C2C12小鼠(shu)成(cheng)肌細胞

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀察，待細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀察，待細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於凍存管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液氮中進行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序

降溫盒(he)可直接(jie)放(fang)入-80℃。

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存處理(li)僅供參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存管在(zai) 37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞懸液加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天(tian)換液並檢查(zha)細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況而定），然後(hou)在(zai)顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓並脫落，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸液按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細胞生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞凍存。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液，裝入無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數量加(jia)入無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍存液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細胞(bao)懸液，註意凍存管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將凍存管放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便(bian)下次(ci)拿(na)取(qu)。

公司(si)正在(zai)出售的產(chan)品(pin)：

IGF1 Protein Human 重組人(ren) IGF1 / IGF-I 蛋(dan)白 大鼠(shu)原(yuan)激活(huo)的蛋(dan)白激酶(mei)1/MAP激酶(mei)1(MAPK1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ) 大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性(xing)雕(diao)亡(wang)相(xiang)關因(yin)子 96T

MAPK6： 原(yuan)活(huo)化(hua)蛋(dan)白激酶(mei)6抗(kang)體(ti) IL5 Others Canine 狗(gou) IL5 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

大鼠(shu)腎(shen)動(dong)脈平(ping)滑(hua)肌細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)原(yuan)激活(huo)蛋(dan)白激酶(mei)激酶(mei)激酶(mei)6(MAP3K6)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Annexin A2 human c  人(ren)膜粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白 Ⅱ ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) 96T

phospho-MST4 + MST3 + STK25 (Thr178 + Thr190 + Thr174)： 0酸(suan)化(hua)絲(si)酸/蘇(su)酸蛋(dan)白激酶(mei)MST4,MST3,STK25抗(kang)體(ti) UM-UC-3, 人(ren)膀胱移行(xing)細胞(bao)癌(ai) 小鼠(shu)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao),3T3/e細(xi)胞(bao) J774A1(單核細(xi)胞(bao)巨噬細胞(bao))

CD1B Others Human 人(ren) CD1B / CD1A 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)原(yuan)激活(huo)蛋(dan)白激酶(mei)14(MAPK14)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG  小鼠(shu)0酸(suan)甘(gan)油(you)酯(zhi) 96T

Histone H3 (Tri Methyl K4)： 基(ji)化(hua)組蛋(dan)白H3抗(kang)體(ti) 人(ren)臍(qi)靜脈內(nei)皮細(xi)胞;HUV-EC-C

HBL-100(人(ren)整(zheng)合(he)SV40基(ji)因(yin)的上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0361HPAC(人(ren)胰(yi)腺腺(xian)泡上(shang)皮(pi)癌(ai))5×106cells/瓶×2 水(shui)牛皮膚(fu)成纖(xian)維(wei)樣細(xi)胞(bao);WB-S2 人(ren)抗(kang)甲(jia)型肝(gan)炎病(bing)毒(du)IgM抗(kang)體(ti)(ai-HAV)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) NGF- Beta 神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子-β(多(duo)肽片(pian)斷抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HMGCR： 三(san)羥基(ji)基(ji)還原(yuan)酶(mei)抗(kang)體(ti) 人(ren)髓(sui)核細(xi)胞(bao)RNAHNPC miRNA5 μg

RWPE-2(人(ren)前列(lie)腺正常(chang)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)抗(kang)甲(jia)型肝(gan)炎病(bing)毒(du)IgG抗(kang)體(ti)(ai-HAV)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Ang I/AT1(Angiotensin I) 血管緊(jin)張素(su)I抗原(yuan) 0.5mg

Heparan Sulfate Proteoglycan 2： 乙(yi)酰(xian)肝(gan)素蛋(dan)白多(duo)糖(tang)2 0.1ml

C2C12小鼠(shu)成(cheng)肌細胞Hep G2 人(ren)肝(gan)癌(ai)細胞(bao) 大鼠(shu)基(ji)脲敏感性(xing)胺(an)氧化(hua)酶(mei)(SSAO)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody)  人(ren)抗(kang)0脂抗體(ti) NCI-H1755[H1755]細(xi)胞，人(ren)肺(fei)癌(ai)細胞(bao) 人(ren)胚肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao),HELF細(xi)胞(bao) 卵巢上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml)

ERBB3 Others Mouse 小鼠(shu) HER3 / ErbB3 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)基(ji)己(ji)糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM) 小鼠(shu)糖(tang)原(yuan)0酸(suan)化(hua)酶(mei)同工酶(mei)MM 96T

PCDHA8： 原(yuan)鈣(gai)粘(zhan)附蛋(dan)白α8抗(kang)體(ti) CL-0168Neuro-2a/N2a(小鼠(shu)腦(nao)神(shen)經(jing)瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

SW 982 [SW-982, SW982]人(ren)滑(hua)膜肉(rou)瘤細(xi)胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)基(ji)端(duan)前心(xin)肽(-ProANP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Col III  大鼠(shu)Ⅲ型(xing)膠(jiao)原(yuan) 96T

PRSS10： 絲(si)酸(suan)蛋(dan)白酶(mei)10抗(kang)體(ti) TIMP2 Others Human 人(ren) TIMP2 / TIMP-2 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

三(san)、培(pei)養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有(you)漏液、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若由於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致而(er)導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問題，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分(fen)細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞(bao)後前 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流。由於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感細(xi)胞(bao)會出現(xian)不穩定的情況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知細胞 的具體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。