CHO-K1中國倉鼠卵(luan)巢細(xi)胞k1 亞克隆系(xi)

公司(si)產品(pin)僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例進(jin)行分(fen)瓶傳(chuan)代，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並放置於凍存管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍存管放置於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍存處理僅供(gong)參(can)考，具體操(cao)作步驟(zhou)以隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二(er)天換液(ye)並檢查細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無菌離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待細(xi)胞生(sheng)長狀態(tai)良好(hao)時，可進(jin)行細(xi)胞凍存。下(xia)面 T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌離(li)心管中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄去上(shang)清液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量加入無血(xue)清細(xi)胞凍存液(ye)，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存管做(zuo)好標(biao)識。將凍存管放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿取。

公司正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

35.1雜(za)交(jiao)瘤細(xi)胞抗(kang)CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠胰(yi)澱素(su)(IAPP)ELISA試劑盒 HSV- I IgG 單(dan)皰(pao)疹(zhen)Ⅰ型病毒(du) IgG(間接法二(er)步(bu)法)

MAP3K7IP3： NFKB激(ji)活(huo)蛋(dan)白1抗(kang)體 IL6R Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL6RA / CD126 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

腦(nao)靜(jing)脈血(xue)管平滑肌細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠(shu)胰(yi)澱素(su)(Amylin)ELISA試劑盒 HSV- I IgM 單(dan)皰(pao)疹(zhen)Ⅰ型病毒(du) IgM(間接法二(er)步(bu)法)

phospho-MAX protein(Tyr123)： 0酸(suan)化Myc基因相(xiang)關X因子(zi)抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)腎集(ji)合管(guan)細(xi)胞(SV40轉(zhuan)化);M-1

HFT-8810(人胎兒(er)胸腺細(xi)胞株(zhu)) 5×106cells/瓶×2 奇(qi)異(yi)變形(xing)桿菌 大(da)鼠胰(yi)澱素(su)(Amylin)ELISA 試劑盒 HSV- I IgM 單(dan)皰(pao)疹(zhen)Ⅰ型病毒(du) IgM(捕獲法壹步(bu)法)

Sp2/0-Ag14(小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 人巨噬(shi)細(xi)胞炎性蛋白(bai)5(MIP-5)ELISA 試劑盒 PS-1，Presennillin-1(CT) 早(zao)老素(su)蛋白(bai)-1(S182) 0.5mg

HORMAD2： 異(yi)質(zhi)核糖(tang)核(he)蛋白U2樣(yang)蛋白(bai)抗(kang)體 LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

C57BL/6小(xiao)鼠(shu)脂肪間(jian)質(zhi)幹(gan)細(xi)胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells 人巨噬(shi)細(xi)胞炎性蛋白(bai)3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒 BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 癌(ai)易感(gan)基(ji)因1抗(kang)原(yuan)(小(xiao)鼠(shu) 大鼠) 0.5mg

HRP2： 肝(gan)癌(ai)衍生(sheng)生長因子(zi)2抗(kang)體 大耳(er)山(shan)羊(yang)腎細(xi)胞;LDG-2 皮(pi)下(xia)結締(di)組織細(xi)胞，A9細(xi)胞 CT26.WT[CT26WT]細(xi)胞，小(xiao)鼠(shu)結腸癌(ai)細(xi)胞

CSF1R Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 人巨噬(shi)細(xi)胞炎性蛋白(bai)3α(MIP-3α/CCL20)ELISA 試劑盒 BRCA1 癌(ai)易感(gan)基(ji)因1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

CHO-K1中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵巢細(xi)胞k1 亞克隆系(xi)IL12A & IL12B Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)亨廷頓蛋(dan)白(bai)(HTT)ELISA試劑盒 apo-A1(Mouse apoprotein)  小(xiao)鼠(shu)載脂蛋(dan)白(bai)A1 96T

phospho-PTPN7 (Ser246)： 0酸(suan)化非(fei)受(shou)體(ti)型蛋白酪酸(suan)0酸(suan)酶7抗(kang)體 CL-0048Ca Ski(人上(shang)皮(pi)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

T84人結腸(chang)腺(xian)癌肺(fei)轉移細(xi)胞 The cell T84 of human colon adenocarcinoma of lung metastasis D-MEM/F-12培(pei)養(yang)基+5%FBS 大(da)鼠(shu)黑素(su)瘤抑(yi)制(zhi)性活(huo)性(xing)蛋白1(MIA1)ELISA試劑盒 IL-2sR Beta  大(da)鼠白(bai)介(jie)素(su)2可溶(rong)性(xing)受(shou)體(ti)β鏈 96T

phospho-PTPN7 (Ser93)： 0酸(suan)化非(fei)受(shou)體(ti)型蛋白酪酸(suan)0酸(suan)酶7抗(kang)體 SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

兔(tu)腎細(xi)胞;RK-13 大(da)鼠黑色(se)素(su)細(xi)胞抗(kang)體(MC Ab)ELISA試劑盒 AMA(Human Anti-myocardial antibody)  人抗(kang)心肌抗(kang)體 大耳(er)山(shan)羊(yang)皮(pi)膚細(xi)胞;LDG-3

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首先觀(guan)察細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清比例、所需 細(xi)胞因子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條件(jian)壹致(zhi)，若由於培(pei)養(yang)條件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於溫(wen)度(du) 變化及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎形(xing)成碎片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞後(hou)前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請(qing)及時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞 的(de)具體情況(kuang)，以(yi)便我們(men)的(de)技術(shu)人員跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用按照說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件(jian)新配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。