CHO倉鼠卵(luan)巢細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不(bu)得用於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後(hou)加入培養(yang)液終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二天換液(ye)並檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而定），然後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾下培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液，裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)4 min，棄去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量加(jia)入無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿取。

公(gong)司正在出(chu)售的產(chan)品(pin)：

CN2 Others Mouse 小(xiao)鼠 Coactin 2 / CN2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 大鼠胰島細(xi)胞(bao)抗(kang)體(ti)(ICA)ELISA 試劑盒 HSV- II IgM 單皰疹(zhen)Ⅱ型病毒(du) IgM(間(jian)接(jie)法(fa)二步(bu)法(fa))

MRP4： 多(duo)藥耐藥相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4抗(kang)體(ti) 人(ren)導(dao)管(guan)瘤細(xi)胞(bao);BT-474

PC-12(高(gao)分化(hua))大鼠腎(shen)上腺嗜(shi)鉻(ge)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高(gao)分化(hua)) PC-12 (high differeiation) rat pheochromocytoma cells (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠胰島素自(zi)身抗(kang)體(ti)(IAA)ELISA試劑盒 HSV- II IgM 單皰疹(zhen)Ⅱ型病毒(du) IgM (捕(bu)獲法(fa)，壹步(bu)法(fa))

MRP5： 多(duo)藥耐藥相(xiang)關(guan)蛋(dan)白5抗(kang)體(ti) SLAMF7 Others Mouse 小(xiao)鼠 SLAMF7 / CRACC 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照)

腦(nao)動脈血管(guan)平滑(hua)肌細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次方(fang)(1ml) 大(da)鼠胰島素自(zi)身抗(kang)體(ti)(IAA)ELISA 試劑盒 HSV- II IgM 單皰疹(zhen)Ⅱ型病毒(du) IgM (捕(bu)獲法(fa)，二步(bu)法(fa))

HEp-2(人(ren)喉表(biao)皮(pi)樣(yang)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0450SW 982(人(ren)滑膜(mo)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 人(ren)上皮(pi)細(xi)胞(bao);MCF-10A 人巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)炎性(xing)蛋(dan)白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋(dan)白酪酸(suan)0酸酶(mei)-1B(抗(kang)原) 0.5mg

HRPT2： 甲(jia)狀(zhuang)旁腺(xian)功(gong)能亢進(jin)蛋(dan)白2/細(xi)胞(bao)分裂(lie)周期73抗(kang)體(ti) 人(ren)肝(gan)細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHH NA

SUP-B15(人(ren)Ph+急(ji)淋(lin)白血病(bing)細(xi)胞(bao)系) 5×106cells/瓶(ping)×2 人巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)替代(dai)激(ji)活(huo)相(xiang)關(guan)化(hua)學因子(zi)1(AmAC-1)ELISA 試劑盒 RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維(wei)受(shou)體(ti)-α 多(duo)肽 0.5mg

HTRA2： 線(xian)粒(li)體(ti)絲酸(suan)蛋(dan)白酶抗(kang)體(ti) CNKSR3 Others Human 人(ren) MAGI1 / CNKSR3 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照)

兔(tu)脂(zhi)肪間(jian)質(zhi)幹細(xi)胞(bao) Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells 人巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)趨化(hua)因子(zi)(MCF)ELISA 試劑盒 glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風(feng)疹(zhen)病(bing)毒(du)糖蛋(dan)白多(duo)肽片段 0.5mg

CHO倉(cang)鼠卵(luan)巢細(xi)胞(bao)IL12A & IL12B Others Mouse 小(xiao)鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 大鼠核(he)轉(zhuan)錄(lu)因子(zi)p65(NF-kB p65)ELISA 試劑盒 IL-3  大(da)鼠白介素3 96T

phospho-PRKD1(Ser742)： 0酸(suan)化(hua)蛋(dan)白激(ji)酶C mu型抗(kang)體(ti) CL-0040BT-474(人(ren)導(dao)管(guan)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

NCI-H716 [H716]人(ren)結(jie)直(zhi)腸腺(xian)癌細(xi)胞(bao) NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠核(he)因子(zi)κB抑(yi)制(zhi)因子(zi)β(IκBβ)ELISA試劑盒 IL-5  大(da)鼠白介素5 96T

Profilin 1： 前(qian)白1抗(kang)體(ti) SERPIND1 Others Human 人(ren) SerpinD1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照)

兔(tu)主(zhu)動脈平滑(hua)肌細(xi)胞(bao);SMC 大鼠核(he)因子(zi)κB抑(yi)制(zhi)因子(zi)α(IκBα)ELISA試劑盒 ATGA/TGAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody)  人(ren)抗(kang)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)球(qiu)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 綿(mian)羊肺(fei)細(xi)胞(bao);OAR-L1

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出現(xian)問題，責(ze)任由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫度 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎片，是正常現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的培養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和(he)我司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由(you)於運輸(shu)的原因，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩定(ding)的情況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以便我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按照說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件(jian)新配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。