AR42J大鼠胰(yi)腺(xian)外分泌(mi)腺(xian)腫瘤(liu)細(xi)胞

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再輕輕吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕吹打(da)細(xi)胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放置於凍(dong)存管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存管放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中進行(xing)長期(qi)保存。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消化情況，若細(xi)胞大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶(ping)中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細(xi)胞及細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

     b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量加入(ru)無血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存管位置以便(bian)下次(ci)拿取(qu)。  

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

B2M Others Mouse 小(xiao)鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照(zhao)) 大(da)鼠前(qian)列腺(xian)素F(PGF)ELISA試(shi)劑盒 Trx(Human Thioredoxin)  人硫(liu)氧化還(hai)原蛋(dan)白(bai) 96T

Nfasc186： 神(shen)經(jing)束蛋(dan)白(bai)186抗體(ti) 主(zhu)動脈平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

L1210小(xiao)鼠白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞 L1210 mouse leukemia cells DMEM培(pei)養(yang)基(ji)+10%FBS 大鼠前(qian)列腺(xian)素F(PGF)ELISA 試(shi)劑盒 Cav-1(Human Caveolin-1)  人窖蛋(dan)白(bai) 96T

Phospho-NEDD4L (Ser342)： 0酸化泛素連(lian)接酶(mei)NEDD4-2抗體(ti) IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

CM-H100胎(tai)兒(er)表皮(pi)角化細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL 大鼠前(qian)列腺(xian)素E受(shou)體2(EP2)ELISA試(shi)劑盒 DA  大(da)鼠多(duo)巴胺 96T

VERO C1008 (E6)細(xi)胞，非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞 CHO/dhFr-(中國倉(cang)鼠二氫(qing)還(hai)原酶(mei)缺(que)陷(xian)細(xi)胞) 小(xiao)鼠T淋(lin)巴瘤(liu)細(xi)胞(雞OVA基(ji)因修飾(shi));E.G7-OVA 犬乙型肝(gan)炎表面(mian)抗原(yuan)(HBsAg)ELISA 試(shi)劑盒 IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白(bai)介(jie)素1β(白(bai)細(xi)胞介(jie)素-1β)(多(duo)肽(tai)抗原(yuan)) 0.5mg

IRAK1： 白(bai)介(jie)素-1受(shou)體相(xiang)關(guan)激酶(mei)1抗體(ti) SERPINA11 Others Mouse 小(xiao)鼠 SERPINA11 / Serpina11 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

人淋(lin)巴成纖維(wei)細(xi)胞總RNAHLF NA 犬乙(yi)酰(xian)受(shou)體抗體(ti)(AChRab)ELISA 試(shi)劑盒 IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白(bai)介(jie)素受(shou)體相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)樣(yang)1前(qian)體蛋(dan)白(bai)(抗原(yuan)) 0.5mg

Integrin alpha 5/CD49e/ITGA5： 整合素α5抗體(ti) 人上(shang)皮細(xi)胞;Ca Ski

V79(倉鼠肺(fei)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠前(qian)胃(wei)癌(ai)細(xi)胞;MFC 犬胰(yi)島(dao)素受(shou)體β(ISR-β)ELISA 試(shi)劑盒 IL-6(Interleukin-6) 白(bai)介(jie)素6(白(bai)細(xi)胞介(jie)素-6)(多(duo)肽(tai)抗原(yuan)) 0.5mg

AR42J大鼠胰(yi)腺(xian)外分泌(mi)腺(xian)腫瘤(liu)細(xi)胞RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)： 0酸化RNA聚(ju)合酶(mei)II CTD抗體(ti) 人羊(yang)膜(mo)細(xi)胞;HA

CM-M085小(xiao)鼠表皮(pi)角化細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL 大鼠β-骨(gu)膠(jiao)原交聯(βCTx)ELISA試(shi)劑盒 HSF-1(Human Heat Shock Factor 1)  人熱休克(ke)因子(zi)1 96T

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5)： 0酸化RNA聚(ju)合酶(mei)II CTD抗體(ti) PVR Others Mouse 小(xiao)鼠 CD155 / PVR 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

上(shang)皮細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)EpiCM-prf 大鼠β幹擾(rao)素(IFN-β/IFNB)ELISA試(shi)劑盒 VPI(Human vasopeptidase inhibitors)  人血管活性肽酶(mei)抑(yi)制劑 96T

RNASE4： 血管生(sheng)成素核糖(tang)核酸酶(mei)4抗體(ti) 293T(人胚(pei)腎細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首先觀察(cha)細(xi)胞瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述現(xian)象 發生(sheng)請及時(shi)和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說(shuo)明書，了(le)解細(xi)胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等，確(que)保細(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹(yi)致而導(dao)致細(xi)胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可(ke)以消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條件的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我司技(ji)術部溝(gou)通 交流。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞會出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況，請及時和我們(men)聯系(xi)，告知細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們(men)的技(ji)術人員跟(gen)蹤(zong)回訪直至(zhi)問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不能再用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請換用(yong)按照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制的培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。