寬鱗(lin)大孔菌(jun)說明書(shu)

寬鱗(lin)大孔菌(jun)說明書(shu) 實(shi)驗內(nei)容(rong)：
1. 稱量→溶(rong)化(hua)→調pH→過(guo)濾→分裝→加塞→包紮→滅菌(jun)→無(wu)菌(jun)檢(jian)查(zha) 
2.幹熱滅(mie)菌(jun)：裝入待(dai)滅(mie)菌(jun)物(wu)品→升(sheng)溫→恒溫→降(jiang)溫→開箱取(qu)物(wu) 
3.高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌：加水→裝物(wu)品→加(jia)蓋(gai)→加(jia)熱→排冷(leng)空(kong)氣→加(jia)壓(ya)→恒壓(ya)→降(jiang)壓(ya)回(hui)零→排汽→取(qu)物(wu)→無菌(jun)檢(jian)查(zha) 
4.過(guo)濾除(chu)菌(jun)：組(zu)裝滅菌→連(lian)接→壓濾→無(wu)菌檢(jian)查(zha)→清洗滅菌(jun)
寬鱗(lin)大孔菌(jun)說明書(shu)培養(yang)溫度(du)：  35-37℃　英文名(ming)稱(cheng)：Wide scale and large hole　培養(yang)保藏法:培養(yang)後(hou)於4—6℃冰(bing)箱內(nei)保存。

