件壹致，若由於培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀察細胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問題，部分(fen)細胞由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現象(xiang)。觀察好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的培(pei)養(yang)基用於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會出現不(bu)穩(wen)定(ding)的情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問題解決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條件新配制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。