CoC1人卵巢(chao)癌(ai)細胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍存管中；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降溫盒可直接(jie)放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹：

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培養瓶中培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二天換液並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄去培養上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培養箱中消化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌離心管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿中或者(zhe)瓶中，置於培養箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好時，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌離心管中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意凍(dong)存(cun)管做好標識。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記錄凍存(cun)管位置以(yi)便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司(si)正在(zai)出售的產品(pin)：

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao)) 大鼠結合(he)蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑(ji)盒 C-Peptide C-肽(tai)(夾(jia)心法(fa)二(er)步(bu)法(fa)) 96T

MMP-15： 基(ji)質(zhi)金屬蛋白酶-15抗(kang)體(ti) 人結直腸(chang)腺(xian)癌(ai)細胞(bao);HT-29

293-L.P.人胚腎(shen)細胞(bao) Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBS 大鼠結合(he)蛋白6(IGFBP6)ELISA試劑(ji)盒 C4  鮭(gui)魚補(bu)體蛋白4 96T

MMP-16： 基(ji)質(zhi)金屬蛋白酶-16抗(kang)體(ti) ADAM12 Others Human 人 ADAM12 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

內(nei)臟(zang)脂(zhi)肪細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(fang)(1ml) 大鼠結合(he)蛋白5(IGFBP-5)ELISA試劑(ji)盒 SAA (Rabbit Serum amyloid A)  兔(tu)血(xue)清(qing)澱粉(fen)樣(yang)蛋白A 96T

人卵巢(chao)腺(xian)癌(ai)細胞(bao);SK-OV-3 人巨噬細(xi)胞(bao)集落(luo)刺(ci)激(ji)因子(M-CSF)ELISA 試劑(ji)盒 SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗(kang)原) 0.5mg

Hepcidin-25： 鐵(tie)調(tiao)節(jie)蛋白25抗(kang)體(ti) 人胚胎(tai)皮(pi)膚成(cheng)纖維細胞(bao);HES

Hepa 1-6(小鼠肝癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0458U-118 MG(人腦(nao)星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu))5×106cells/瓶×2 人胎(tai)兒(er)胸腺細(xi)胞(bao)株(zhu);HFT-8810 [HFT8810] 人巨噬細(xi)胞(bao)活(huo)化(hua)因子(zi)(MAF)ELISA 試劑(ji)盒 BSEP peptide 膽(dan)汁酸鹽輸出泵(beng)蛋白抗(kang)原 0.5mg

HDDC2： HD域內(nei)含蛋白2抗(kang)體(ti) 人前列腺上皮(pi)細胞(bao)總(zong)RNAHPEpiC NA

SW 1353(人骨肉瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人巨噬細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)蛋白(MSP)ELISA 試劑(ji)盒 Secretin 分(fen)泌(mi)素(抗(kang)原) 0.5mg

CoC1人卵巢(chao)癌(ai)細胞(bao)IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao)) 大鼠核因子(zi)-κB亞(ya)基(ji)p65親(qin)和(he)肽(tai)(NF-κB p65)ELISA試劑(ji)盒 LR/Ob-R  大鼠苗條素受(shou)體(ti) 96T

Phospho-PDPK1(Tyr9)： 0酸(suan)化(hua)30酸肌(ji)醇依(yi)賴性(xing)蛋白激酶(mei)1抗(kang)體(ti) CL-0032BEL-7404(人肝癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

RWPE-1人正常(chang)前列腺上皮(pi)細胞(bao) RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF 大鼠核因子(zi)-κB亞(ya)基(ji)p65親(qin)和(he)肽(tai)(NF-κB p65)ELISA 試劑(ji)盒 PA-IgG/M/A(Human platelet antibodies IgG/M/A)  人抗(kang)血(xue)小板抗(kang)體(ti) SERPINC1 Others Human 人 SerpinC1 / SERPINC1 / AithrombinIII 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

犬腎(shen)細胞(bao);MDCK(NBL-2) 大鼠核因子(zi)κB受(shou)體(ti)激活(huo)因子(zi)配(pei)基(ji)(RANκL)ELISA試劑(ji)盒 Col II (Mouse Collagen Type II )  小鼠Ⅱ型膠(jiao)原 96T

Phospho-PDPK1(Ser410)： 0酸(suan)化(hua)30酸肌(ji)醇依(yi)賴性(xing)蛋白激酶(mei)1抗(kang)體(ti) 綿羊(yang)皮(pi)膚細(xi)胞(bao);OAR-S1

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首先觀察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養(yang)液是(shi)否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相關信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫度 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以消化(hua)，懸浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新(xin)的培養瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於培養箱中進行(xing)培養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件的培養基(ji)用(yong)於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩(wen)定(ding)的情況，請及(ji)時和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知細胞(bao) 的具體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技(ji)術人員跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培養細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的培養基(ji)來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。