BALB/3T3 clone A31小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅供(gong)科研(yan)研(yan)究使用、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

壹、商(shang)品介紹：

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終止消化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比例進(jin)行分瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養液(ye)終

止消化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移入-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中進行長期保(bao)存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操作(zuo)

1) 復蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養凍存(cun)處理僅供(gong)參考，具體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含適量(liang)培養基的培養瓶中(zhong)培養過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用(yong)不含鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並脫(tuo)落，迅(xun)速拿回操作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕打勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按1:2比例分到(dao)新(xin)的含8 mL培養基的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長狀態良好時，可(ke)進行細胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培養液(ye)，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無血清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍存(cun)管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是(shi)否完好，培養液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述現(xian)象 發(fa)生請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確保細(xi)胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致，若由(you)於(yu)培養條件(jian)不壹致而導致細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的培養瓶或(huo)培養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件(jian)的培養基用(yong)於(yu)細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不穩定(ding)的情況(kuang)，請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸用的培養基 (灌(guan)液培養基) 不能再用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的培養基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售的產品(pin)：

CHO-K1倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細(xi)胞(bao)亞(ya)株(zhu) CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS 大(da)鼠(shu)著(zhe)絲(si)粒(li)蛋(dan)白E(CENPE)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Monkey IgG/RBITC 羅丹(dan)明標(biao)記(ji)猴IgG 0.3ml

LDHA： 乳酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(mei)抗(kang)體 TNFSF13B Others Human 人(ren) BAFF / TNFSF13B 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

原代(dai)內皮(pi)細胞(bao)培養特(te)制(zhi)添加(jia)劑(ji)Many types of cells包(bao)裝：5/2.5/1ml 大鼠(shu)蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)異麥芽糖(tang)酶(mei)(SI)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Monkey IgM/RBITC 羅丹(dan)明標(biao)記(ji)猴IgM 0.3ml

phospho-LKB1 (Thr363)： 0酸化(hua)絲(si)酸(suan)/蘇酸蛋(dan)白激(ji)酶抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)腦瘤細(xi)胞(bao);BC3H1

E.G7-OVA(小鼠(shu)T淋巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人(ren)卵巢(chao)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)HOF 大(da)鼠(shu)粘(zhan)膠(jiao)蛋(dan)白/肌(ji)腱蛋(dan)白C(TN-C)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Mouse IgM/RBITC 羅丹(dan)明標(biao)記(ji)小(xiao)鼠(shu)IgM 0.3ml

FKBP52： 熱(re)休克蛋(dan)白56抗(kang)體 NIH/3T3, 小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)系(xi)

SF126細胞(bao)，人(ren)腦瘤細(xi)胞(bao) 表(biao)皮(pi)葡萄(tao)球(qiu)菌(jun) 人(ren)腎(shen)上(shang)皮(pi)細胞(bao)總(zong)RNAHREpiC NA 人(ren)抗(kang)腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質抗(kang)體(AAA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HSP-60( Heat shock protein-60) 熱(re)休克蛋(dan)白-60(抗(kang)原) 0.5mg

HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP： 熱(re)休克蛋(dan)白70相(xiang)互(hu)作(zuo)用蛋(dan)白抗(kang)體 HA Others H4N6 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

正常(chang)小鼠(shu)Sertoli細(xi)胞(bao);TM4 人(ren)抗(kang)神(shen)經元(yuan)核抗(kang)體2型(xing)/抗(kang)Ri抗(kang)體(ANNA-2/Ri)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HSP-70 peptide 熱(re)休克蛋(dan)白-70(多(duo)肽抗(kang)原) 0.5mg

DNAJA1： 熱(re)休克蛋(dan)白相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4抗(kang)體 人(ren)臍靜(jing)脈(mai)內皮(pi)細胞(bao)(人(ren)膀胱(guang)癌細(xi)胞(bao)汙(wu)染(ran));ECV-304 [ECV304;ECV 304]

BALB/3T3 clone A31小鼠(shu)胚(pei)胎(tai)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)PEG3： PEG3蛋(dan)白抗(kang)體 OXSR1 Others Human 人(ren) OXSR1 / OSR1 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)

HCT 116 人(ren)結(jie)腸癌(ai)細胞(bao) 大(da)鼠(shu)激(ji)活(huo)素(su)A(ACVA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Human anti-Sa-antibody  人(ren)抗(kang)Sa抗(kang)體 SHZ-88細(xi)胞(bao)，大(da)鼠(shu)癌(ai)細(xi)胞(bao) 人(ren)肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao)(轉(zhuan)染(ran)TK基因(yin)的GLC-82細胞(bao)),GLC-82-TK細(xi)胞(bao) 肺泡上(shang)皮(pi)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(fang)(1ml)

LSAMP Others Human 人(ren) LSAMP 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 大鼠(shu)激(ji)活(huo)素(su)A(Activin A)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody)  人(ren)抗(kang)神(shen)經元(yuan)核抗(kang)體 CL-0248ZR-75-30(人(ren)癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶×2

OS-RC-2人(ren)腎(shen)癌細(xi)胞(bao) Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)激(ji)活(huo)蛋(dan)白C(APC)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ICAM-1 (mouse) 小鼠(shu)細(xi)胞(bao)間(jian)粘(zhan)附(fu)分子(zi)1 96T

PD-1： 程序(xu)性死(si)亡1抗(kang)體 TNFRSF10D Others Human 人(ren) AILR4 / TNFRSF10D / DCR2 / CD264 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照)