CAKI-2人腎(shen)透(tou)明(ming)細胞癌

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

壹、商品(pin)介紹(shao)：

二、細胞培養操作

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下細胞培養凍存(cun)處理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具體操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸液加入(ru)含(han)適量(liang)培養基的培養瓶(ping)中培養過夜（或將(jiang)細胞懸液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養基，培養過夜）。第二天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳代：如果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代培養。

    a、棄去培養上清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞，將(jiang)培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細胞情況而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細胞消化(hua)情況，若細胞大(da)部分(fen)變圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞懸液按(an)1:2比例分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養基的新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培養箱(xiang)中培養。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可進(jin)行(xing)細胞凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養液，裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數。

     b、根據細胞數量(liang)加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍存(cun)液，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位置以(yi)便下次拿取(qu)。  

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否完好(hao)，培養液是(shi)否有(you)漏液、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關(guan)信息，如細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培養基、血清比例、所(suo)需 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞培養條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件(jian)不壹致而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細胞由(you)於(yu)溫度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培養基重(zhong)懸 細胞，並接種到(dao)新(xin)的培養瓶(ping)或培養皿(min)中，置於(yu)培養箱(xiang)中進行(xing)培養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件(jian)的培養基用(yong)於(yu)細胞培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張細胞照片(pian)，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部溝通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細胞會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的(de)情況，請及(ji)時和我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的具體情(qing)況，以(yi)便我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人(ren)員跟蹤回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養基 (灌液培養基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來培養細胞，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞培 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養基來培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品(pin)：

Matrin 3： 核(he)基質蛋(dan)白(bai)3抗體 HNE2, 人(ren)鼻咽(yan)癌細胞系 NIH SWISS小鼠(shu)胚(pei)細胞,NIH3T3細胞 A673(橫紋(wen)肌瘤(liu)細胞)

GP140 Others HIV 人類(lei)免(mian)疫缺(que)陷(xian)病(bing)毒Ⅰ型(xing) HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)遊(you)離(li)狀(zhuang)腺(xian)原酸(suan)(Free-T3)ELISA試(shi)劑盒(he) Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen, I CTP  小鼠(shu)Ⅰ型(xing)膠(jiao)原(yuan)交聯羧(suo)基末端(duan)肽(tai) 96T

MHC class I： 組織相容性復合(he)體蛋(dan)白(bai)1抗體 倉(cang)鼠(shu)/小鼠(shu)雜(za)交瘤細胞;145-2C11

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜(za)交瘤細胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅活(huo)血清 大(da)鼠(shu)遊(you)離(li)狀(zhuang)腺(xian)原酸(suan)(Free-T3)ELISA 試(shi)劑盒(he) Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I )  A Fc段(duan)受(shou)體Ⅰ 96T

MHC Class II： 組織相容性復合(he)體蛋(dan)白(bai)2抗體 CLEC14A Others Mouse 小鼠(shu) CLEC14A / EGFR-5 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

Phospho-HDAC7(Ser155)： 0酸(suan)化(hua)組蛋(dan)白(bai)去乙酰(xian)化酶(mei)7抗(kang)體 CD40 Others Canine 狗(gou) CD40 / TNFRSF5 人細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

兔(tu)骨(gu)髓(sui)間(jian)質幹細胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells 人抗(kang)核(he)糖核(he)蛋(dan)白(bai)抗體(RNP-Ab)ELISA 試(shi)劑盒(he) ATF6(activating transcription factor 6) 活(huo)化轉(zhuan)錄因子(zi)6抗(kang)原(yuan) 0.5mg

phospho-HDAC4 (Ser632)： 0酸(suan)化(hua)組蛋(dan)白(bai)去乙酰(xian)化酶(mei)4抗(kang)體 兔(tu)主動脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細胞;CCC-SMC-2 癌細胞，MDA-MB-231細胞 J774A.1細胞，小鼠(shu)單(dan)核(he)巨(ju)噬細胞

CD48 Others Rat 大(da)鼠(shu) CD48 / SLAMF2 / BCM1 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人抗核(he)仁纖維(wei)蛋(dan)白(bai)抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA 試(shi)劑盒(he) ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶(mei)通(tong)道蛋(dan)白(bai)抗原(yuan) 0.5mg

phospho-HDAC7(Ser486)： 0酸(suan)化(hua)組蛋(dan)白(bai)去乙酰(xian)化酶(mei)7抗(kang)體 CL-0446SUP-B15(人(ren)Ph+急(ji)淋(lin)白(bai)血病(bing)細胞系)5×106cells/瓶(ping)×2

CAKI-2人腎(shen)透(tou)明(ming)細胞癌p70 S6 kinase alpha： 核(he)糖體p70 S6蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)抗(kang)體 SK-OV-3[SKOV-3]細胞，人卵巢癌細胞 人支氣(qi)管(guan)上(shang)皮(pi)細胞,HBE細胞 腦膜(mo)細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

F9 Others Mouse 小鼠(shu) Coagulation Factor IX / FIX / F9 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)肌(ji)球蛋(dan)白(bai)重(zhong)鏈(lian)2(MYH2)ELISA試(shi)劑盒(he) VD  大(da)鼠(shu)維(wei)生(sheng) 96T

p53AIP1： p53調(tiao)節雕亡誘導蛋(dan)白(bai)1抗體 CL-0144LoVo(人(ren)大(da)腸(chang)癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

COLO 320DM 人結直(zhi)腸腺(xian)癌細胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)肌(ji)球蛋(dan)白(bai)重(zhong)鏈(lian)1(MYH1)ELISA試(shi)劑盒(he) IL-23(Mouse Interleukin 23) 小鼠(shu)白(bai)介素(su)23 96T

PTRH2： Bcl-2轉(zhuan)錄抑制因子(zi)1抗(kang)體 TEK Others Human 人(ren) Tie2 / CD202b 人細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)