COR-L23細胞

公司(si)產品僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止消化，再輕輕吹(chui)打細胞使之脫落，然(ran)後(hou)將懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱(xiang)中培養；

壹、商品介紹：

2、細胞凍存：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下觀察，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止消化，輕(qing)輕吹(chui)打細胞使之脫落，然(ran)後(hou)將懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置於(yu)凍存管(guan)中；

4）先將細胞凍存管(guan)放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液氮(dan)中進行(xing)長(chang)期(qi)保存(cun)。使用程(cheng)序

降溫(wen)盒(he)可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培養(yang)凍存處(chu)理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟以隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書為主。將含(han)有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均勻。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所有細胞懸液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培養過夜(ye)（或(huo)將細胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約8 mL培(pei)養(yang)基，培養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳代：如(ru)果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培(pei)養箱中消化1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡下觀察細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止消化。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿中或(huo)者瓶(ping)中，置於(yu)培(pei)養箱中培養。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可進行(xing)細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞數量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清細胞凍存液(ye)，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將凍存管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記錄凍存管(guan)位(wei)置以便下次(ci)拿取。

公(gong)司(si)正在出售(shou)的(de)產品：

細胞二(er)胺(an)氧化酶（DAO）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞甲基(ji)化組(zu)蛋白(bai)H3-K4染色質(zhi)免(mian)疫沈澱(dian)分(fen)析(xi)（CHIP）試劑(ji)盒

細胞HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒定(ding)性(xing)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

石蠟切片組織(zhi)NF KAPPA B P65蛋白(bai)表(biao)達(da)熒(ying)光(guang)顯微(wei)鏡檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

通用型(xing)脯(pu)（proline）含量比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

冰凍切片組織(zhi)L（CATHEPSIN L）活(huo)性(xing)原(yuan)位(wei)熒(ying)光(guang)染色檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞TIE2激(ji)酶活(huo)性(xing)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒（A/B/C）

羅(luo)丹明(ming)123簡易(yi)細胞核外(wai)形態(tai)染色試(shi)劑(ji)盒

冰凍切片結締(di)組織(zhi)（CONNECTIVE TISSUE）格(ge)莫(mo)瑞(rui)（Gomori）染色試(shi)劑(ji)盒

細胞磷脂酶D（Phospholipase D）總活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

酵母(mu)銅(tong)ATP酶（Cu＋＋ －ATPase）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)量(liang)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

水(shui)中大腸(chang)菌群(qun)（coliform）基因熒光定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

載(zai)玻(bo)片(pian)細胞IP3R受體(ti)蛋白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色光(guang)學(xue)顯微(wei)鏡檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

組織(zhi)基質(zhi)金屬(shu)（MMP-1）活(huo)性(xing)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

動(dong)物肺(fei)組(zu)織(zhi)細胞分(fen)離(li)培(pei)養試劑(ji)盒

早期(qi)胎(tai)盤(pan)胰(yi)島(dao)素(su)樣肽(tai)INSL4抗(kang)體(ti)

鈣粘附蛋白(bai)-11抗(kang)體(ti)

驅動(dong)蛋白(bai)家(jia)族成員(yuan)C1抗(kang)體(ti)

Kartagener綜(zong)合征(zheng)相關(guan)蛋(dan)白(bai)RSHL3抗(kang)體(ti)

細胞結合(he)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti)

ZCCHC2蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

跨(kua)膜蛋白(bai)Sema3C抗(kang)體(ti)

COR-L23細胞APC標記小鼠(shu)CD38單(dan)克隆抗(kang)體(ti)

鋅指(zhi)蛋白(bai)79抗(kang)體(ti)

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀察細胞瓶是否(fou)完好，培(pei)養(yang)液是否(fou)有漏液(ye)、渾濁等現象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說明(ming)書，了解(jie)細胞相關(guan)信息(xi)，如(ru)細胞形態(tai)、所用培(pei)養基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條件不壹(yi)致而導(dao)致細胞出現問(wen)題，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下觀察細胞狀態(tai)。因運輸問題，部(bu)分(fen)細胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成碎(sui)片(pian)，是正常現(xian)象。觀察好細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以消化，懸(xuan)浮細胞直接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中，置於(yu)培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細胞照片，記錄細胞狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感細胞會出現不穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以便我(wo)們(men)的(de)技術人(ren)員(yuan)跟蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基) 不能(neng)再用來(lai)培養(yang)細胞，請換用按(an)照說明書細胞培 養(yang)條(tiao)件新配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。