FO細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研究(jiu)使用、不(bu)得用於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養

液(ye)終止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養基重懸，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商品介紹：

2、細(xi)胞凍存(cun)：

1）細胞生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養液(ye)終

止消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落，然後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞，並(bing)放置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長期保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參考(kao)，具體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說明(ming)書為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻。然後(hou)將所有(you)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並檢查細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果細(xi)胞密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而定(ding)），然後(hou)在顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝入無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)，置於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生長狀態(tai)良(liang)好時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍存(cun)。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養液(ye)，裝入無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血清細胞凍存(cun)液(ye)，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿(na)取。

公(gong)司(si)正在出售(shou)的(de)產(chan)品：

組織半-4（CASPASE-4）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒

BPE蛋白(bai)標記(ji)試劑(ji)盒（不含BPE）

細(xi)胞人體(ti)鼻病毒（rhinovirus）定(ding)性檢測(ce)試劑(ji)盒

石蠟切片(pian)組織CREB蛋白(bai)表(biao)達(da)熒光(guang)顯微鏡檢測(ce)試劑(ji)盒

轉基(ji)因棉(mian)花(hua)MON88913品系基(ji)因檢測(ce)試劑(ji)盒

胰抗(kang)原(yuan)修復(fu)溶(rong)液(ye)

組織鈣調神(shen)經(jing)磷酸(suan)酶(mei)（CALCINEURIN；PP2B）活(huo)性(xing)定(ding)磷比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒

100165001650023

冰(bing)凍切片(pian)乙酰脂(zhi)酶(mei)活(huo)性(xing)染色試劑(ji)盒

細(xi)胞花(hua)生四烯(xi)酸(suan)（arachidonic acid）高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒

肌(ji)動蛋白(bai)聚合(he)作(zuo)用（polymerization）檢測(ce)試劑(ji)盒

植(zhi)物硫酸(suan)酶(mei)（rhodanase）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒

石蠟切片(pian)組織CYP2B1蛋白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色光(guang)學顯微鏡檢測(ce)試劑(ji)盒

細(xi)胞基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)（MMP-12）活(huo)性(xing)熒(ying)光(guang)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒

CCK-8(水溶(rong)性四氮－8) 比(bi)色法(fa)細胞繁殖(zhi)測(ce)定(ding)試劑(ji)盒

粘(zhan)蛋白(bai)-1單(dan)克隆(long)抗(kang)體

甘(gan)油-3-磷酸(suan)酰(xian)基轉移(yi)酶(mei)4抗(kang)體

轉運(yun)蛋白(bai)/神(shen)經(jing)遞質(zhi)轉運(yun)體(ti)抗(kang)體

kelch樣(yang)蛋白(bai)13抗(kang)體

細(xi)胞角(jiao)蛋白(bai)17重組兔(tu)單(dan)克隆(long)抗(kang)體

ZSCAN4蛋白(bai)抗(kang)體

快(kuai)速(su)發(fa)育生長因子(zi)同源(yuan)蛋白(bai)2抗(kang)體

FO細(xi)胞ASMTL蛋白(bai)抗(kang)體

鋅指蛋白(bai)90抗(kang)體

三(san)、培(pei)養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後(hou)首先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生請及(ji)時和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細胞說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用培(pei)養基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保細胞培(pei)養條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞出現問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫(wen)度 變化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片(pian)，是正常現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮細胞直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基重懸 細(xi)胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養基用於細(xi)胞培(pei)養。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天各(ge)拍幾張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞狀態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏感細胞會出現不穩定(ding)的情況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯(lian)系，告知細(xi)胞 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤回訪(fang)直(zhi)至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能再用來培(pei)養細胞，請(qing)換(huan)用按照說明(ming)書細胞培(pei) 養條件新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基來培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。