NCI-H157人(ren)非(fei)小細(xi)胞肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品(pin)介紹：

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過夜（或將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所有細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而定），然後在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞大(da)部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養(yang)液，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管凍存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公司正(zheng)在(zai)出售的產(chan)品(pin)：

phospho-NRP1(Thr916)： 0酸化神(shen)經纖毛蛋白1抗體 SERPINB1 Others Human 人(ren) SerpinB1 / ELANH2 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

小鼠膀(pang)胱(guang)上(shang)皮細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠生長(chang)激素(su)釋放多肽(GHRP)ELISA試劑(ji)盒 SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine)  人二(er)級淋(lin)巴(ba)組(zu)織(zhi)趨(qu)化因(yin)子 96T

NF1： 1型(xing)神經(jing)纖維瘤(liu)抗體 EB細(xi)胞，牛(niu)胚(pei)氣管細(xi)胞 人(ren)結(jie)腸(chang)癌(ai)細(xi)胞,Ls-174-T細(xi)胞 CM-H077人(ren)心(xin)室(shi)肌細(xi)胞培養(yang)基100mL

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠生長(chang)激素(su)釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑(ji)盒 E-Cad(Human E-Cadherin)  人E鈣粘(zhan)著(zhe)蛋白(bai)/上(shang)皮性(xing)鈣黏(nian)附(fu)蛋(dan)白 96T

phospho-NF1(Ser2515)： 0酸化1型(xing)神經(jing)纖維瘤(liu)抗體 巨(ju)噬細(xi)胞培養(yang)基MaM

ILVBL： 乙酰(xian)乳酸合成(cheng)酶蛋白(bai)抗體 草(cao)魚腎(shen)細(xi)胞;GIK 人(ren)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞，PLC/PRF/5細(xi)胞 NIH:OVCAR-3(卵(luan)巢癌(ai)細(xi)胞)

IL1RN Others Rat 大(da)鼠 IL-1RA / IL1RN 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人(ren)S蛋(dan)白100B(S-100B)ELISA試(shi)劑(ji)盒 SOD2 (superoxide-dimutase-2) 超(chao)氧(yang)化物歧化酶2抗原(yuan) 0.5ml

IDH1： 異檸檬(meng)酸脫氫(qing)酶1抗體 大(da)額(e)牛(niu)與(yu)婆羅(luo)門(men)牛(niu)雜(za)交(jiao)F1代皮膚(fu)成(cheng)纖維樣(yang)細(xi)胞;BOS-6

H22細(xi)胞，小(xiao)鼠肝(gan)癌(ai)細(xi)胞 Neuro-2A(腦(nao)神經(jing)瘤細(xi)胞) EB病(bing)毒轉(zhuan)化(hua)的人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞;KMY0909 人(ren)STAT3蛋(dan)白抑(yi)制(zhi)分子(PIAS3)ELISA 試劑(ji)盒 Somatostatin/GRIH 抗原(yuan) 0.5mg

IKIP： IKK激酶相(xiang)互作(zuo)用蛋(dan)白(bai)抗體 CTHRC1 Others Human 人(ren) CTHRC1 人細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

NCI-H157人非(fei)小(xiao)細(xi)胞肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞人腦(nao)微(wei)血(xue)管內(nei)皮細(xi)胞cDNAHBMEC cDNA 大(da)鼠白(bai)介素(su)8(IL-8/CXCL8)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PAMY(Human Pancreatic Amylase)  人胰(yi) 96T

RNF113A： 環(huan)指蛋白113A抗體 EB病(bing)毒轉(zhuan)化(hua)的絨猴(hou)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞;B95-8

人胚(pei)腎(shen)細(xi)胞;293FT 人(ren)腎(shen)動脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠白(bai)介素(su)8(IL-8)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AlphaENOL(Human Alpha-enolase)  人α烯(xi)醇化酶 96T

RNF43： 環(huan)指蛋白43抗體 人(ren)絨毛膜間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞

小鼠骨(gu)髓間充質幹細(xi)胞(BMSCs) 大(da)鼠白(bai)介素(su)7受體(IL-7R)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Human Collagenase Type II  人膠(jiao)原(yuan)酶II 96T

三、培養(yang)註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液是(shi)否有漏液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和(he)我們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明書(shu)，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等，確保(bao)細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件壹致(zhi)，若由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件不壹致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞出現問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分細(xi)胞由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精消毒瓶壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶或培養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件的培養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和我司技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞會(hui)出現不穩(wen)定的情況，請(qing)及(ji)時和(he)我們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情況，以便(bian)我們的技(ji)術人員跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至問題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照說明書(shu)細(xi)胞培 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後第壹次(ci)傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。