BJ人(ren)皮(pi)膚成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用、不得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品介紹(shao)：

二、細(xi)胞培(pei)養操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處理僅(jin)供參考，具(ju)體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書為主。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培養(yang)基的(de)培養瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如果細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代(dai)培養。

    a、棄去培養上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細胞情況(kuang)而定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大部(bu)分(fen)變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。        

     c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍存：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面 T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上清液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿取。  

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞形態(tai)、所用培養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致而導致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎片，是(shi)正常現象。觀察(cha)好(hao)細胞狀態(tai)後，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到新的(de)培養瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養基用(yong)於(yu)細胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍幾張細胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸的(de)原因，個別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩定的(de)情況，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我(wo)們的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直至問題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培養基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能再用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說明(ming)書細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制的(de)培養基來(lai)培養細胞。     收(shou)到細胞(bao)後第壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品：

LUCA15： 抑制基因(yin)LUCA15抗體 CD69 Others Human 人(ren) CD69 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

心(xin)房(fang)肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠載脂蛋(dan)白B100(APOB100)ELISA試劑盒(he) IL-6 (Rabbit Interleukin 6)  兔白(bai)介素(su)6 96T

LST1： 淋巴(ba)細胞(bao)特異(yi)性轉(zhuan)運(yun)蛋(dan)白1抗體 小鼠胚胎成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞;C3H 10T1/2 2A6

G-401(人(ren)腎癌Wilms細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小鼠腦膜細胞MMenC 大鼠載脂蛋(dan)白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒(he) Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B  小鼠粘蛋(dan)白/粘(zhan)液(ye)素5B 96T

LEO1： RNA聚(ju)合酶相(xiang)關(guan)蛋(dan)白LEO1抗體 CM-M033小鼠肝實質細胞(bao)培(pei)養基100mL

HOXA9： 同源盒(he)蛋(dan)白HOXA9抗體 MLF, 小鼠淋巴(ba)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞

TJ905細胞，人(ren)膠(jiao)質瘤(liu)細胞(bao) 惡(e)臭(chou)假單(dan)胞菌(jun) 人(ren)肺間充(chong)質幹細胞總(zong)RNAHPMSC NA 人(ren)抗淋巴(ba)細胞(bao)毒抗體(ALA/LCA)ELISA 試劑盒(he) MAPK-1/2 原活化蛋(dan)白激(ji)酶(抗原) 0.5mg

HOXB5： 同源盒(he)蛋(dan)白HOXB5抗體 HA Others H16N3 甲(jia)型流感(gan) H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

野生型(xing)人(ren)c-kit受(shou)體細胞(bao)株(zhu);A7d 人(ren)抗鏈球菌(jun)溶(rong)血(xue)素(su)O/抗O(ASO)ELISA 試劑盒(he) MAPKK2 原活化蛋(dan)白激(ji)酶激(ji)酶 0.5mg

HEPACAM： 肝細胞(bao)粘(zhan)附分(fen)子(zi)抗體 人(ren)胚(pei)肺細胞(bao)VA13細胞(bao);WI-38 VA13亞(ya)系2RA

BJ人(ren)皮(pi)膚成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞HeLa 人(ren)細(xi)胞 大鼠基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)4(MMP-4)ELISA試劑盒(he) ICAM-3/CD50  大鼠細胞(bao)間粘(zhan)附分(fen)子(zi)3 96T

PARP： 多(duo)腺苷二0酸(suan)多(duo)聚(ju)酶抗體 MCF-7細胞(bao)，人(ren)癌細(xi)胞(bao) 人(ren)肺鱗(lin)癌細(xi)胞(bao),LTEP-s細胞(bao) 滑膜細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)

APCS Others Rat 大鼠 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 大鼠基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)4(MMP-4)ELISA 試劑盒(he) PAI-1  大鼠纖溶酶原激活物(wu)抑(yi)制因子(zi)1 96T

PTPRD： 酪酸(suan)0酸(suan)酶(mei)PTPδ抗體 CL-0200RWPE1(人(ren)前(qian)列腺上皮細胞(bao))5×106cells/瓶×2

JEG-3人(ren)絨(rong)毛膜癌細(xi)胞(bao) JEG-3 human choriocarcinoma cells MEM(GIBCO)+10%FBS 大鼠基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)3(MMP-3)ELISA試劑盒(he) BB-Ab(Human anti-B burgdorleri antibody)  人(ren)抗BB抗體 PLAT Others Human 人(ren) tPAβ 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)