BV2小(xiao)鼠小(xiao)膠(jiao)質細(xi)胞

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科研研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使之脫落，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使之脫落，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉入液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期保存(cun)。使用程序

降溫(wen)盒(he)可直接(jie)放入-80℃。

壹、商品(pin)介紹：

二(er)、細(xi)胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供(gong)參考，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻(yun)。然後將所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消化液浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而定(ding)），然(ran)後在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞消化情況，若細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後裝入無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生長狀(zhuang)態(tai)良好時，可進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清液，用PBS清洗壹遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加入無(wu)血清細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標識。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位置(zhi)以便(bian)下次拿取(qu)。

公司(si)正在出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

LIM protein： 脂(zhi)肪(fang)瘤相關蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細(xi)胞 癌(ai)細(xi)胞,MDA-MB-157細(xi)胞 Ana-1(鼠巨(ju)噬細(xi)胞)

IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照) 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白A1前體(Pre-Apo-A1)ELISA試(shi)劑盒(he) PRL Poultry  PRL 禽類(lei)酶(mei)聯免(mian)疫ELISA試(shi)劑盒(he) 96T

Laminin subunit beta-4： 層(ceng)粘(zhan)連(lian)蛋白(bai)β4抗(kang)體 KM小(xiao)鼠子(zi)瘤(liu)株(zhu);U27

NR8383大(da)鼠肺泡巨(ju)噬細(xi)胞 Alveolar macrophages of NR8383 rats F12K培(pei)養(yang)基(ji)(SIGMA)+20%FBS 大(da)鼠載(zai)脂(zhi)蛋(dan)白A1(apo-A1)ELISA試(shi)劑盒(he) E2  魚雌二(er)醇(chun) 96T

GnRH-associated peptide I： 黃體激素釋(shi)放激素/釋(shi)放激素抗(kang)體 AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

U251人膠(jiao)質瘤細(xi)胞 Human glioma cell line U251 DMEM+10% FBS 人(ren)抗(kang)巨細(xi)胞病(bing)毒抗(kang)體IgM(ai-CMV IgM)ELISA 試(shi)劑盒(he) MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱(cheng)：MYC 致(zhi)癌(ai)基(ji)因(yin)(抗(kang)原) 0.5mg

Phospho-HER3(Tyr1328)： 0酸化(hua)HER3受(shou)體抗(kang)體 兔(tu)主動脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞;CCC-SMC-1 腦(nao)神(shen)經瘤細(xi)胞，Neuro-2A細(xi)胞 SH3細(xi)胞，小(xiao)鼠B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞雜(za)交瘤(liu)細(xi)胞

CD40 Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴(hou) / 恒河(he)猴(hou) CD40 / TNFRSF5 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照) 人(ren)抗(kang)巨細(xi)胞病(bing)毒抗(kang)體IgG(ai-CMV IgG)ELISA 試(shi)劑盒(he) N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1) 核受(shou)體輔助(zhu)抑制(zhi)因(yin)子(抗(kang)原) 0.5mg

Phospho-HER4 (Tyr1162)： 0酸化(hua)HER4抗(kang)體 人間(jian)充(chong)質(zhi)幹(gan)細(xi)胞-臍(qi)帶(dai)

U251細(xi)胞，人(ren)神(shen)經膠(jiao)質瘤細(xi)胞 滑假絲(si)酵母 人海馬趾(zhi)神(shen)經元RNAHN-h miRNA5 μg 人(ren)抗(kang)巨噬細(xi)胞抗(kang)體(ai-macrophage Ab)ELISA 試(shi)劑盒(he) Nestin 巢(chao)蛋白(bai)(神(shen)經上(shang)皮(pi)幹(gan)細(xi)胞蛋(dan)白(bai))(抗(kang)原) 0.5mg

BV2小(xiao)鼠小(xiao)膠(jiao)質細(xi)胞HelaS3 大(da)鼠基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)13(MMP-13)ELISA試(shi)劑盒(he) LSP(Human liver specific lipoprotein)  人抗(kang)肝特異(yi)性(xing)脂(zhi)蛋(dan)白抗(kang)體 HCC1428細(xi)胞，人(ren)癌(ai)細(xi)胞 人(ren)小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)胞,LTEP-P細(xi)胞 晶(jing)狀(zhuang)體(ti)上(shang)皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)

NRP1 Others Human 人 Neuropilin-1 / NRP1 / CD304 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照) 大(da)鼠基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)13(MMP-13)ELISA 試(shi)劑盒(he) EMAb(Human eye muscle antibody)  人抗(kang)眼(yan)肌(ji)抗(kang)體 CL-0184PANC-1(人胰腺癌細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

5637人膀胱(guang)癌細(xi)胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS 大(da)鼠基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)12(MMP12)ELISA試(shi)劑盒(he) PDGF  大(da)鼠血(xue)小(xiao)板(ban)衍生生長因(yin)子 96T

PCDH11X： 原鈣(gai)粘(zhan)附(fu)蛋(dan)白(bai)11X抗(kang)體 TNFRSF4 Others Human 人 TNFRSF4 / CD134 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

高背鯽(ji)魚尾鰭(qi)細(xi)胞;GBJd 大(da)鼠基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)11(MMP11)ELISA試(shi)劑盒(he) LPL(Mouse lipoprotein lipase) 小(xiao)鼠脂(zhi)蛋(dan)白脂(zhi)酶(mei) 96T

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液、渾(hun)濁等現象，若有上(shang)述(shu)現象 發生請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細(xi)胞說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞因(yin)子等，確(que)保細(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問題(ti)，責(ze)任由 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎片，是正常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以消化，懸浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件的培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到細(xi)胞後前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部溝通 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現不穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以便(bian)我們的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供(gong)科研使用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照說明(ming)書細(xi)胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞後第(di)壹次傳代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。