ELISA實驗是科(ke)研人員(yuan)經常用到的(de)實驗方(fang)法。很(hen)多(duo)人(ren)覺(jiao)得ELISA很(hen)簡(jian)單(dan),其實不(bu)然。現(xian)在(zai)我(wo)們壹(yi)起(qi)了(le)解(jie)下(xia)ELISA實驗的(de)原(yuan)理(li)和常(chang)見(jian)辦(ban)法。
實驗原理(li):
1.包(bao)被(bei):抗原/抗體,固(gu)相(xiang)化(hua)
2.反響: 1)待測(ce)抗體/抗原; 2)酶(mei)標(biao)抗原/抗體
3.洗(xi)滌:使(shi)結合(he)在(zai)固相(xiang)上(shang)的(de)抗原抗體復(fu)合(he)物與(yu)未結合(he)的(de)別離
4.底(di)物顯色:定(ding)性(xing)/定量剖(pou)析(xi)

常用辦法:
1. 間接(jie)法
檢(jian)測(ce)抗體常(chang)用的(de)辦(ban)法, 首要用於對病原(yuan)體抗體的(de)檢(jian)測(ce)。
優(you)勢:二(er)抗能(neng)夠加強(qiang)信號,並(bing)且有(you)多(duo)種(zhong)挑選(xuan)能(neng)做(zuo)不(bu)同的(de)測(ce)定(ding)剖(pou)析(xi)。不(bu)加酶(mei)符(fu)號(hao)的(de)壹(yi)級抗體則能(neng)保(bao)留(liu)它(ta)多(duo)的(de)免(mian)疫(yi)反響性。
缺(que)陷(xian):交互反響發(fa)生的(de)機(ji)率(lv)較(jiao)高(gao)
2. 雙(shuang)抗體夾(jia)心(xin)法
檢(jian)測(ce)大分(fen)子抗原常(chang)用的(de)辦(ban)法。
優(you)勢:高(gao)活絡、高(gao)專(zhuan)壹(yi)性,抗原無(wu)須事(shi)前(qian)純化(hua)。
缺(que)陷(xian):抗原必定(ding)得具有(you)兩個(ge)以上(shang)的(de)抗體結合(he)部位。
3. 競(jing)爭(zheng)法
檢(jian)測(ce)小(xiao)分(fen)子半(ban)抗原(藥(yao)物、激素(su)等)。
優(you)勢:可適用比較不(bu)純的(de)樣(yang)本(ben),並(bing)且數(shu)據(ju)再現(xian)性很(hen)高(gao)。
缺(que)陷(xian):全(quan)體的(de)敏(min)感性(xing)和專壹(yi)性都(dou)較差(cha)。