NCI-H1975人肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品(pin)僅(jin)供科(ke)研研究使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

壹、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細胞(bao)大部分變(bian)圓並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後裝入(ru)無菌離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例分到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養基(ji)的新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶中，置於(yu)培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液，裝入(ru)無菌離心(xin)管中，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞(bao)計數。

b、根據細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做好標(biao)識。將凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管位置以便下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

Phospho-NFKB1 (Ser907)： 0酸(suan)化(hua)細(xi)胞(bao)核因子(zi)p50/k基(ji)因結(jie)合(he)核因子(zi)抗體(ti) 大鼠腎(shen)系(xi)膜細胞(bao);RMC

SW-13(人腎(shen)上(shang)腺(xian)皮(pi)質癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌細胞(bao)) 大鼠生(sheng)長(chang)分化(hua)因子(zi)1(GDF1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase)  小鼠L苯(ben)解酶 96T

Phospho-NFKB1 (Ser337)： 0酸(suan)化(hua)細(xi)胞(bao)核因子(zi)p50/k基(ji)因結(jie)合(he)核因子(zi)抗體(ti) 人胚腎(shen)細(xi)胞(bao);293 [HEK-293]

IL23 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白(bai) 大鼠腎(shen)足(zu)蛋白(bai)(NPHN)ELISA試(shi)劑(ji)盒 GSK  大鼠糖(tang)原(yuan)合(he)成(cheng)酶激酶(mei) 96T

Phospho-NFKB1 (Ser893)： 0酸(suan)化(hua)細(xi)胞(bao)核因子(zi)p50/k基(ji)因結(jie)合(he)核因子(zi)抗體(ti) DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

IL-15： 白介素(su)15抗體(ti) 腎(shen)系(xi)膜細胞(bao)Many types of cells包裝：5 ×105次方(fang)(1ml)

CCL7 Protein Human 重(zhong)組人 MCP-3 / CCL7 蛋白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人P糖蛋白(bai)/滲透(tou)性(xing)糖(tang)蛋白(bai)(P-gp)ELISA試(shi)劑(ji)盒 SSTR2 (somatostatin receptor 2) 受體(ti)2抗原(yuan) 0.5mg

Phospho-IRAK1 (Thr209)： 0酸(suan)化(hua)白(bai)介素(su)-1受體(ti)相(xiang)關(guan)激酶(mei)1抗體(ti) GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人腎(shen)動脈內皮(pi)細胞(bao)培(pei)養基(ji) 100mL 人P鈣黏蛋白(bai)/胎(tai)盤(pan)鈣黏蛋白(bai)(P-cad)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 SSTR3 peptide 受體(ti)3抗原(yuan) 0.5mg

iNOS： 合成(cheng)酶-2抗體(ti) 團頭魴尾鰭細(xi)胞(bao);WCF 人卵(luan)巢畸胎瘤(liu)細(xi)胞(bao)，PA-1細(xi)胞(bao) SK-OV-3(卵(luan)巢癌(ai)細(xi)胞(bao))

NCI-H1975人肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao)OMG Others Mouse 小鼠 OMG / OMGP (aa 1-245) 人細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠白(bai)介素(su)6(IL6)ELISA試(shi)劑(ji)盒 NNE(Human non-neuronal enolase)  人非(fei)神(shen)經(jing)元(yuan)性烯醇(chun)化(hua)酶 96T

Reticulon 1： 神經(jing)內分泌(mi)特(te)異(yi)性蛋白(bai)抗體(ti) 人肺巨(ju)細(xi)胞(bao)癌(ai)低(di)轉移(yi)細胞(bao)株;PG-LH7

CL-0174NRK-52E(大鼠腎(shen)小管導管上(shang)皮(pi)細胞(bao))5×106cells/瓶×2 大鼠白(bai)介素(su)6(IL-6)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase)  人多巴(ba)胺-β羥(qiang)化(hua)酶(mei) 96T

RDH11： 脫氫(qing)酶11/丙型肝(gan)炎(yan)病(bing)毒核心(xin)蛋白(bai)抗體(ti) EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人羊(yang)膜上皮(pi)細胞(bao)裂(lie)解物HAmEpiCL 大鼠白(bai)介素(su)5(IL-5)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CHAc(Human choline acetylase)  人乙(yi)酰化(hua)酶(mei) 96T

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀(guan)察細胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好，培(pei)養液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有上(shang)述現象(xiang) 發生(sheng)請及時和我們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血清(qing)比例、所需 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保細胞(bao)培(pei)養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞(bao)狀(zhuang)態。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或培(pei)養皿中，置於(yu)培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件(jian)的培(pei)養基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩(wen)定(ding)的情況，請及時和我們聯系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便我(wo)們的技術人員跟蹤(zong)回訪(fang)直至問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照說明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。