基(ji)本概(gai)念：

(1)  寬鱗(lin)大孔菌(jun)說明書(shu)菌(jun)群(qun)：由多種細菌混(hun)合組(zu)成的(de)相對(dui)穩定(ding)的(de)細菌群(qun)體，具(ju)有(you)某(mou)些(xie)共(gong)同(tong)性狀。如(ru)大腸菌群(qun)包括大腸桿(gan)菌、產氣腸細菌及(ji)他(ta)們(men)之(zhi)間(jian)的(de)過(guo)渡(du)類(lei)型(xing)。
(2) 菌(jun)屬(shu)：菌(jun)種的上(shang)壹級分類(lei)，通(tong)常性狀相近(jin)、親緣(yuan)關(guan)系密(mi)切的(de)若(ruo)幹(gan)菌種組(zu)成壹個菌屬(shu)，如(ru)芽(ya)孢桿(gan)菌屬(shu)、葡(pu)萄(tao)球(qiu)菌屬、乳(ru)桿(gan)菌屬(shu)等。
(3)是細菌基(ji)本的(de)分類(lei)單(dan)位，通(tong)常指(zhi)表(biao)型(xing)特(te)征(zheng)相似、親緣(yuan)關(guan)系接近(jin)的壹類(lei)細菌群(qun)體，與(yu)同(tong)屬內(nei)其(qi)他(ta)種有(you)著(zhe)明顯差異(yi)；當(dang)涉及(ji)到細菌保存時(shi)，菌種是指(zhi)細菌的(de)種子（用(yong)來(lai)保存）資(zi)源。
(4) 菌(jun)型(xing)：同(tong)壹菌種的不(bu)同(tong)細菌，在(zai)某(mou)些(xie)方(fang)面存在較(jiao)小(xiao)差異(yi)的(de)為同(tong)壹菌型(xing)，通(tong)常壹個菌種內(nei)的(de)細菌可以分(fen)為多種不(bu)同(tong)的菌型(xing)。
(5) 菌(jun)株(zhu)：由(you)壹個獨(du)立分離的單(dan)細胞系培養(yang)而成的(de)純遺(yi)傳型(xing)群(qun)體及其壹切後(hou)代，壹種微生(sheng)物(wu)的每壹個不(bu)同(tong)來(lai)源(yuan)的(de)純培養(yang)物(wu)均可稱為該菌種的壹個菌株(zhu)。
保存方法：
 寬鱗(lin)大孔菌(jun)說明書(shu)低(di)溫存法
①簡單(dan)保存法，將(jiang)瓊脂(zhi)斜面(mian)孢子培養(yang)物(wu)、菌絲(si)懸(xuan)浮液(ye)以及(ji)由麩(fu)皮、大米、小(xiao)米等谷物(wu)原(yuan)料制成的(de)孢子培養(yang)物(wu)置於4℃冰(bing)箱保存,保存時(shi)間不(bu)超(chao)過(guo)1～2個月(yue)，若(ruo)將(jiang)谷物(wu)原(yuan)料制備(bei)的孢子瓶(ping)抽(chou)真空並(bing)在(zai)棉(mian)塞上(shang)浸蠟(la),以(yi)隔(ge)絕外界空(kong)氣和(he)水(shui)汽,保持(chi)時(shi)間可達3～4個月(yue)；②液(ye)氮超(chao)低溫保存法，將(jiang)生(sheng)長穩定(ding)期(qi)的(de)細胞懸(xuan)浮在(zai)10%甘油或(huo)其他(ta)低(di)冰(bing)點(dian)液(ye)體中，密(mi)封(feng)於安瓿(bu)管(guan)內(nei)，然(ran)後(hou)控制(zhi)冷(leng)卻速度(du)，使安瓿(bu)管(guan)溫度(du)逐步(bu)下降(jiang)至(zhi) -35℃時(shi)，即可置於-150～-196℃的(de)液(ye)氮罐(guan)中保存。大多數(shu)微生(sheng)物(wu)如(ru)病(bing)毒(du)、噬(shi)菌體(ti)、多(duo)種細菌、放(fang)線(xian)菌、酵(jiao)母和(he)原(yuan)蟲、特(te)別(bie)是壹些(xie)用(yong)冷凍幹燥法有(you)困難的微生(sheng)物(wu)，都(dou)可用此(ci)法保存。
脫水存(cun)法
①沙(sha)土保存法，能(neng)產孢子的(de)細菌、放(fang)線(xian)菌及黴(mei)菌可采用(yong)此(ci)法保存,即將(jiang)沙(sha)和(he)土(tu)以(yi)3:2比(bi)例混合，經(jing)稀(xi)酸(suan)處(chu)理洗凈過(guo)篩,裝入小(xiao)試(shi)管(guan)內(nei),裝(zhuang)置高度(du)為1cm;滅菌2～3次(ci)，烘(hong)幹(gan)後(hou)即可將(jiang)在斜面培養(yang)基(ji)上(shang)生(sheng)長良好的孢子，用(yong)無(wu)菌蒸(zheng)餾(liu)水2～2.5ml制(zhi)成孢子懸(xuan)液(ye)，吸(xi)取(qu)少許(xu)加入沙(sha)土管(guan)中，經(jing)真空抽(chou)幹，外觀呈松散狀(zhuang)態(tai),於4℃冰(bing)箱保存，保存期可達5～7年(nian)。
② 冷(leng)凍(dong)幹(gan)燥法,將(jiang)孢子懸(xuan)浮液(ye)與(yu)保護(hu)劑（壹般用(yong)脫(tuo)脂(zhi)牛(niu)奶(nai)或(huo)血(xue)清(qing)）相混合(he)，放在(zai)安瓿(bu)管(guan)內(nei)於(yu)-20～-30℃的乙醇浴中速凍(dong)。然(ran)後(hou)，在低溫下用(yong)真空泵(beng)抽(chou)幹，並(bing)用(yong)五(wu)氧(yang)化(hua)二磷(lin)或(huo)幹冰(bing)使水(shui)汽結(jie)凍，熔封安瓿(bu)管(guan)，於低溫下保存。保存期可達5～10年(nian)之(zhi)久(jiu)。
③ 石(shi)蠟油封存(cun)法，在斜(xie)面菌(jun)種培養(yang)物(wu)上(shang),倒(dao)上(shang)滅菌(jun)後(hou)的石(shi)蠟油，高出斜(xie)面(mian)1cm，於(yu)4℃冰(bing)箱或(huo)低溫幹燥處保存，此(ci)法不(bu)適用(yong)於(yu)能(neng)利(li)用石(shi)蠟油作碳(tan)源(yuan)的微生(sheng)物(wu)，保存期為壹年(nian)以(yi)上(shang)。
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