BAF3小(xiao)鼠原(yuan)B細(xi)胞株

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究使用、不得(de)用於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮中進行(xing)長期(qi)保(bao)存。使用程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商品(pin)介(jie)紹：

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以下(xia)細(xi)胞培養(yang)凍存處理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液的凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)含(han)適量培養(yang)基的培養(yang)瓶中培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂離子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞消(xiao)化情況(kuang)，若細(xi)胞大部(bu)分變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液按(an)1:2比例分到新的含8 mL培(pei)養(yang)基的新皿(min)中或者瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數量加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍存液，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲存。記錄凍存管(guan)位置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司(si)正在出售(shou)的產品(pin)：

原(yuan)代(dai)神(shen)經膠(jiao)質細(xi)胞培養(yang)特制添(tian)加劑Many types of cells包(bao)裝：5/2.5/1ml 大鼠整合(he)素(su)αM(ITGαM)ELISA試(shi)劑盒(he) Horse IgG/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標記馬IgG 0.3ml

LIMK1： 單(dan)絲酸蛋(dan)白激酶1抗(kang)體(ti) 小(xiao)鼠原(yuan)B細(xi)胞株;BaF3

Dami(人巨(ju)核(he)細(xi)胞白血病(bing)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)絨毛間(jian)充(chong)質(zhi)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞HVMF 大鼠整合(he)素(su)α6(ITGα6)ELISA試(shi)劑盒(he) Horse IgM/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標記馬IgM 0.3ml

LMP7： 低分子量蛋白酶(mei)體(ti)7抗體(ti) CM-M096小(xiao)鼠表皮角質形(xing)成(cheng)細(xi)胞培養(yang)基100mL

 大鼠整合(he)素(su)α2+β1(ITGA2+ITGB1)ELISA試(shi)劑盒(he) human IgG/RBITC 羅(luo)丹明(ming)標記人IgG 0.3ml

HSP90 alpha： 熱(re)休克蛋白90α/HSP90 α抗(kang)體(ti) HA Others H3N2 甲(jia)型流感(gan) H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

615小(xiao)鼠狀(zhuang)肺腺(xian)癌(ai)瘤株(zhu);P615 人(ren)抗(kang)雙鏈(lian)DNA抗(kang)體(ti)/天然DNA抗體(ti)(dsDNA)ELISA 試(shi)劑盒(he) HCV-NS4a 丙型肝炎(yan)病(bing)毒(du)-NS4a(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

Hemoglobin Beta： 血紅(hong)蛋(dan)白β抗(kang)體(ti) 人胚(pei)肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞;WI-38 [WI38]

F9(小(xiao)鼠畸(ji)胎(tai)瘤細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人(ren)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細(xi)胞系/IgR;MDCK/IgR 人(ren)抗(kang)鼠抗體(ti)(HAMA)ELISA 試(shi)劑盒(he) HEV 戊型肝炎(yan)病(bing)毒(du)(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HABP2： 透(tou)明質(zhi)酸結(jie)合(he)蛋(dan)白2抗(kang)體(ti) 人胚(pei)肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞;HFL1

BAF3小(xiao)鼠原(yuan)B細(xi)胞株Hce-8693 人盲(mang)腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(未分化) 大鼠4(KLK4)ELISA試(shi)劑盒(he) C5a(Mouse Complement fragment 5a) 小(xiao)鼠補體(ti)片(pian)斷(duan)5a 96T

PNCK： 鈣/鈣調素(su)依賴蛋(dan)白激酶1β/CaMKIβ抗(kang)體(ti) C6細(xi)胞，腦膠(jiao)質瘤細(xi)胞 人肺(fei)巨細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞,HLAmP細(xi)胞 肺大動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠3(KLK3)ELISA試(shi)劑盒(he) bFGF  大鼠堿性成(cheng)纖(xian)維生長(chang)因子 96T

PKM2： 酸激酶-M2抗(kang)體(ti) CL-0257BC-009(人癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

293T人胚(pei)腎(shen)細(xi)胞 Human embryonic kidney cell line 293T 人胚(pei)腎(shen)細(xi)胞 大鼠10(KLK10)ELISA試(shi)劑盒(he) C3a(Mouse Complement fragment 3a) 小(xiao)鼠補體(ti)片(pian)斷(duan)3a 96T

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到細(xi)胞後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁等現象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現象(xiang) 發生請(qing)及時和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀細(xi)胞說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子等，確保(bao)細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養(yang)條(tiao)件不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞出現(xian)問題，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的培養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中進行(xing)培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同條(tiao)件的培養(yang)基用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便於(yu)和(he)我司技術部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因，個別敏感(gan)細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定(ding)的情況(kuang)，請及時和(he)我們聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞 的具體(ti)情況(kuang)，以便我們的技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的培養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細(xi)胞培 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。