C3H/10T1/2 Clone8 小(xiao)鼠胚(pei)胎(tai)成纖維細(xi)胞

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不(bu)得(de)用於臨床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後按 1:2 比例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液終

止消(xiao)化，輕輕(qing)吹打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期保存。使用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可直接放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商(shang)品介紹(shao)：

二、細(xi)胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供參(can)考，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化液浸潤所有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止消(xiao)化。輕輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比例分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長狀態良(liang)好時，可進(jin)行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡PBS，進(jin)行細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞數(shu)量加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管做好標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以便下(xia)次拿(na)取。

公司正在出(chu)售的(de)產(chan)品(pin)：

H4-II-E-C3(大(da)鼠肝癌(ai)細(xi)胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠(shu)腎小(xiao)管上皮(pi)細(xi)胞MREpiC 大(da)鼠原(yuan)卟啉原(yuan)氧(yang)化酶(PPOX)ELISA試劑(ji)盒 CTAP III (Human connective tissue-activating peptide III ,CTAP III )  人結(jie)締(di)組(zu)織活化肽(tai)Ⅲ 96T

MUL1： E3泛(fan)素(su)連接酶MUL1抗體 CM-M001小(xiao)鼠肺微(wei)血(xue)管內皮(pi)細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標簽) 大鼠(shu)誘導型壹氧(yang)化合(he)成酶(iNOS)ELISA試劑(ji)盒 IL-7(Rat Interleukin-7)  大鼠白介(jie)素(su)7 96T

MAGP2： 纖微(wei)絲相(xiang)關糖蛋白2抗體 METAP2 Others Mouse 小(xiao)鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

大(da)鼠腎小(xiao)管上皮(pi)細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠誘導型合(he)酶(NOS2)ELISA試劑(ji)盒 M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR)  人巨(ju)噬細(xi)胞集(ji)落(luo)刺激因子受體 96T

Hexokinase 3： 己(ji)糖激(ji)酶3抗體 CL-0462UMR-106(大(da)鼠骨肉瘤(liu)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

A172細(xi)胞，人膠質(zhi)母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 桔(ju)青黴(mei) 人表(biao)皮黑(hei)色(se)素(su)細(xi)胞-深色素(su)RNAHEM-d miRNA5 μg 人抗肌(ji)聯蛋(dan)白抗體(TTN)ELISA試(shi)劑盒 AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血(xue)管緊(jin)張(zhang)素(su)Ⅱ-1型(xing)受體抗原(yuan) 0.5mg

HBV pre S1 protein： 人pre S1/S2蛋白抗體 HA Others H5N1 甲(jia)型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照)

人膀(pang)胱癌(ai)細(xi)胞;5637(HTB-9) 人抗肌(ji)動蛋(dan)白抗體(AAA)ELISA 試(shi)劑盒 NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導的(de)激(ji)酶(抗原(yuan)) 0.5mg

HBV pre S1 protein： 人pre S1蛋白抗體 人男(nan)性(xing)正常細(xi)胞;Hs68

C3H/10T1/2 Clone8  小(xiao)鼠胚(pei)胎(tai)成纖維細(xi)胞Hep-2 人喉(hou)表(biao)皮癌(ai)細(xi)胞 大(da)鼠肌(ji)微(wei)管素(su)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白9(MTMR9)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CRP  大鼠C反應(ying)蛋(dan)白 96T

PCDHAC1： 原(yuan)鈣粘(zhan)蛋(dan)白1抗體 SK-HEP-1細(xi)胞，人肝癌(ai)細(xi)胞 人低轉移肺癌(ai)細(xi)胞,95-C細(xi)胞 腦(nao)動(dong)脈血(xue)管內皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(fang)(1ml)

OSM Others Human 人 Oncostatin M / OSM 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 大鼠(shu)肌(ji)酸(suan)激酶同工(gong)酶MM(CK-MM)ELISA試劑(ji)盒 GP-BB(Mouse Glycogen phosphorylase BB) 小鼠糖原(yuan)0酸(suan)化酶同工(gong)酶BB 96T

Prominin 2： 造(zao)血(xue)幹(gan)細(xi)胞抗原(yuan)CD133相關(guan)蛋白抗體 CL-0160Molt-4(人急性(xing)淋巴(ba)母(mu)細(xi)胞白血(xue)病(bing)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

T24人膀(pang)胱移(yi)行(xing)細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞 T24 human bladder ansitional cell carcinoma cell 1640+10% FBS 大(da)鼠肌(ji)酸(suan)激酶同工(gong)酶MB(CK-MB)ELISA試劑(ji)盒 TPA  大鼠組織多肽(tai)抗原(yuan) 96T

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是(shi)否完(wan)好，培(pei)養(yang)液是(shi)否有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上述現(xian)象 發生(sheng)請及時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息，如細(xi)胞形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因子等(deng)，確保細(xi)胞培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責任(ren)由 客(ke)戶自行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態。因運輸問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎形成碎片，是(shi)正常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到細(xi)胞後(hou)前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便於和我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和我(wo)們聯系，告(gao)知細(xi)胞 的(de)具體情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的(de)技術人員跟蹤回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用按照說明(ming)書(shu)細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件新配制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後(hou)第(di)壹次傳代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。