CFSC-8B大鼠(shu)肝(gan)星(xing)形細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例進行分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中(zhong)進行長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供參考，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍，加4 mL培養基(ji)混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入含(han)適量培養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄去培養上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例(li)分到新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態良好(hao)時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入無血清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置以便下(xia)次(ci)拿取。

三(san)、培(pei)養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清比(bi)例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條件壹(yi)致，若由(you)於培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致而導致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責任由(you) 客戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸問題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化及劇烈碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒精消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議客戶收到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態，便於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩(wen)定的情況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具體情況，以便我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條件新(xin)配制的培(pei)養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

人(ren)小腦(nao)星形膠(jiao)質細(xi)胞(bao)( Hac) (1×106 ) 小鼠(shu)神(shen)經(jing)幹(gan)細(xi)胞(bao)(EGFP標(biao)記(ji)) Mouse 大鼠(shu)葡(pu)萄糖苷(gan)酸酶β(GUSβ)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IFN- Alpha  大鼠(shu)α幹(gan)擾(rao)素 96T

NLGN2： 神經(jing)連接(jie)蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體 敘(xu)利亞倉(cang)鼠(shu)腎(shen)細(xi)胞(bao);BHK-21

IL21R Protein Cynomolgus 重組(zu)食蟹(xie)猴(hou) IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽) 大鼠(shu)葡(pu)萄糖60酸異構(gou)酶(mei)(GPI)ELISA試(shi)劑(ji)盒 LTA(Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen)  人(ren)非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)抗(kang)原(yuan) 96T

NIPAL3： NIPA樣蛋(dan)白(bai)3抗(kang)體 MAP2K2 Others Human 人(ren) MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

小鼠(shu)角(jiao)膜(mo)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)葡(pu)萄糖60酸脫氫(qing)酶(G6PD)ELISA試(shi)劑(ji)盒 5-HT(Mouse 5-Hydroxytryptamine)  小鼠(shu)5羥色(se)胺 96T

IGLL1： 免疫球蛋(dan)白(bai)lambda樣肽(tai)1抗(kang)體 IL1RL1 Others Human 人(ren) IL1RL1 / ST2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

人(ren)腦血管(guan)周(zhou)細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHBVC NA 犬內皮(pi)素1(ET-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多藥(yao)耐藥相關(guan)蛋(dan)白(bai)3(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

phospho-IkB beta (Ser19)： NF-kappa-B抑制(zhi)子beta抗(kang)體 人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao);HT-29

WISH(人(ren)羊膜(mo)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao);BALB/C 3T3 犬免疫球蛋(dan)白(bai)E(IgE)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1) 多藥(yao)耐藥相關(guan)蛋(dan)白(bai)1(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

phospho-IKB epsilon (Ser22)： NF-kappa-B抑制(zhi)子epsilon抗(kang)體 原(yuan)代(dai)骨(gu)骼肌(ji)細(xi)胞(bao)特(te)制無血清添加(jia)劑(ji)Many types of cells包裝：1ml

CFSC-8B大鼠(shu)肝(gan)星(xing)形細(xi)胞(bao)RAB35： RAS相關(guan)蛋(dan)白(bai)癌(ai)基(ji)因(yin)Rab35抗(kang)體 ANPEP Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) ANPEP / APN / CD13 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照)

前列(lie)腺(xian)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)PEpiCM 大鼠(shu)α烯(xi)醇(chun)化(hua)酶(α-enolase)ELISA試(shi)劑(ji)盒 HSP-90(Human Heat Shock Protein 90)  人(ren)熱休(xiu)克蛋(dan)白(bai)90 96T

phospho-RACGAP1(Ser387)： 0酸化Rho GTP酶激活(huo)蛋(dan)白(bai)GAP抗(kang)體 769-P(人(ren)腎細(xi)胞(bao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2

EB病毒(du)轉(zhuan)化的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY0910 真(zhen)皮(pi)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)α-乳(ru)清蛋(dan)白(bai)(αLA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 HSP-70(Human Heat Shock Protein 70)  人(ren)熱休(xiu)克蛋(dan)白(bai)70 96T

Robo2： 軸突(tu)導向(xiang)受(shou)體蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體 CL-0270CRT(人(ren)神經(jing)膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2