CAL-27人舌鱗癌(ai)細胞

公司(si)產(chan)品僅供科研(yan)研究使用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液終止(zhi)消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培養(yang)液終

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放置(zhi)於凍存管中；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中進行(xing)長期保存。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品介紹：

二、細胞培養(yang)操(cao)作

1) 復蘇細胞：以(yi)下細胞培養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產(chan)品說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸液的凍(dong)存管在 37℃水浴中迅速(su)搖晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天換液並檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消化(hua)液浸潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培養(yang)瓶置於37℃培養(yang)箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而定），然後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部分(fen)變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞計(ji)數。

b、根據細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細胞凍(dong)存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍存管凍(dong)存1mL細胞懸液，註意凍(dong)存管做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲(chu)存。記錄凍(dong)存管位(wei)置以(yi)便(bian)下次(ci)拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在出售(shou)的(de)產(chan)品：

MTM1： 肌(ji)微管(guan)素1抗體 PRC1 Others Human 人 PRC1 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲細胞裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

大鼠(shu)前列腺上皮細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)遊離甲(jia)狀(zhuang)腺素(FT4)ELISA 試劑盒 AMPK  魚(yu)0酸(suan)化(hua)腺苷酸(suan)活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶 96T

MLF1： 髓細胞性(xing)白血(xue)病蛋(dan)白1抗(kang)體 SKOV3 [SK-OV-3], 人卵(luan)巢(chao)癌(ai)腺癌(ai)細胞系(xi) 小鼠(shu)胚胎(tai)成纖(xian)維(wei)細胞,3T6細胞 ES-2(人卵(luan)巢(chao)透明細胞癌(ai)細胞)

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)遊離甲(jia)狀(zhuang)腺激素(FT4)ELISA試劑盒 Fc Epsilon R II /CD23(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin E,Fc Epsilon R II )  E Fc段受體Ⅱ 96T

phospho-MEK1 (Thr386)： 0酸(suan)化(hua)原活(huo)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶1抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)胚胎(tai)成纖(xian)維(wei)細胞;3T3-L1

HIV2 gp41 + gp160： 人類免疫(yi)缺(que)陷病(bing)毒2型(xing)/2型(xing)艾滋(zi)病(bing)病(bing)毒gp41+gp160抗(kang)體(ti) 人肺動脈(mai)成纖(xian)維(wei)細胞RNAHPAF miRNA5 μg

SF17(人腦瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗骨骼(ge)肌(ji)抗體(ASA)ELISA 試(shi)劑盒(he) Nociceptin 孤(gu)肽(痛(tong)敏肽(tai))(抗(kang)原) 0.2mg

HIV2 gp120 + gp160： 人類免疫(yi)缺(que)陷病(bing)毒2型(xing)/2型(xing)艾滋(zi)病(bing)病(bing)毒gp41+gp160抗(kang)體(ti) NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha Protein (ECD) 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

狗骨髓(sui)間質(zhi)幹細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells 人抗弓(gong)形(xing)體(ti)IgM抗(kang)體(ti)(ai-tox IgM)ELISA 試劑盒 B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程(cheng)序(xu)性(xing)死(si)亡(wang)配體1(多(duo)肽) 0.5mg

HCG3： HCG3蛋(dan)白抗(kang)體 兔晶體上皮細胞永(yong)生系;N/N1003A(RLE) 結(jie)腸癌(ai)細胞，HCT 116細胞 M-1細胞，小(xiao)鼠(shu)腎集(ji)合(he)管(guan)細胞(SV40轉(zhuan)化(hua))

CAL-27人舌鱗癌(ai)細胞HO-8910 人卵(luan)巢(chao)癌(ai)細胞 大鼠(shu)肌(ji)球蛋(dan)白(MYS)ELISA試(shi)劑盒 CT-1(Mouse cardiotrophln 1) 小鼠(shu)心(xin)肌(ji)營(ying)養(yang)素1 96T

PTK5： 胃(wei)腸(chang)道(dao)相關酪酸(suan)激(ji)酶抗(kang)體 HPAC細胞，人胰腺癌(ai)細胞 人支氣管上(shang)皮細胞,16HBE細胞 皮膚(fu)肥(fei)大細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(1ml)

KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)肌(ji)球蛋(dan)白(Myosin)ELISA 試(shi)劑盒 ANA(Human Anti-nuclear Antibody)  人抗核(he)抗體(ti) CL-0136L6(大鼠(shu)成肌(ji)細胞)5×106cells/瓶×2

ZR-75-30人癌(ai)細胞 Human breast cancer cell line ZR-75-30 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)肌(ji)腱(jian)蛋(dan)白X(TNX)ELISA試(shi)劑盒 VD3  大鼠(shu)維生3 96T

phospho-p53BP1 (Ser25 + Ser29)： 0酸(suan)化(hua)p53結(jie)合蛋(dan)白1抗(kang)體 TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

三(san)、培養(yang)註意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細胞瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液是否(fou)有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞說(shuo)明書(shu)，了解細胞相(xiang)關信息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子(zi)等(deng)，確保細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致(zhi)細胞出現問題，責任由 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分(fen)細胞由於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮細胞直(zhi)接混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿(min)中，置於培養(yang)箱(xiang)中進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細胞後(hou)前 3 天各拍(pai)幾張細胞照(zhao)片(pian)，記錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我司(si)技(ji)術(shu)部溝通 交(jiao)流。由於運輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞會(hui)出現不穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知細胞 的(de)具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回訪(fang)直(zhi)至問題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細胞。     收(shou)到細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。