COR-L23/CPR細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

壹、商品(pin)介(jie)紹：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程(cheng)序

降溫(wen)盒可(ke)直接(jie)放入-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅供(gong)參考，具體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第二天換液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中，使消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而(er)定），然後(hou)在顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便下(xia)次(ci)拿取。

公(gong)司正在出售的產(chan)品(pin)：

組(zu)織(zhi)二胺氧化酶(mei)（DAO）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定量檢(jian)測試(shi)劑盒

組(zu)織(zhi)甲基(ji)化(hua)組(zu)蛋白H3-K4染(ran)色(se)質(zhi)免(mian)疫(yi)沈澱分析（CHIP）試(shi)劑盒

組(zu)織(zhi)HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病(bing)毒(du)定性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒

載(zai)玻片細(xi)胞(bao)NF KAPPA B P65蛋白表(biao)達(da)NBT顯色光學顯微鏡檢測試(shi)劑盒

細(xi)胞(bao)脯（proline）含量比色法(fa)定量檢(jian)測試(shi)劑盒

活(huo)體(ti)細(xi)胞(bao)組(zu)織K（CATHEPSIN K）活(huo)性(xing)原(yuan)位(wei)熒光染(ran)色(se)檢測試(shi)劑盒

組(zu)織(zhi)TIE2激(ji)酶活(huo)性(xing)定量檢(jian)測試(shi)劑盒（A/B/C）

HOECHST33258簡(jian)易細胞(bao)核(he)形態(tai)染色試(shi)劑盒

石(shi)蠟(la)切(qie)片結締組(zu)織（CONNECTIVE TISSUE）改(gai)良(liang)格(ge)莫(mo)瑞三色(se)（MGT） 染(ran)色(se)試(shi)劑盒

組(zu)織(zhi)磷(lin)脂酶D（Phospholipase D）總(zong)活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定量檢(jian)測試(shi)劑盒

植(zhi)物(wu)銅(tong)ATP酶(mei)（Cu＋＋ －ATPase）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

水中腸(chang)球(qiu)菌(jun)（Enterococci）基(ji)因定性(xing)檢(jian)測試(shi)劑盒

冰(bing)凍(dong)切(qie)片組(zu)織IP3R受(shou)體(ti)蛋白表(biao)達(da)NBT顯色光學顯微鏡檢測試(shi)劑盒

體(ti)液(ye)基(ji)質(zhi)金屬（MMP-1）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定量檢(jian)測試(shi)劑盒

動(dong)物(wu)淋(lin)巴(ba)結組織(zhi)細胞(bao)分(fen)離(li)培(pei)養(yang)試(shi)劑盒

早期未(wei)分(fen)化(hua)網(wang)膜(mo)及(ji)晶(jing)狀體(ti)蛋白EURL抗(kang)體(ti)

鈣(gai)粘附(fu)蛋白8抗(kang)體(ti)

驅(qu)動(dong)蛋白家族(zu)成員(yuan)C2抗(kang)體(ti)

KATNAL1蛋白抗體(ti)

細(xi)胞(bao)結合蛋白樣抗(kang)體(ti)

ZCCHC4蛋白抗體(ti)

跨(kua)膜(mo)蛋白SEMA3D抗(kang)體(ti)

COR-L23/CPR細胞(bao)APC標記(ji)小(xiao)鼠CD3e單(dan)克隆抗(kang)體(ti)

鋅指蛋白800抗體(ti)

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若有上述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子(zi)等，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰亡破碎(sui)形(xing)成碎片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我司技術部溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原因，個(ge)別敏感細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情(qing)況，請(qing)及時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便我們(men)的(de)技術人(ren)員(yuan)跟蹤回訪直至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。